段丽
- 作品数:14 被引量:48H指数:5
- 供职机构:武汉大学中南医院更多>>
- 发文基金:湖北省自然科学基金湖北省科技攻关计划武汉市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 唾液酸化路易斯抗原X ssDNA适配子的筛选与鉴定被引量:7
- 2009年
- 目的建立体外获得唾液酸化路易斯抗原X(SLeX)ssDNA适配子(aptamers)的方法。方法构建长度为70m的初始随机单链DNA库,其中含30个随机序列,以溴化氰活化的琼脂糖小球为筛选介质,运用指数富集配体的系统进化技术(SELEX技术)获得SLeX的ssDNA适配子。将适配子库克隆、测序,采用DNAMAN软件对其结构进行分析,通过生物素-亲和素-辣根过氧化物酶显色系统测定适配子与SLeX的亲和力。结果经逐轮筛选,所得富集库与SLeX的亲和力逐步提高(A值从0.145增加到了0.460),大部分适配子克隆测序后与预期相符。结论经9轮筛选获得的ssDNA适配子与SLeX的体外结合有高度的特异性及亲和力。
- 吴红艳谢伟冯茂辉段丽余佳莉陈家宽吴洲清谢辉汪付兵
- 关键词:适配子克隆
- 埃兹蛋白(ezrin)在肝癌中的表达及其临床意义被引量:3
- 2009年
- 目的研究埃兹蛋白(ezrin)在正常肝、肝硬化组织及肝细胞癌(HCC)的表达情况,并探讨其表达与肝细胞癌侵袭转移的关系及其临床意义。方法用免疫组织化学SP法检测45例肝癌组织、23例癌旁肝硬化组织、12例正常肝组织中ezrin的表达,分析ezrin与肝癌临床病理因素之间关系。结果12例正常肝组织及23例肝硬化组织中未见ezrin表达,而在45例肝癌组织中ezrin阳性表达率为61.3%(27/45),两者差异有统计学意义(P<0.05)。且ezrin表达与肝癌分化程度、肿瘤有无转移相关(P<0.05)。与患者年龄、性别、肝癌大小无相关性(P>0.05)。结论ezrin表达与肝癌的转移及恶性程度有关,有助于预后判断及治疗方法选择,ezrin表达是反映肝癌生物学行为的有价值指标。
- 戴凤姣冯茂辉谢伟余佳莉段丽吴红艳谢辉
- 关键词:肝癌EZRIN免疫组织化学
- 特异结合唾液酸化LewisX抗原DNA适配子在肿瘤转移中的应用
- 谢伟冯茂辉汪付兵李春光魏正专吴洲清陈家宽胡明柏张京伟程伏林胡卫东段丽吴红艳
- 1.运用SELEX技术筛选唾液酸化LewisX抗原DNA适配子,分析该DNA适配子在乳腺癌早期转移诊断和治疗中的作用,为肿瘤的早期转移血清学、体内分子成像诊断及筛选新型抗肿瘤转移小分子药物奠定基础。应用该DNA适配子建立...
