程龙强
- 作品数:10 被引量:19H指数:4
- 供职机构:淮南市第一人民医院更多>>
- 发文基金:安徽省自然科学基金安徽省高等学校青年教师科研项目淮南市科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 人载脂蛋白M野生型和突变型表达载体的构建及鉴定
- 2011年
- 目的:构建人载脂蛋白M(ApoM)野生型和突变型原核表达载体pGEX-KG-ApoM及真核表达载体pcDNA3.1(+)-ApoM。方法:Trizol法抽提HepG2细胞总RNA,RT-PCR扩增ApoM全长基因,将基因片断重组到PMD18-T质粒中构建PMD18-T-ApoM重组质粒载体,转化到大肠埃希菌JM109后筛选阳性克隆,提取质粒酶切和测序鉴定。采用Sited-directedMutagenesis定点诱变试剂盒对ApoM基因进行体外定点诱变,DNA测序鉴定定点诱变成功与否。用双酶切方法分别将ApoM野生型和突变型基因定向连接到原核表达载体pGEX-KG和真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建野生型和突变型pGEX-KG-ApoM重组体和pcDNA3.1(+)-ApoM重组体,分别转化到大肠埃希菌DH5α内,提取质粒酶切鉴定和测序鉴定。结果:成功克隆了ApoM并构建了野生型和突变型原核表达载体和真核表达载体。结论:通过RT-PCR,定点诱变及基因重组技术成功构建野生型和突变型重组表达质粒pGEX-KG-ApoM和pcDNA3.1(+)-ApoM,为进一步研究ApoM的功能奠定了基础。
- 丁淑琴章尧陈昌杰杨清玲程龙强
- 关键词:载脂蛋白MPCDNA3.1(+)定点诱变
- 三氧化二砷诱导肿瘤细胞凋亡分子机制的研究进展
- 2008年
- 程龙强章尧陈昌杰
- 关键词:三氧化二砷肿瘤细胞凋亡半胱天冬酶
- 细胞色素P450 1A1基因多态性与宫颈癌的相关性被引量:6
- 2011年
- 目的探讨细胞色素P450 1A1(cytochrome P4501A1,CYP 1A1)基因MspⅠ酶切位点多态性及Ile/Val多态性与宫颈癌遗传易感性的关系。方法采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-restriction fragment length plogymorphism,PCR-RFLP)和等位基因特异性PCR(allele-specific PCR,as-PCR)检测宫颈癌患者(病例组,n=176)和同期体检女性健康人群(对照组,n=112)CYP1A1基因MspⅠ酶切位点多态性和Ile/Val多态性。结果比较病例组和对照组CYP1A1基因MspⅠ酶切位点基因型及等位基因T和C频率分布,差异无统计学意义(P=0.09);比较两组间CYP1A1 Ile/Val多态性发现,病例组3种基因型Ile/Ile、Ile/Val、Val/Val频率分布分别为19.3%、68.8%、11.9%,等位基因Ile、Val频率分布分别为53.7%、46.3%,与对照组比较差异有统计学意义(P=0.04)。结论细胞色素CYP1A1基因MspⅠ位点多态性与宫颈癌发病易感性无关联性,CYP1A1基因Ile/Val多态性与宫颈癌发病易感性有关联性。
- 石玉荣耿建程龙强王慧章尧
- 关键词:基因多态性宫颈癌遗传易感性
- CYP1A1基因多态性与宫颈癌的相关性研究
- <正>细胞色素P450 1A1(cytochrome P450 1A1,CYP1A1)是一类主要参与代谢活化多环芳烃(PHAs)化学致癌物的Ⅰ相酶,是一种肝外的氧化代谢酶,具有芳香烃羟化酶活性,可催化多种芳香烃化合物,经...
