王小强
- 作品数：9 被引量：16H指数：3
- 供职机构：国家人口计生委科学技术研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家社会公益研究专项计划河北省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程矿业工程更多>>
- 乙酰唑胺对大鼠精子发生和成熟的影响
- 2010年
- 目的:研究碳酸酐酶抑制剂对大鼠精子发生和成熟的影响。方法:乙酰唑胺混悬液(40mg/kg)给大鼠灌胃,分别于给药当天、1d和3d处死动物,进行睾丸、附睾称重、苏木素-伊红(HE)染色和光镜下观察分析;附睾尾剪碎计数精子密度、精子活力,染色后计数精子畸形比率;测定附睾管腔液α-葡糖苷酶水平;采用罗丹明(Rh)123荧光探针标记附睾精子,通过流式细胞仪检测线粒体膜电位。结果:给予乙酰唑胺的大鼠精子活力明显降低,畸形率显著增加,附睾精子线粒体膜电位明显降低,附睾管腔液α-葡糖苷酶水平有所下降,但睾丸和附睾无明显病理学改变。结论:碳酸酐酶抑制剂可能通过影响附睾精子成熟,对雄性生殖功能进行调控。
- 舒如明王小强卢文红周善杰于和鸣谷翊群葛争艳
- 关键词：乙酰唑胺睾丸附睾精子成熟水通道蛋白-1
- 一个未知的子宫雌激素反应蛋白ULF-250的鉴定被引量：4
- 2009年
- 鉴定一个未知的子宫雌激素反应蛋白ULF-250.去卵巢大鼠补充给予雌二醇造成子宫产生大量宫腔液(uterine luminal fluid,ULF),受雌激素调节的蛋白分泌其中.收集ULF分别进行SDS-PAGE和双向电泳(2-DE)分离;通过Western印迹和2D-Western确认抗ULF-250抗体识别的蛋白成分并与凝胶上的条带或斑点相对应;对目标蛋白分别用MALDI-TOF-MS和HPLC-ESI-MS/MS两种方法进行质谱分析并获得肽段序列数据;与蛋白数据库比对及文献检索鉴定未知蛋白.2D-Western显示抗ULF-250抗体特异识别的蛋白成分.从2D胶上切下对应的蛋白斑点进行MALDI-TOF-MS,结果提示:ULF-250是ebnerin/DMBT1.经SDS-PAGE分离的250 kD蛋白条带进行液-质联用分析,结果同样提示:ULF-250是ebnerin/DMBT1.与文献报道比较,ULF-250与ebnerin/DMBT1在子宫的组织定位和调节是相同的,认为ULF-250是子宫表达的ebnerin/DMBT1.通过2-DE结合质谱分析以及查阅文献,确认未知的雌激素反应蛋白ULF-250是ebnerin/DMBT1.此外,研究提示,该蛋白不仅在子宫上皮细胞表达而且分泌到子宫腔液中,其功能值得进一步研究.
- 程露阳杨松鹤孙铁成王小强胡玮齐晓伟于和鸣
- 关键词：双向电泳质谱
- 侧脑室微量注射瘦素对OEP大鼠子宫腔液蛋白表达的影响
- 2010年
- 目的:探讨瘦素通过下丘脑-垂体轴对子宫的调节作用。方法:应用双向凝胶电泳(2-DE)技术分离OEP大鼠侧脑室微量注射瘦素及生理盐水6h后的子宫腔液总蛋白,图像分析识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对差异表达的蛋白质点进行鉴定。结果:与生理盐水对照组相比,瘦素实验组有6个差异表达蛋白质,其中5个蛋白点升高,1个蛋白点降低。经过质谱分析结合数据库检索,获得有意义的蛋白点,上调蛋白点为补体B因子、冠蛋白、肌动蛋白结合蛋白、丝氨酸蛋白酶抑制剂B1、烯醇酶,下调蛋白点为补体C3。结论:这些差异表达蛋白涉及炎症反应、细胞分化、细胞迁移、细胞凋亡等功能,瘦素可能通过下丘脑-垂体轴从免疫、生殖等方面对子宫发挥调节作用。
- 程露阳董晓彤冯佩明王小强孙铁成杨松鹤乔跃兵
- 关键词：瘦素侧脑室注射双向电泳
- 附睾管腔液蛋白鉴定及精子表面GPI锚蛋白的探索性鉴定
- 目的：鉴定大鼠附睾管腔液中有可能参与精子成熟、贮存及保护的附睾管腔分泌蛋白以及精子表面的GPI锚蛋白。 方法：1,借助乙酰唑胺大鼠饲胃模型,采用电泳技术分离分析乙酰唑胺作用后附睾管腔液蛋白组份的变化；2,利用双向电泳结合...
