杨雷 作品数:33 被引量:72 H指数:5 供职机构: 温州医学院 更多>> 发文基金: 浙江省自然科学基金 浙江省教育厅科研计划 温州市科技局科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 政治法律 生物学 更多>>
SARS冠状病毒核衣壳蛋白在酿酒酵母中的表达和纯化 被引量:1 2006年 目的:构建重组表达质粒pYES6-N,诱导SARS冠状病毒核衣壳蛋白(nucleocapsidprotein)在酿酒酵母中的表达和纯化。方法:逆转录获得SARS冠状病毒DNA片段,PCR获得核衣壳蛋白基因互相重叠的两部分片段,酶切连接成全长,在E.coliJM109中构建重组表达克隆pYES6-N,在酿酒酵母中诱导表达并纯化。结果:重组克隆pyes6-N经酶切、测序鉴定确定,插入片段大小、方向、碱基匹配与预期一致,获得一个完整的核衣壳蛋白基因,表达产物纯化后,电泳鉴定,相对分子质量近45000。结论:成功克隆SARS冠状病毒核衣壳蛋白基因全长,并在酿酒酵母中诱导表达成功,有助于抗SARS分子疫苗的研究。 杨雷 张洪勤 吴淑珍关键词:严重急性呼吸综合征 SARS病毒 核衣壳蛋白 血浆表达C-erbB-2基因产物P185^(neu)在各类肺癌中的意义和临床应用价值 被引量:1 2001年 目的 :探讨血浆中P185 neu蛋白的表达水平与四型肺癌的发生及其转移的关系。方法 :采用研究者自己建立的酶联免疫杂交法 ,定量检测 6 2例肺癌患者血浆P185 neu的浓度。结果 :肺癌转移组P185 neu的检测水平显著高于对照组 (P <0 .0 1)及未转移组 (P <0 .0 5 ) ,未转移组高于对照组 (P <0 .0 5 )。鳞、腺癌转移组P185 neu显著高于未转移组 (P <0 .0 5 )。未转移组中肺泡癌P185 neu显著高于鳞癌 (P <0 .0 5 )、腺癌 (P <0 .0 1) ,而转移组差异无显著性意义。结论 :首次提出血浆P185 neu蛋白过表达与肺癌转移密切相关 ,与肺癌的发生亦相关。P185 neu可能在肺泡癌发生中起重要作用。血浆P185 neu蛋白有可能作为肿瘤标志物应用于临床。 何秋莎 张洪勤 吴淑珍 杨雷关键词:C-ERBB-2 肺癌 温州地区早期新生儿听力筛查情况分析 被引量:2 2011年 目的:探讨温州地区早期新生儿听力筛查情况。方法:回顾2005年~2010年9月住院出生3~7天活产儿667953例,采用畸变产物耳声发射(DPOAE)或自动听性脑干反应(AABR)进行听力筛查501 503例,未通过者42天复筛,3月和6月各用DPOAE、听性脑干反应(ABR)、声导抗(AIM)、多频稳态听觉诱发反应(ASSR)诊断。结果:初筛未通过47 044例,未通过率9.38%,复筛31 362例,复筛未通过4 329例,未转诊1 641例(失访),占37.90%,转诊2 688例,听力损失327例,轻度听力损失6.50%(26/400),中度听力损失24.25%(97/400),重度听力损失18.75%,(75/400),极重度听力损失50.05%(202/400)。结论:早期新生儿听力筛查随访需要多学科人员共同参与和密切配合,才能提高复筛率、转诊率、随访率、干预率。 徐赛男 周益飞 林锡虎 杨雷关键词:新生儿 听力筛查 随访 干预 肺动脉高压大鼠一氧化氮及过氧化氢依赖的可溶性鸟苷酸环化酶通路的变化 被引量:8 2006年 目的:观察低O2高CO2对血浆一氧化氮(NO)、肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)活性以及cGMP含量的变化,探讨NO-sGC和H2O2-sGC通路于肺动脉高压中的作用。方法:复制低O2高CO21、2、4周组及对照组大鼠模型。测定平均肺动脉压(mPAP)。比色法测定血浆一氧化氮(NO)、肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性,酶动力学分析基础及过氧化氢(H2O2)及硝普钠(SNP)激活的肺组织sGC酶活性,[125I]-放射免疫法检测肺组织cGMP含量。结果:低O2高CO21、2、4周组mPAP均明显高于对照组(均P<0·01);血浆NO、肺组织SOD、CAT活性、基础sGC活性、过氧化氢(H2O2)及硝普钠(SNP)激活的sGC活性和肺组织cGMP含量均显著低于对照组(分别P<0·05,P<0·01)。