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杨硕

作品数：10 被引量：30H指数：3
供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 10篇中文期刊文章

领域

  • 9篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 3篇单胞菌
  • 3篇铜绿
  • 3篇铜绿假单胞
  • 3篇铜绿假单胞菌
  • 3篇细胞
  • 3篇小鼠
  • 3篇假单胞菌
  • 3篇病变
  • 2篇对氧磷
  • 2篇对氧磷酶
  • 2篇对氧磷酶1
  • 2篇应激
  • 2篇术后
  • 2篇糖尿
  • 2篇糖尿病
  • 2篇内质网
  • 2篇内质网应激
  • 2篇基因
  • 2篇角膜
  • 1篇毒力

机构

  • 7篇华中科技大学
  • 4篇华中科技大学...

作者

  • 10篇杨硕
  • 6篇刘磊
  • 4篇徐国鹏
  • 4篇胡琼洁
  • 4篇兰芬
  • 4篇李斌
  • 4篇史雪梅
  • 4篇熊维宁
  • 4篇熊盛道
  • 3篇陆小霞
  • 3篇万幸
  • 3篇许淑云
  • 3篇贺恒
  • 2篇栗静
  • 2篇李新宇
  • 2篇王娟
  • 2篇王虎杰
  • 2篇雷蕾
  • 2篇王文丰
  • 1篇胡维琨

传媒

  • 2篇眼科新进展
  • 2篇中华实验眼科...
  • 1篇中华微生物学...
  • 1篇临床眼科杂志
  • 1篇华中科技大学...
  • 1篇中国组织化学...
  • 1篇国际眼科杂志
  • 1篇医学分子生物...

