王玉玲 作品数:8 被引量:33 H指数:5 供职机构: 东北农业大学动物医学学院 更多>> 发文基金: 黑龙江省“十五”科技攻关项目 黑龙江省科技计划项目 黑龙江省“十一五”科技攻关项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
犬细小病毒HL-1株VP2基因真核表达及抗体ELISA检测方法的建立 犬细小病毒(Canineparvovirus,CPV)属细小病毒科细小病毒属,是引起犬出血性肠炎和幼犬心肌炎的主要病原。
本研究利用猫肾细胞(F81)繁殖分离得到的HL-1株,并扩增了VP2基因。根据GenBa... 王玉玲关键词:犬细小病毒 VP2基因 基因克隆 真核表达 杆状病毒 间接ELISA 文献传递 犬细小病毒HL-01株的分离鉴定及VP2基因真核表达质粒的构建 被引量:7 2006年 从临床发病犬采集粪便样品,以F81传代细胞进行病毒分离,经血球凝集实验(HA)和血球凝集抑制实验(HI)初步鉴定为犬细小病毒。为进一步确诊,根据Genbank中已发表的犬细小病毒VP2基因序列设计并合成一对引物,通过聚合酶链反应(PCR)扩增出CPV VP2基因,酶切,测序加以鉴定。其序列与国际已发表的CPV-d(type 2)、CPV-1(5 type 2a)、CPV-3(9 type 2b)VP2序列同源性分别为98.97%,98.75%,98.69%,氨基酸序列的同源性分别为98.12%,97.60%,97.60%,从而证明此分离株为犬细小病毒。在获得VP2基因的基础上,为实现VP2蛋白的表达,构建了真核表达质粒pMel BacC-VP2。 王玉玲 范京惠 边亚娟 张炳丽 唐丽杰 李一经关键词:VP2基因 克隆 表达质粒 猪瘟病毒T细胞表位与猪细小病毒VP2融合基因在重组杆状病毒中的表达 被引量:6 2007年 将猪细小病毒分离株LJL12 VP2基因和猪瘟病毒多肽基因E290克隆至真核表达载体pMel Ba-cA,将该重组质粒与Bac-N-Blue DNA共转染昆虫细胞,并对表达产物进行分析,构建了表达猪瘟病毒T细胞表位和猪细小病毒VP2融合蛋白的重组杆状病毒。结果显示,获得了含VP2基因和E290基因的重组质粒pM-VP2-E290,昆虫细胞sf9的表达产物经SDS-PAGE、Western-blot检测后确定所表达的蛋白质分子质量大小约为67 ku,且具有天然蛋白的抗原特性。免疫电镜观察可见表达产物形成的病毒样颗粒。证实,成功构建了同时含有PPV VP2基因和CSFV特异性T细胞表位基因的重组杆状病毒,并在昆虫细胞中得到了高效表达。 范京惠 左玉柱 王玉玲 张炳丽 李一经关键词:猪瘟病毒 猪细小病毒 T细胞表位 VP2基因 应用PRV VP6蛋白McAb间接免疫荧光法检测猪轮状病毒 被引量:5 2007年 边亚娟 林长水 田志军 唐丽杰 王玉玲 张海峰 张炳丽 李一经关键词:猪轮状病毒 间接免疫荧光法 PRV 急性肠道传染病 蛋白 猪传染性胃肠炎S基因A D抗原位点在昆虫杆状病毒系统中的表达 被引量:2 2006年 张炳丽 唐丽杰 范京慧 王玉玲 边亚娟 钟涛 李一经关键词:杆状病毒系统 抗原位点 S基因 昆虫 养猪业发展 实验动物重要病毒病监控技术研究 刘怀然 李昌文 唐丽杰 陈洪岩 李一经 夏长友 关云涛 曲连东 姜骞 张天聪 王玉玲 杨丽娟 该课题为实验动物重要病毒病监控技术研究。初步建立了血清学检测方法;克隆了仙台病毒的4个主要结构基因(N,P,HN,F)并绘制了分子进化树;用大肠杆菌表达了SV-HLJ的核蛋白基因(N基因);首次将RT-PCR方法应用到实...关键词:关键词:仙台病毒 流行性出血热 犬细小病毒 抗猪轮状病毒VP6单克隆抗体的制备与鉴定 被引量:6 2006年 用纯化的重组PRV VP6蛋白免疫BALB/c小鼠,运用淋巴细胞杂交瘤技术,通过间接ELISA筛选,获得了1株稳定分泌抗PRV VP6的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名C5D10。经鉴定C5D10为IgG1亚类,杂交瘤细胞的平均染色体数为93,细胞培养液上清及腹水效价分别为18∶00和11∶×106,且C5D10单克隆抗体不与猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪伪狂犬病病毒发生交叉反应,显示良好的特异性。 边亚娟 林长水 王玉玲 李一经关键词:轮状病毒 单克隆抗体