- 王小强
- 关键词：附睾精子成熟乙酰唑胺双向电泳
- 文献传递
- 瘦素经POMC神经元对神经内分泌-生殖轴的影响被引量：4
- 2010年
- 目的:探讨瘦素(leptin)对神经内分泌-生殖轴的可能调节机制。方法:建立卵巢摘除补充雌激素(OEP)大鼠模型,动物随机分为leptin组、α-黑素细胞刺激素(α-MSH)组和生理盐水对照组,于侧脑室注射后1h、2h、4h和6h分别取血和脑组织。ELISA法检测血中促性腺释放激素(Gn-RH)、黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)浓度。Western印迹检测下丘脑组织中阿片促黑激素皮质素原(POMC)蛋白量的变化。结果:侧脑室注射leptin可促进GnRH、FSH、LH的分泌,而注射α-MSH则抑制GnRH、FSH和LH的分泌。注射leptin显著增加下丘脑中的POMC含量。结论:Leptin可能通过POMC神经元或与其他途径共同影响下丘脑-垂体生殖轴的分泌功能;POMC神经元发挥的调节作用可能晚于或弱于其它神经元。
- 杨松鹤赵连志王小强孙铁成程露阳乔跃兵
- 关键词：侧脑室注射瘦素Α-黑素细胞刺激素
- 双向电泳分离大鼠子宫组织提取物的最佳条件摸索
- 2010年
- 目的:建立并优化大鼠子宫组织提取物的双向电泳分离条件。方法:机械匀浆法制备子宫组织总蛋白提取物,采用不同方法处理样品及不同pH范围的固相梯度胶条进行双向电泳分析。结果:经丙酮沉淀处理的提取物在pH 5～8范围的固相梯度胶条进行双向电泳分离,可获得分辨率清晰和重复性较好的二维图谱。特别是在高分子量蛋白区域得到独立清晰的蛋白质斑点。结论:通过建立并优化双向电泳分离条件,为进一步分析生理与病理状态的子宫蛋白成分提供了技术支持。
- 程露阳杨松鹤孙铁成王小强于和鸣
- 关键词：子宫提取物双向电泳
- 三种精子质膜完整性检测方法的比较被引量：1
- 2009年
- 目的对6-羧基二乙酸荧光素／碘化丙啶（6-CFDA／PI）双荧光标记方法进行改良并应用于人精子质膜完整性的检测，并与单用伊红Y染色、低渗肿胀试验（HOS）两种检测方法进行比较。方法随机选择30例本所人类精子库志愿者精液标本（密度≥20×10^6／ml、活力（a＋b）≥50%），分别采用单用伊红Y染色、HOS和6-CFDA／PI双荧光标记试验检测精子质膜完整性。结果30例精液标本伊红Y染色活精子比率、HOS肿胀精子数比率、6-CFDA／PI双荧光标记结果分别为（68．8±7．6）％、（68．7±7．8）％和（67．9±7．8）％，两两比较，无显著性差异（P均〉0．05），但双荧光标记能显示死活精子的过渡状态。相关性分析结果显示，三种方法检测的活精子比率均与前向运动（a＋b）精子呈显著正相关。结论6-CFDA／PI双荧光标记检测方法与单用伊红染色、HOS两种常用检测精子质膜完整性方法具有一致性，同时能鉴定出精子过渡的中间状态。
- 舒如明卢文红李鸿周芳许剑锋王小强谷翊群
- 关键词：精子膜服装设计师染色技术染色试验曙红Y
- 过氧化物酶6在大鼠附睾中的表达及分布被引量：7
- 2010年
- 通过双向电泳结合质谱技术分离鉴定正常成年大鼠附睾头段与尾段管腔液中的蛋白组成,从附睾头段及尾段管腔液的22个差异蛋白点中鉴定出12个蛋白质.其中11个蛋白质在不同种属哺乳动物的附睾组织中已有鉴定报道,而过氧化物酶6(peroxiredoxin 6,Prdx6)为新发现的存在于附睾头段及尾段管腔液中的体液蛋白.采用RT-PCR、Western印迹及免疫组化技术,对该蛋白在大鼠附睾中的表达及分布进行了分析.实验表明,Prdx6与精子的成熟、贮存及保护有一定关系,其具体机制值得进一步深入研究.
- 王小强齐晓伟程露阳孙铁成舒如明王慧萍于和鸣
- 关键词：附睾双向电泳质谱
- 一种精子表面GPI锚定蛋白初步鉴定方法的建立
- 2014年
- 精子表面糖基磷脂酰肌醇（GPI）锚定蛋白（GPI-Aps）在精子不同阶段都发挥着关键作用．本研究介绍了嗜水气单胞菌毒素（aerolysin）作为生物探针来鉴定精子表面的GPI锚定蛋白．实验依次进行了嗜水气单胞茵培养、毒素提取纯化、多克隆抗体制备以及三明治蛋白印迹验证实验．凝胶蛋白分离实验显示，硫酸铵沉淀加Sephadex G-100层析柱纯化得到了分子质量为45kD高纯度细菌毒素；蛋白印迹实验验证了制备的多克隆抗体的特异性；三明治蛋白印迹结果显示，嗜水气单胞菌毒素能识别出12条精子脂筏提取蛋白条带，其分子质量主要分布在15～130kD之间；Alex488标记的免疫荧光实验显示，嗜水气单胞菌毒素识别的GPI锚定蛋白主要分布在精子头部和尾部．研究结果提示，嗜水气单胞菌毒素能够有效地识别精子表面的GPI锚定蛋白．
- 辛玲王慧萍王小强于和鸣
- 关键词：精子