年份

  • 2篇2015
  • 4篇2014
  • 1篇2009
  • 3篇2008
共 10 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
糖尿病小鼠角膜损害的形态观察被引量：1
2014年
目的观察糖尿病小鼠角膜形态损害的特点,为后期进行的糖尿病角膜病变保护因子研究提供研究基础。方法 STZ诱导的糖尿病C57BL/J小鼠,分别于糖尿病成功造模后3个月、6个月时,选取糖尿病小鼠和正常对照组小鼠角膜,石蜡包埋后行HE染色观察形态学变化。结果糖尿病成功造模后3个月、6个月,与正常对照组相比,糖尿病小鼠角膜水肿、基质增厚,角膜溃疡区上皮缺损,溃疡区基质增厚、角膜水肿明显高于非溃疡区。结论糖尿病小鼠造模后3个月即可发生角膜基质病变,6个月时角膜基质改变更加严重。
杨硕王娟万幸贺恒李斌刘磊
关键词：糖尿病角膜病变HE染色
Hrd1转基因小鼠的构建与验证被引量：1
2015年
背景 内质网应激在糖尿病视网膜病变（DR）中发挥着重要作用.羟甲基戊二酰辅酶A还原酶降解蛋白1（Hrd1,又名Syvn1）作为一种内质网相关蛋白降解（ERAD）途径中的核心蛋白,能够减少内质网应激. 目的 构建Hrd1高表达小鼠,为今后研究Hrd1在DR中的作用提供动物模型. 方法 构建Hrd1系统表达重组质粒,酶切、测序后显微注射3 p1到685枚C57BL/6小鼠受精卵中,移植到代孕母鼠,得到Hrd1转基因小鼠.利用鼠尾PCR检测法鉴定F0代小鼠的基因型.得到Hrd1基因检测阳性鼠后,使其分别与野生型鼠杂交,得到F1代Hrd1转基因小鼠,取鼠尾组织,用PCR检测法再次鉴定F1代小鼠基因型. 结果 成功构建了Hrd1重组载体,重组质粒pRP.ExBi-EF1 a-Syvn1-IRES-eGFP的全序列测定结果显示,cDNA序列均正确.接受了Hrd1-pcDNA显微注射的685枚受精卵中成活598枚.将存活的受精卵移植到代孕母鼠后共产子鼠41只,获F0代子鼠8只,生理活动均良好.PCR电泳显示339 bp处阳性条带,该基因型可以传递到子代F1.结论 成功构建了Hrd1转基因小鼠.
杨硕刘磊万幸王文丰王娟贺恒雷蕾李斌
关键词：内质网应激HYDROXYMETHYLACYLCOENZYMEREDUCTASE
AiiA蛋白对铜绿假单胞菌毒力因子生成的影响
2008年
目的构建苏云金杆菌AiiA基因的真核表达载体并转染A549细胞，观测真核细胞表达的AiiA蛋白对铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa,pa）密度感应（quorum sensing）系统酰基高丝氨酸内酯（N-acylhomoserine lactone，AHL）信号分子及毒力因子合成的影响。方法质粒pET-AiiA经Nhe Ⅰ与Xho Ⅰ酶切后，将AiiA基因片段连接入真核表达质粒pEGFP-N2，脂质体转染A549细胞，提取细胞蛋白，Western blot检测AiiA蛋白表达。将蛋白提取物加入凡培养物中，观察Pa AHL信号分子及毒力因子绿脓素、弹性蛋白酶的生成情况。结果AiiA基因片段成功克隆入真核表达质粒pEGFP-N2，转染该质粒后的A549细胞能够表达AiiA蛋白，且该蛋白能够降低凡培养物中AHL信号分子水平，且绿脓素和弹性蛋白酶的生成减少。结论本研究成功构建了真核表达质粒pEGFP-N2-AiiA，转染细胞后表达的AiiA蛋白能够水解AHL信号分子，减少凡毒力因子的生成，故具有抗Pa感染的潜在价值。
杨硕熊盛道熊维宁许淑云兰芬史雪梅徐国鹏陆小霞胡琼洁
关键词：铜绿假单胞菌密度感应毒力因子
ICL植入术治疗高度近视术后早期眼前节形态的变化被引量：13
2014年
