曾庆银
- 作品数:17 被引量:82H指数:5
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- 相关领域:农业科学生物学医药卫生理学更多>>
- MMP-2PEX结构域的最佳表达条件
- 2001年
- 为研究 MMP-2 PEX结构域在大肠杆菌 BL 2 1 ( DE3 )中的最佳表达条件 ,直接从构建好的表达载体 PET-MMP2 PEX中高效表达 MMP-2 PEX结构域蛋白 .经 SDS-PAGE与软件分析 ,确定其最佳表达时间为 2 h,菌液密度值为 0 .6时 ,所表达的蛋白含量最高 ,而
- 曾庆银高波傅学奇陆海刘列
- 关键词:基质金属蛋白酶-2SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳基因表达
- P185^(c-erBb-2)胞外区结构域在大肠杆菌BL21中的表达分析
- 2001年
- 以 PET-HT为表达载体 ,探讨在大肠杆菌 BL2 1中高效表达 P1 85c- er Bb- 2胞外区结构域蛋白的最佳条件 .经 SDS-PAGE与软件分析 ,确定其最佳表达时间为 3 h,当菌液密度为 0 .7时 ,所表达的蛋白含量最高 ,而 IPTG在一定浓度范围内对表达含量不产生影响 .
- 王颖曾庆银何晓红孟庆繁高波傅学奇
- 关键词:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳大肠杆菌BL21跨膜糖蛋白
- 杨树ASE蛋白的生化功能研究
- 2016年
- [目的]谷氨酰胺磷酸核糖焦磷酸转酰胺酶(ASE)在植物嘌呤合成中发挥着关键作用,本研究的目的是详细揭示杨树ASE蛋白的生化功能特性。[方法]通过半定量RT-PCR、蛋白质亚细胞定位以及测定纯化蛋白的催化活性等方法来研究其在体外的生化功能,进一步通过互补拟南芥缺失突变体(atase2)来研究杨树ASE基因的体内生物学功能。[结果]从杨树基因组中鉴别出2个ASE基因,序列分析发现它们之间有很高的蛋白质序列相似性。半定量RT-PCR分析发现两个杨树ASE基因在根、茎、叶和芽中均表达。蛋白质亚细胞定位分析发现杨树ASE蛋白均定位在叶绿体中,而且两个杨树ASE蛋白均能完全互补拟南芥atase2突变体的表型。酶学性质分析表明,杨树两个ASE蛋白均能催化5-磷酸核糖-α-焦磷酸生成5-磷酸核糖-β-胺。[结论]本研究预示着两个杨树ASE蛋白在嘌呤合成中均发挥着重要作用。
- 钱婷婷杨志灵曾庆银
- 关键词:突变体
- 丝瓜ACC合成酶的原核表达、分离纯化及性质鉴定被引量:7
- 2004年
- 将构建成功的丝瓜ACC合成酶cDNA的重组质粒,转化为大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后得到特异性高效表达,表达蛋白以包涵体形式存在.包涵体经洗涤和Zn2+螯合柱层析,得到纯化蛋白.SDS PAGE显示纯化蛋白分子量为55000的单一蛋白带.经活性分析,该酶最适pH值为8.5,米氏常数(Km)为44.2μmol/L.