- 石玉荣程龙强王惠王丽华
- 文献传递
- 肝细胞癌中载脂蛋白M,肝受体同系物1和肝细胞核因子1α表达的相关性分析被引量:4
- 2010年
- 目的:探讨肝细胞癌(HCC)组织和癌旁组织中载脂蛋白M(apoM)、肝受体同系物1(LRH-1)和肝细胞核因子1α(HNF-1α)的表达并分析3者之间的相关性。方法:采用RT-PCR和免疫组化分别检测17例原发性肝细胞癌和相应癌旁组织中apoM、LRH-1、HNF-1αmRNA的表达及apoM和HNF-1α蛋白的表达。结果:apoM、LRH-1和HNF-1αmRNA及apoM和HNF-1α蛋白在癌组织中的表达均明显高于癌旁组织(P均<0.01)。LRH-1、HNF-1αmRNA和apoMmRNA表达均呈正相关关系(依次为r=0.463,P<0.01;r=0.356,P<0.05)。结论:肝细胞癌中apoM的表达和LRH-1及HNF-1α表达密切相关,LRH-1和HNF-1α可能是apoM表达的重要调节因子。
- 程龙强章尧陈昌杰杨清玲王惠
- 关键词:肝细胞癌载脂蛋白M
- 淮南地区幽门螺杆菌感染个体菌株基因多态性与感染结局的影响被引量:4
- 2014年
- 目的:探讨淮南地区幽门螺杆菌感染个体菌株基因多态性及其与感染结局的影响。方法:选取125例幽门螺杆菌(H.pylori,HP)感染的慢性胃炎、消化性溃疡患者,常规获取胃窦、胃体部粘膜,进行HP分离、培养,提取HP基因组DNA,采用随机扩增多态性DNA(RAPD)指纹分析法检测菌株基因多态性;125例患者均给予质子泵抑制、H2受体拮抗剂、铋剂为基础的三联或四联疗法治疗,治疗后4~6周进行14C-尿素呼气试验评估Hp根除情况;获取HP根除失败患者的胃窦、胃体黏膜进行HP分离、培养、鉴定,并采用RAPD指纹分析法检测菌株来源,评估HP基因多态性对治疗结局的影响。结果:cagA、iceA1、iceA2、vacAs1、vacAm1、babA2阳性率分别为92.80%、36.00%、93.60%、93.60%、29.50%、53.50%,cagA、iceA2、vacAs阳性率均高于其他基因类型阳性率(P〈0.05或P〈0.01),其他基因类型阳性率比较差异无统计学意义(P〉0.05)。经治疗后HP根除率为86.4%(107/125),14.4%(18/125)根除失败;18例根除失败患者中,15例患者治疗前后的菌株具有相同的指纹图谱,证实为原菌株复发,其中cagA、iceA1、iceA2、vacAs1、vacAm1、babA2阳性率分别为93.33%、13.33%、86.67%、93.33%、6.67%、20.00%,cagA、iceA2、vacAs阳性率均高于其他基因类型阳性率(P〈0.05或P〈0.01)。结论:cagA+、vacAs+、iceA2+为淮南地区HP感染的优势基因型,该基因型易导致HP根除失败;未发现babA2与HP感染结局存在相关性。
- 胡素侠杨立新程龙强蔡霞张荣波
- 关键词:幽门螺杆菌CAGA基因VACA基因ICEA基因
- 干扰肝细胞核因子-1α对HepG2细胞载脂蛋白M及胆固醇相关代谢酶表达的影响被引量:5
- 2011年