目的:我们应用眼前节全景分析仪(Pentacam)测量有晶状体眼后房型人工晶状体(ICL)植入术手术前后前节形态指标,评价有晶状体眼后房型人工晶状体植入术的安全性及稳定性。方法:选取行有晶状体眼后房型人工晶状体植人术治疗的高度近视患者48例90眼,术后随访6mo。Pentacam眼前节全景分析仪测量各时间点的中央前房深度(ACD)、3:00位前房角(ICA)、角膜像差(CA)、角膜曲率(K)和角膜厚度(CCT)等指标。使用SPSS 19.0统计软件,描述术前术后各指标的分布特征,采用配对t检验对各指标进行手术前后的差异性比较。结果:所有观察指标各时间点均呈正态分布。ACD、3:00位ICA较术前降低(P<0.05)。CA中,总像差(CTA)及低阶像差(CLOA)较术前无统计差异(P>0.05),高阶像差(CHOA)则较术前有所增加(P<0.05);K略有减小(P<0.05)。CCT较术前比较均无统计学差异(P>0.05)。对于术后有统计学意义变化的指标,均在术后1mo时即达到稳定状态。结论:应用眼前节全景分析仪(Pentacam)观察有晶状体眼后房型人工晶状体植入术眼前节形态的变化主要有ICA变窄,ACD变小,CHOA增加,K减小,尚在安全范围内,6mo随访中各值均保持稳定,未出现并发症,但远期效果需进一步随访观察。
黎冬平刘磊李新宇栗静王虎杰杨硕
关键词：有晶状体眼后房型人工晶状体高度近视
腺相关病毒2-ND4基因转染细胞线粒体的研究被引量：6
2014年
背景Leber遗传性视神经病变（LHON）是导致视神经退行性变的线粒体遗传性疾病，主要与线粒体11778位点突变导致ND4蛋白合成异常有关，构建含正常ND4蛋白的载体是基因治疗的关键。由于ND4DNA存在于线粒体，而转染的外源基因只能进入细胞核，不能作用于突变的线粒体DNA。探讨将ND4基因成功转染到线粒体是LHON的基因治疗的关键。目的验证人工合成的ND4基因所构建的重组腺相关病毒（AAV）转染细胞后产生的ND4蛋白能否进入线粒体。方法常规体外培养转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系（293细胞），将细胞分为AAV—ND4转染组和单纯AAV转染组，分别将两种转染液加至各组的培养基中，分别于转染后12、24、36和48h用Y03量子点免疫荧光法检测细胞质中ND4的表达，细胞质中绿色荧光为ND4表达阳性。结果培养的293细胞生长良好，达到80％融合。荧光显微镜下显示，AAV-ND4基因转染组293细胞质中可见大量绿色荧光，而单纯AAV转染组仅可见线粒体蛋白红色荧光。结论AAV-ND4基因转染细胞后产生的ND4蛋白能够进入线粒体，为LHON的基因治疗提供了实验依据。
杨硕刘磊裴晗万幸陆朵朵胡维琨李斌
关键词：LEBER遗传性视神经病变基因疗法线粒体DNA转染腺相关病毒
Pentacam测量准分子激光原位角膜磨镶术后前房形态的研究被引量：1
2014年
目的探讨准分子激光原位角膜磨镶术(LASIK)对近视眼前房形态的影响。方法随机选取接受LASIK的近视患者44例(87只眼),分别于术前、术后1个月和术后3个月应用Pentacam眼前节分析系统测量患眼中央前房深度、前房角、前房容积、角膜后表面曲率、角膜后表面曲率半径等指标,并对测量结果进行统计学分析。结果 LASIK术后3个月内,中央前房深度和前房容积较术前显著减小,180°前房角、360°前房角、角膜后表面曲率和角膜后表面曲率半径较术前无显著差异。结论 LASIK术后中央前房深度变浅,前房容积变小,而周边前房形态无显著变化,可能与LASIK手术前后患眼视近时调节引起晶状体前移量不同有关。
栗静刘磊李新宇王虎杰杨硕
关键词：准分子激光原位角膜磨镶术PENTACAM前房
非小细胞肺癌中HMGA2的表达与细胞增殖的关系被引量：4
2008年
目的探讨High mobility group A2protein(HMGA2)的表达对非小细胞肺癌生长、转移的影响,与临床病理参数和细胞增殖的关系。方法应用免疫组化法检测38例非小细胞肺癌组织(23例鳞癌,15例腺癌)及癌旁的正常肺组织标本中HMGA2和Ki-67的表达。结果HMGA2和Ki-67在癌旁的正常肺组织中均不表达,而在肺癌组织中的表达阳性率分别为39.47%、44.74%,二者在肺癌组和癌旁的正常肺组织组之间差异有显著性(P<0.05)。HMGA2的表达在伴淋巴结转移的肺癌组织明显高于不伴有淋巴结转移的肺癌组织(P<0.05),而与其他临床病理参数包括肿瘤的分化程度、肿瘤大小和TNM分期以及细胞增殖指标Ki-67之间没有相关性。结论本研究显示HMGA2在非小细胞肺癌组织中异常表达,可能与肺癌的发生和进展有关。
