李荣秀 作品数:167 被引量:158 H指数:7 供职机构: 上海交通大学 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 化学工程 农业科学 更多>>
葡聚糖-精胺作为CpG ODN输送载体效果的初步探究 被引量:1 2016年 Cp G ODN可增强疫苗特异性免疫反应,但是它在动物体内易降解和吞噬率低的特性降低其作为免疫佐剂的效果。本研究尝试用葡聚糖-精胺(DSP)包裹Cp G ODN,保护其免受核酸酶降解,提高细胞吞噬率。所合成DSP包裹Cp G ODN形成DSP-Cp G ODN复合物,体外刺激脾脏淋巴细胞,ELISA法测量细胞培养上清中白介素12(IL-12)含量来分析复合物是否可更有效地激活免疫细胞。结果显示所合成DSP可完全包裹Cp G ODN形成有效粒径为500 nm的颗粒并降低核酸酶对Cp G ODN降解速率。在最佳包裹条件下DSP-Cp G ODN复合物所刺激的脾脏淋巴细胞IL-12分泌水平相比单独Cp G ODN组有15.5倍增加(p<0.001)。本研究表明DSP可望作为Cp G ODN输送载体,增强佐剂效果。 陈磊 仲从浩 蔺智兵 程超 张丽 李荣秀关键词:CPG ODN IL-12 乳清蛋白的规模纯化方法 一种生物工程技术领域的乳清蛋白的规模纯化方法,通过以人α-乳清白蛋白重组牛乳为原料,经预处理纯化蛋白后,用阴离子交换层析分离得到重组人α-乳清白蛋白、牛α-乳清白蛋白和牛β-乳球蛋白。本发明能够可快速、简便、低成本、大批... 李荣秀 王一 翟东改 李雪 霍晨曦 颜远伟文献传递 一种靶向MUC1及PD-1的双靶点蛋白疫苗设计及其体液免疫学分析 被引量:2 2016年 机体内存在肿瘤免疫抑制是MUC1等肿瘤相关性抗原疫苗临床效果不佳的重要原因,我们认为减少免疫抑制将能够增强免疫应答。因此,我们以霍乱毒素B亚基为载体,设计了一种同时靶向小鼠MUC1(Muc1)VNTR区和小鼠程序性死亡受体(m PD-1)的融合蛋白疫苗并研究了其体液免疫学效果。通过插入突变的方法,将Muc1 VNTR序列插入CTB序列以替换其Q56~D59位氨基酸得到CTB-Muc1融合基因,进一步将m PD-1融合至CTB-Muc1的羧基端得到CTB-Muc1-m PD1融合基因,并经TG1大肠杆菌表达,亲和层析得到CTB-Muc1-m PD1的融合蛋白。融合蛋白辅以铝佐剂和Cp G ODN免疫BALB/C小鼠,并收集抗血清,以Elisa法检测抗体产生情况。结果表明:CTB-Muc1-m PD1重组蛋白能够打破小鼠自身免疫耐受,同时产生针对于Muc1和m PD-1的特异性抗体,此外,CTB-Muc1融合m PD-1后能够显著增强机体针对于Muc1的特异性免疫应答(p〈0.01)。这表明靶向抑制免疫环境抑制因子能够显著增强肿瘤相关性抗原的免疫应答。 邱凌翀 卢悟广 蔺智兵 蔡花漫 李荣秀关键词:MUC1 PD-1 疫苗 体液免疫 微型原甲藻的检测探针 一种微型原甲藻的检测探针,属于核酸检测领域。用于对该藻进行S1酶保护分析和夹心杂交检测,具体包括三条相互关联的寡核苷酸探针:S1酶保护分析探针,在进行生物信息学比对分析时,仅与微型原甲藻核糖体大亚基430~520区域核苷... 李荣秀 于志刚 蔡青松 米铁柱 甄毓文献传递 中华眼镜蛇蛇毒磷脂酶A_2的提纯 2006年 目的:探索从中华眼镜蛇蛇毒中快速分离提纯磷脂酶A2(PLA2)的方法方法:应用ARG-CY仿生配基,用亲和层析一步法从中华眼镜蛇蛇毒粗毒中纯化PLA2,用SDS-PAGE进行纯度鉴定及相对分子质量测定,并测定其溶血活性。