- 关键词:
- 关键词:肿瘤转移乳腺癌肿瘤诊断
- 上皮钙黏素及埃兹蛋白在胃癌和淋巴结转移灶中的表达及其意义被引量:11
- 2009年
- 目的检测胃腺癌组织和淋巴结转移灶中细胞骨架相关蛋白上皮钙黏素(E-cad)及埃兹蛋白(Ezrin)的表达,观察其与胃腺癌侵袭和转移的关系,探讨胃腺癌的浸润和转移机制。方法用SP免疫组织化学法检测80例胃癌和40例淋巴结转移灶中E-cad和Ezrin的表达。结果E-cad和Ezrin在癌旁正常胃黏膜上皮为胞膜表达,而在胃腺癌组织中E-cad出现胞膜、胞质两种表达形式,Ezrin在肿瘤细胞中则为胞质表达。在胃腺癌原发灶中,E-cad、Ezrin的表达与胃腺癌的分化程度相关。E-cad的膜表达及Ezrin的表达随分化程度降低而下降(P〈0.01;P〈0.05),E-cad的浆表达随分化程度降低而升高(P〈0.01)。E-cad浆表达的升高与浸润深度、淋巴结状态相关且在原发灶显著高于转移灶(P〈0.01;P〈0.05;P〈0.01)。在淋巴结转移灶中,E-cad的膜表达在淋巴结转移的早期阶段高于晚期阶段(P〈0.05)。另外,E-cad膜表达及Ezrin的表达呈正相关(P〈0.01)。结论胃腺癌中E-cad的表达异常导致了细胞之间的黏附力下降,从而在胃腺癌的侵袭和转移中发挥重要作用。埃兹蛋白参与调节胃腺癌细胞的分化,可能通过与E-cadherin/catenin作用来调控肿瘤细胞的黏附和侵袭。
- 田素芳谢伟熊永炎余佳莉段丽龚玲玲冯茂辉
- 关键词:胃癌细胞骨架蛋白表达
- Fas相关磷酸酯酶-1在肝癌中的表达及其临床意义被引量:6
- 2009年
- 目的观察肝癌中Fas相关磷酸酯酶(FAP-1)的表达,探讨FAP-1表达与增殖和凋亡的关系,并分析其意义。方法采用免疫组织化学SP法检测60例肝癌及15例癌旁肝硬化组织标本中FAP-1蛋白的表达水平,设置10例正常肝组织为对照组。结果FAP-1蛋白的阳性表达主要定位在细胞质内,少数也可见胞膜着色。FAP-1蛋白在正常肝组织中未见表达,癌旁肝硬化组织中的表达率为6.7%,而在恶性肿瘤中的阳性表达率分别为78.3%,与前两者比较差异有统计学意义(P〈0.01)。FAP-1的表达率随肿瘤的转移临床分期晚和肿瘤分化程度低而增加,并与分化程度和转移性显著相关(P〈0.05),而与年龄和肿瘤大小无明显相关(P〉0.05)。结论FAP-1在肝癌组织中有广泛表达,且在临床有转移分期晚和病理分级低的组织中表达增高。
- 戴凤姣冯茂辉谢伟余佳莉段丽吴红艳谢辉
- 关键词:肝肿瘤免疫组织化学
- FAP-1在肺癌中的表达及其临床意义被引量:1
- 2009年
- 目的:观察肺癌患者癌组织中Fas相关磷酸酯酶(FAP-1)的表达,初步探讨FAP-1表达在肿瘤发生发展中的作用,并分析其意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测60例肺癌及15例肺良性病变标本中FAP-1蛋白的表达水平,设置10例正常肺组织为对照组。结果:FAP-1蛋白的阳性表达主要定位在细胞质内,少数也可见胞膜着色。FAP-1蛋白在正常肺组织中未见表达,良性病变中的表达率为6.7%,而在恶性肿瘤中的阳性表达率为78.3%,与前两者相比差异有显著性(P<0.01)。FAP-1的表达与肿瘤的分化程度和转移呈显著相关(P<0.05),与年龄和肿瘤大小无明显相关性(P>0.05)。结论:FAP-1在肺癌组织中有广泛表达,在临床有转移、分期晚和病理分级低的组织中表达增高,可能对于肺癌的发病机制及恶变程度具有重要意义。
- 赵勇刚谢伟冯茂辉段丽吴红艳余佳莉谢辉
- 关键词:肺肿瘤凋亡FAS相关磷酸酯酶-1免疫组织化学
- 特异结合唾液酸化LewisX抗原DNA适配子抑制肝癌细胞株HepG2体外侵袭转移被引量:2
- 2011年
- 目的观察特异结合唾液酸化LewisX(SLeX)抗原DNA适配子抑制HepG2细胞与E一选择素黏附能力及其体外抑制HepG2细胞浸润转移能力。方法采用黏附实验、Transwell体外侵袭实验,检测该适配子对HepG2细胞与E选择素黏附及对HepG2细胞体外侵袭的影响。结果该DNA适配子可有效抑制HepG2细胞与E-选择素黏附,黏附细胞数随适配子浓度的增加而减少(P〈0.01),20nmol浓度的适配子与单克隆抗体CSLEX-1效果相似;Transwell侵袭实验中,5、10、20nmo]适配子组的侵袭细胞数分别为159.00±3.27、142.00±5.50、115.00±5.07,与对照组(178.00±4.64)比较,差异有统计学意义(P〈0.01)。结论特异结合唾液酸化LewisX抗原DNA适配子町以抑制HepG2细胞与E-选择素黏附,阻断Lewis-selectin途径,抑制HepG2细胞体外侵袭转移。