兰芬熊盛道熊维宁杨硕史雪梅徐国鹏陆晓霞胡琼洁
关键词：非小细胞肺癌细胞增殖免疫组织化学
大鼠对氧磷酶1真核表达载体的构建及在体外的表达被引量：2
2008年
目的构建大鼠对氧磷酶1(paraoxonase1,PON1)真核表达载体,并检测其在体外培养细胞中的表达及功能,为进一步探索运用其进行基因防治肺部感染奠定基础。方法利用RT-PCR扩增大鼠PON1编码区全长序列,克隆入pcDNA3.1(+),鉴定无误后,脂质体转染A549细胞及293细胞,Western印迹检测蛋白表达,并检测其芳香酯酶活性及对铜绿假单胞菌密度感知系统信号分子N-酰基高丝氨酸内酯(N-acylhomoserine lactones,AHLs)的水解功能。结果分别从大鼠肝组织中扩增出1153bp片段,克隆入表达载体后进行酶切鉴定和测序结果正确。转染细胞后能够表达目的蛋白,该蛋白具有芳香酯酶和AHLs内酯酶活性。结论成功构建了含有大鼠PON1真核表达载体,质粒能够在真核细胞中表达,能够有效地水解铜绿假单胞菌密度感知系统信号分子。
杨硕熊盛道熊维宁许淑云史雪梅徐国鹏兰芬陆小霞胡琼洁
关键词：铜绿假单胞菌对氧磷酶
对氧磷酶1对铜绿假单胞菌绿脓素生成及其细胞氧化损伤的影响被引量：2
2009年
目的研究对氧磷酶1(PON1)在铜绿假单胞菌绿脓素生成及绿脓素所致细胞损伤中的作用,探讨其在防治肺部铜绿假单胞菌感染方面的可能作用。方法①以293细胞为表达细胞,分为pcDNA 3.1(+)-PON1转染组、pcD-NA3.1(+)-EGFP转染组及生理盐水组,转染细胞后,将细胞蛋白提取物或生理盐水混入铜绿假单胞菌培养物中,过夜培养后检测培养物中密度感知系统信号分子——酰基高丝氨酸内酯(N-acylhomoserine lactone,AHL)及绿脓素水平。②以A549细胞为效应细胞,分为转染组、未转染组及生理盐水组。转染组采用pcDNA3.1(+)-PON1转染A549细胞后并经G418筛选的阳性克隆细胞,未转染组采用普通A549细胞,培养液中加入绿脓素(30μg/ml),生理盐水组为培养液中加入生理盐水的普通A549细胞,观察细胞内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性。结果①pcDNA3.1(+)-PON1转染组铜绿假单胞菌培养物中AHL信号分子水平和绿脓素水平较生理盐水组和pcDNA3.1(+)-EGFP转染组均明显降低;②绿脓素作用后,未转染组细胞内氧化应激水平较生理盐水组明显升高,而转染组较未转染组有所下降。结论PON1不仅能够减少铜绿假单胞菌绿脓素的生成,而且可以减轻绿脓素所致的细胞氧化损伤,可能具有防治铜绿假单胞菌感染的潜在价值。
杨硕熊盛道熊维宁许淑云兰芬史雪梅徐国鹏陆小霞胡琼洁
关键词：铜绿假单胞菌对氧磷酶
HRD1在糖尿病小鼠视网膜的表达变化被引量：1
2015年
目的观察羟甲基戊二酰辅酶A还原酶降解蛋白1(Hmg Co A reductase degradation 1,HRD1)在糖尿病小鼠视网膜不同时期的表达变化。方法 STZ诱导的糖尿病C57BL/J小鼠,分别于糖尿病成功造模后1个月、3个月、6个月,选取糖尿病小鼠视网膜组织,利用免疫荧光、Western blot、RT-PCR技术检测HRD1在糖尿病不同时期的表达变化。结果免疫荧光观察到HRD1绿色荧光强度在1个月、3个月、6个月糖尿病小鼠视网膜随糖尿病进程逐渐减弱。Western blot、RT-PCR检测可见在1个月、3个月、6个月糖尿病小鼠视网膜组织HRD1基因水平和蛋白水平表达较对照组均明显减少(m RNA:P1=0.040 5;P2=0.006 2;P3=0.004 1;蛋白:P1=0.010 9;P2=0.001 3;P3=0.000 3)。结论HRD1可能在糖尿病视网膜病变发生发展过程中起到一定作用。
杨硕贺恒马思琪朱颖王文丰雷蕾李斌刘磊
关键词：糖尿病视网膜病变内质网应激
全选 清除 导出
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