结果:纯化后获得的PLA2电泳图谱呈单一区带,相对分子质量为14000,活性为182μmol/(min·mg)。产物具有溶血活性。结论:仿生亲和层析法提纯LPA2操作简单,纯度高,为一高效实用的方法。 张傅山 李荣秀关键词:磷脂酶A2 重组人白细胞介素-17的复性研究 被引量:2 2006年 目的探讨重组人白细胞介素-17(rhIL-17)的复性条件。方法表达重组人白细胞介素-17的大肠杆菌经破碎、包涵体洗涤、裂解提取、复性、Sephacryl S-100层析柱纯化等技术方法,对复性相关参数进行优化。结果经纯化得到rhIL-17,蛋白纯度为97.2%,探索到了rhIL-17蛋白复性的最适条件。结论通过复性与纯化获得了高纯度有活性的rhIL-17。 张傅山 刘钟滨 李荣秀关键词:复性 纯化 低活性hTNF-α突变蛋白的免疫原性分析 2018年 肿瘤坏死因子-alpha(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)在多种疾病如类风湿关节炎等自身免疫病发病机理上起着至关重要的作用。TNF-α生物抑制剂,在临床上具有很好的疗效。由于TNF-α是一种高活性的炎症因子,直接将其作为疫苗,会对机体产生很大的毒性副作用。故需要对天然的TNF-α进行点突变研究,找到生物活性很低的但同时保持良好的免疫原性的突变分子。本研究对人TNF-α活性部位4个关键氨基酸残基(K11,Y87,Y119,A145)进行了点突变和突变蛋白的免疫原性研究。发现Y119N、Y119G、Y87H、Y87H/A145R、K11Y、K11F这6个突变蛋白的生物活性较天然TNF-α下降90%以上,而免疫原性不受点突变的影响。 周福强 张丽 邓立 李荣秀关键词:TNF-Α 点突变 免疫原性 预处理沙柳酶解液脱毒及其丁醇发酵 被引量:1 2015年 为了提高沙柳原料的丁醇发酵效果,考察沙柳原料经过蒸爆、超微粉碎+稀酸和超微粉碎+稀碱预处理后补料酶解的效果,优化了沙柳酶解液活性炭脱毒工艺参数,并对经过脱毒处理的酶解液进行了丁醇发酵研究,结果表明:预处理沙柳原料酶解底物质量浓度为200 g/m L时,3种预处理方法中蒸爆处理法水解效果最好,每克底物的滤纸酶酶加量15 U,酶解96 h后,酶解液总糖质量浓度达到57 g/L。活性炭脱毒处理的最优条件:p H 4.8,碳加量4%(质量分数)、温度70℃、1 h,该条件下的沙柳水解液脱色率达到97.4%、糖损失率3.1%。3种预处理沙柳原料的酶解液经活性炭脱毒后都可以被丁醇梭菌正常利用发酵产丁醇,发酵液总溶剂(ABE)质量浓度约为14 g/L。 林增祥 李荣秀 刘莉 沈兆兵 史吉平关键词:沙柳 预处理 丁醇 卵黄免疫球蛋白的仿生亲和纯化方法 一种卵黄免疫球蛋白的仿生亲和纯化方法,属于生物技术领域。本发明包括以下步骤:(1)基础层析介质与三氯三氮嗪反应活化后,分别与对氨基苯甲酸、以及酪氨酸和精氨酸反应,合成仿生亲和分离材料;(2)用上述合成的亲和层析介质制备成... 李荣秀 刘浩然文献传递 利血平分子印迹聚合物的制备方法 一种利血平分子印迹聚合物的制备方法,属于生物工程技术领域。具体为:首先将交联剂、功能单体、模板分子和引发剂溶解在致孔剂中,得到混合溶剂;将混合溶剂超声脱气;混合均匀后,通入氮气,氮气状态或抽真空状态下密封;进行聚合反应,... 张大兵 武爱波 史西志 李荣秀 杨立桃文献传递