结论:低O2高CO2抑制NO-sGC和H2O2-sGC通路参与肺动脉高压的形成与发展。 夏晓东 杨雷 徐正衸 戴元荣 吴淑珍 张洪勤关键词:缺氧 高碳酸血症 肺动脉高压 鸟苷酸环化酶 信号转导 聚合酶链反应-单链构象多态性技术快速检测脑脊液中病原菌的初步研究 被引量:6 2005年 目的探讨聚合酶链反应单链构象多态性(PCR-SSCP)快速检测病原菌的可行性,初步评价该法检测脑脊液中病原菌的意义。方法设计通用引物对不同细菌进行PCR-SSCP,同时利用该法直接检测脑脊液中的病原菌,并与细菌培养比较。结果不同细菌的SSCP图谱呈多态性可相互区别;标准菌株和临床菌株的SSCP图谱完全一致;6份化脑的脑脊液,PCR-SSCP检出5份有细菌,而细菌培养只检出1份有细菌;7份病脑两种方法均未检出细菌。结论PCR-SSCP技术可快速、敏感地检测脑脊液中的病原菌。 陶洪群 李向阳 杨雷 杨锦红关键词:脑脊液 细菌 聚合酶链反应 单链构象多态性 红霉素干预对体外培养人鼻息肉上皮细胞凋亡基因表达的影响 目的:观察红霉素对上皮细胞凋亡相关基因bax和bcl-2表达的影响,进一步探讨上皮细胞凋亡在鼻息肉组织形成中的意义。方法:将30例鼻息肉及6例下鼻甲的上皮细胞均分成二组,其中一组加红霉素,进行原代上皮细胞的培养,以免疫组... 徐赛男 冯羽 张瑜 周益飞 杨雷关键词:鼻息肉 上皮细胞 下鼻甲 红霉素 体外培养 文献传递 PCR-SSCP技术检测细菌16SrRNA基因以快速鉴定葡萄球菌 被引量:1 2004年 目的 :利用聚合酶链反应 单链构象多态性 (PCR SSCP)技术检测细菌 16SrRNA基因以快速鉴定葡萄球菌。方法 :采用细菌共有的 16SrRNA基因的保守区引物作为通用引物 ,对葡萄球菌属常见的几种细菌进行PCR扩增 ,产物进行单链构象多态性分析。结果 :采用一对引物的SSCP图谱各细菌之间难以区别 ;采用两对引物的SSCP图谱条带相对迁移率及条带之间的间距差异较大 ,可相互区别 ;金黄色葡萄球菌的标准株和临床株的图谱完全一致。结论 :PCR SSCP技术可方便快捷地检测葡萄球菌。 陶洪群 李向阳 杨雷 杨锦红关键词:葡萄球菌属 聚合酶链反应 单链构象多态性 缺氧高二氧化碳肺动脉高压大鼠一氧化氮信号通路的变化 2003年 徐正衸 夏晓东 管瑜 张洪勤 杨雷关键词:缺氧 高二氧化碳 肺动脉高压 一氧化氮 信号通路 54例髋臼骨折的治疗分析 2000年 杨雷 洪汝康 王振文 黄俊武 陈华关键词:髋臼骨折 骨折固定术 髋关节置换术 红霉素干预对人鼻息肉上皮细胞凋亡的影响 被引量:13 2006年 目的观察红霉素对体外培养的鼻息肉上皮细胞B细胞淋巴瘤-2基因(B cell lymphomas-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)表达的影响,探讨上皮细胞凋亡在鼻息肉组织形成中的意义。方法将30例鼻息肉及15例下鼻甲组织均分成两组,分别对其上皮细胞进行原代培养,其中一组加入红霉素。培养第1、3、5天应用末端脱氧核苷酰转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸原位缺口末端标记法(the TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)检测细胞凋亡情况,并用免疫组化法检测细胞凋亡基因Bax、抑凋亡基因Bcl-2的表达。结果①鼻息肉红霉素组培养第1、3、5天的上皮细胞凋亡指数(用x±s表示,下同)分别为(33.23±6.50)%、(36.14±3.21)%和(52.63±7.86)%,对照组(不加红霉素组)为(31.02±5.60)%、(33.88±4.02)%和(39.64±7.48)%,培养第5天的上皮细胞凋亡指数红霉素组与对照组差异有统计学意义(t=4.480, P<0.05)。②鼻息肉上皮细胞Bcl-2和Bax表达均显著强于下鼻甲组织(P<0.01);培养第5天鼻息肉上皮细胞红霉素组Bax表达显著强于对照组(t=8.734,P<0.05),Bcl-2表达虽强于对照组,但差异无统计学意义;下鼻甲上皮细胞红霉素组与对照组的Bcl-2与Bax阳性表达差异均无统计学意义(P均>0.05);红霉素干预第5天鼻息肉上皮细胞显示明显的凋亡趋势(P<0.05)。结论红霉素能显著提高Bax蛋白的表达,有显著的促鼻息肉上皮细胞凋亡的作用。 徐赛男 冯羽 张瑜 周益飞 杨雷 金永国关键词:红霉素 鼻息肉 上皮细胞 脱噬作用