- 目的检测肝细胞癌和癌旁组织中肝细胞核因子(HNF)1α、肝受体同系物(LRH)-1与载脂蛋白(apo)M表达的相关陛,探讨HNF-1α对apoM、apoAI和胆固醇合成与转化关键酶表达的影响。方法RT—PCR检测人肝细胞癌组织和癌旁组织中HNF-1α、LRH-1apoM的表达水平。采用小干扰RNA(siRNA)在人肝癌细胞株HepG2细胞中干扰HNF1d表达后,RTPCR检测apoM、apoA—I及羟甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)、胆固醇7α-羟化酶1(CYP7A1)、法尼醇X受体(FXR)、小异源二聚体伴侣(SHP)-1的变化情况;Westernblot检测apoM在蛋白水平的变化情况。对不同数据进行单因素方差分析、配对t检验或直线相关分析。结果HNF-1α、LRH1、apoMmRNA在人肝细胞癌组织中明显高于癌旁组织(t值分别为-7.075,-8.803,-7.167,P值均〈0.01);HNF-1α和LRH-1与apoM的mRNA表达水平呈正相关(r=0.353,P〈0.01;r=0.523,尸〈0.01)。干扰HNF-1α后,与阴性对照相比,apoM、FXR、SHP1mRNA水平分别下降47.4%(F=77.627,P〈0.01)、47.9%(F=76.363,P〈0.01)、65.2%(F=365.772,P〈0.01),apoM蛋白水平下调54.3%(F=43.482,P〈0.01);HMGCR、CYP7A1mRNA水平分别升高101.1%(F=218.666,P〈0.01)、138.5%(F=171.926,P〈0.01);而对apoAI无明显影响(,==0.170,P〉0.05)。结论HNF-1α可提高apoM的表达水平,并通过促进胆固醇代谢关键酶的表达和抑制胆固醇代谢相关抑制因子的生成而促进胆固醇的转化,对心血管疾病具有保护作用。
- 章尧陈昌杰杨清玲程龙强王惠黄丽珠
- 关键词:载脂蛋白类RNA干扰
- 随机扩增多态性DNA分析法在幽门螺杆菌鉴定中的应用
- 2014年
- 目的探讨随机扩增多态性DNA(RAPD)分析法在在幽门螺杆菌(HP)菌株鉴定中的应用价值。方法选取该院65例HP感染的慢性胃炎或消化性溃疡患者,获取胃窦、胃体部黏膜进行HP培养,提取及纯化HP DNA后进行PCR反应,并采用RAPD分析HP基因指纹图谱;以同一HP菌株验证RAPD可重复性;65例患者均进行6个月以上的HP治疗,治疗后4∽6周评估HP治愈情况;对复发病例再次进行RAPD分析,观察RAPD指纹图谱变化。结果 65株菌株PAPD指纹图谱各不相同,但同一菌株传4代后,原代株与传代株进行PCR扩增,RADP指纹图谱完全一致。6例HP治疗后复发,3例RAPD指纹图谱与治疗前基本一致;3例产生不同RAPD指纹图谱。结论 RAPD分析法适用于HP基因多态性鉴定,是临床研究HP感染的实用方法,可用于HP复发和再感染鉴定。
- 胡素侠杨立新程龙强蔡霞张荣波
- 关键词:幽门螺杆菌随机扩增多态性DNA菌株基因多态性
- 淮南地区幽门螺杆菌感染个体菌株基因多态性与临床治疗
- 胡素侠杨立新程龙强吴汉霞胡友莹汪雪峰曾昭波李辉屈爱军蔡霞徐斌葛零巽
- 该项目采用随机扩增多态性DNA(RAPD)指纹分析法,检测了淮南地区125例慢性胃炎或消化性溃疡患者的Hp菌株基因型,并对125例患者给予以质子泵抑制剂、铋剂为基础的三联或四联疗法治疗,评估Hp基因型对治疗结局的影响。项...
- 关键词:
- 关键词:幽门螺杆菌感染
- 幽门螺杆菌基因多态性及其致病机制研究进展被引量:2
- 2013年
- 幽门螺杆菌是一种全球范围内的慢性感染性致病菌,除导致慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌等胃肠疾病外,还与慢性心血管疾病,肝脏及胆道疾病密切相关。研究表明,其基因结构多态性差异是导致不同临床表现的主要原因,近年来对Hp毒力因子及其基因多态性研究取得长足进展,本文对其主要的毒力基因多态性及可能的致病机制进行综述。
- 胡素侠张荣波杨立新程龙强
- 关键词:幽门螺杆菌毒力因子基因