- 彭艳谢伟汪付兵阳芳柳琨方喜平段丽吴红艳冯茂辉
- 肝癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的变化及其意义被引量:5
- 2009年
- 目的探讨应用流式细胞术检测肝癌患者外周血中CIM+CD25+调节性T细胞的变化及意义。方法应用三色免疫荧光流式细胞仪测定37例肝癌患者及30例肝硬化患者外周血T细胞亚群CD4+CD25+/CD4+比值。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测外周血中转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达水平。结果肝癌患者外周血CD4+CD25+/CD4+比值较肝硬化患者显著增高,两者比较差异有统计学意义(P〈0.05);肝癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞水平与肝癌原发肿瘤的大小、TGF-β1呈正相关(P〈0.05)。结论肝癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞增多,对肝癌患者具有免疫抑制作用。
- 冯茂辉谢伟王维娜余佳莉段丽李春光程伏林汪付兵
- 关键词:CD4+CD25+调节性T细胞肝癌流式细胞术免疫抑制
- HSP27在肝癌中的表达及临床意义被引量:4
- 2009年
- 目的:通过观察肝癌组织中热休克蛋白27(HSP27)的表达,探讨HSP27表达与肝癌细胞增殖和转移的关系,并分析其意义。方法:采用免疫组化S-P法检测45例肝癌组织、23例癌旁肝硬化组织、12例正常肝组织标本中HSP27蛋白的表达水平,分析其与肝癌临床病理因素之间关系。结果:HSP27蛋白的阳性表达主要定位在细胞质内,少数也可见胞膜着色。HSP27蛋白在癌旁肝硬化组织及正常肝组织中未见表达,而在恶性肿瘤中的阳性表达率为66.7%,与前两者相比差异有显著性(P<0.05)。HSP27的表达与肝癌的临床转移、细胞的分化程度相关,而与患者年龄和肿瘤的大小无明显相关性。结论:HSP27在肝癌组织中有广泛表达,在临床有转移和病理细胞分化低的组织中表达增高,HSP27与肝癌的发生、恶性程度及转移有关,在肝癌的预后判断中具有重要意义。
- 戴凤姣冯茂辉谢伟余佳莉段丽吴红艳谢辉
- 关键词:肝肿瘤热休克蛋白27免疫组织化学
- 突变型p53蛋白DNA适配子的体外筛选与鉴定被引量:7
- 2011年
- 目的 建立体外获得突变型p53蛋白DNA适配子(aptamers)的方法,为该适配子在肿瘤早期诊断及靶向治疗运用中奠定基础.方法 构建长度为75 nt的初始随机单链DNA库,其两端为固定序列,中间为35个随机序列,库容量为1 × 1017~1×1018,以溴化氰活化的琼脂糖小球为筛选介质,运用指数富集的配体系统进化技术(SELEX技术)经逐轮筛选获得突变型p53蛋白的DNA适配子.将适配子库克隆、测序,采用DNAMAN软件对其结构进行分析,通过生物素-亲和素-辣根过氧化物酶显色系统测定适配子与突变型p53蛋白的亲和力.结果 经逐轮筛选,所得适配子富集库与突变型p53蛋白的亲和力逐步提高,A450值从0.1357增加到了0.6818,其亲和力至第8轮筛选达最高水平后进入平台期.克隆第8轮筛选适配子库,测定23个克隆子的序列,其中20个克隆子的序列与预期相符.DNAMAN5.29软件分析表明,20个克隆子的一级序列同源率为76.51%,无共同保守序列,适配子的二级结构则以茎环、凸环结构为主.结论 经8轮筛选获得的DNA适配子与突变型p53蛋白的体外结合具有高度的特异性及亲和力,其克隆子无共同保守序列,适配子的高亲和性与其形成的茎环、凸环等空间结构密切相关.
- 段丽冯茂辉阳芳谢伟彭艳吴红艳柳琨方喜平汪付兵
- 关键词:适配子P53蛋白SELEX技术