- 高波曾庆银陆海付学奇
- 关键词:白带原核表达活性分析ACC合成酶丝瓜
- 大肠杆菌BL21(DE3)中表达重组蛋白的研究被引量:41
- 2001年
- 为了研究在大肠杆菌BL2 1(DE3)中重组蛋白的表达特点 ,探讨重组蛋白在大肠杆菌中表达时可溶性蛋白与包涵体出现的特点 ,从表达载体中表达了植物ACC合成酶 .经SDS PAGE电泳与双波长扫描分析 ,确定目的蛋白随表达时间、菌液密度的增加而增加 .但是其最佳表达时间为 2 5h ,菌液密度OD6 0 0 为 0 6 ,IPTG的最佳浓度为 0 6mmol L ,此时目的蛋白含量占全菌蛋白含量之比最高 .植物ACC合成酶在大肠杆菌中表达时以包涵体的形式存在 。
- 陆海吴薇曾庆银李义蒋湘宁王沙生
- 关键词:ACC合成酶SDS-PAGE包涵体重组蛋白
- p185^(HER-2)蛋白胞外区的表达及其结合肽的筛选
- 2004年
- 目的 :构建p185 HER -2 蛋白胞外区的原核表达载体 ,实现p185 HER -2 蛋白胞外区的表达。以纯化p185 HER -2 蛋白胞外区为靶 ,从噬菌体肽库中筛选其结合肽 ,用于肿瘤导向治疗。方法 :从含有HER 2全长cDNA的质粒psv2 -cerbB -2 中克隆了人p185 HER -2 蛋白胞外区cDNA ,将此cDNA克隆到pET 30a +表达载体中 ,构建p185蛋白胞外区的表达载体。表达的p185 HER -2 蛋白胞外区通过Zn2 + 螯合层析柱进行纯化。以纯化的p185 HER -2 蛋白胞外区为靶 ,通过淘洗方法进行噬菌体肽库筛选。结果与结论 :构建了p185 HER -2 蛋白胞外区的原核表达载体 ,实现了p185 HER -2蛋白胞外区的高表达。通过Zn2 + 螯合层析柱实现一步纯化 ,p185 HER -2 蛋白胞外区的纯度达到 95 %。从噬菌体随机环七肽库中找到了一组具有核心序列p185 HER -2 蛋白胞外区结合肽。这些p185 HER -2 蛋白胞外区结合肽有可能成为肿瘤治疗的新的候选分子。
- 王清明范国才陈吉中曾庆银陈惠鹏
- 关键词:包涵体噬菌体肽库结合肽
- 调控植物木质素含量的一种方法
- 本发明公开了一种调控植物木质素含量的方法。本发明所提供的调控植物木质素含量的方法,调控植物木质素含量的一种方法,是将含有毛白杨4-香豆酸辅酶A连接酶1启动子-4-香豆酸辅酶A连接酶1融合基因的表达载体转化植物,得到木质素...
- 蒋湘宁陆海赵艳玲陈雪梅曾庆银杨雪萍
- 文献传递
- 调控植物木质素含量的一种方法
- 本发明公开了调控植物木质素含量的一种方法。本发明所提供的调控植物木质素含量的方法,是将含有毛白杨4CL1启动子-4CL1融合基因的表达载体转化植物,得到木质素含量升高的植物;将含有毛白杨4CL1启动子-反义4CL1融合基...
- 蒋湘宁陆海赵艳玲陈雪梅曾庆银杨雪萍
- 文献传递
- p185<'HER-2>受体基因的克隆表达、肽库筛选及计算机理论模拟
- 为了筛选到p185<'HER-2>受体的小分子抑制剂,该文克隆了p185<'HER-2>受体的胞外区结构域基因,并在大肠杆菌高效表达了p185<'HER-2>受体的胞外区结构域,表达蛋白以包涵体形式存在,包涵体经洗涤、亲...
- 曾庆银
- 关键词:细胞抑制生物治疗肽库
- 文献传递
- 银杏木质部特异定位表达基因启动子在转基因烟草中的功能研究被引量:14
- 2002年
- 为了研究银杏GRP 1 8启动子在木本植物中的调控制特性 ,用从银杏细胞壁形成及纤维素生物合成密切相关的 ,并定位于形成层木质部维管组织细胞表达的富甘氨酸蛋白质基因 (GRP 1.8)的启动子与GUS报告基因构建的表达载体转化烟草 ,经过Southernblotting鉴定 ,得到一批转化再生植株 .经GUS组织化学检测 ,发现转基因烟草的茎木质部呈现GUS染色阳性 ,初步证明银杏GRP 1 8基因启动子确有韧皮部表达特性 。
- 曾庆银陆海傅学奇王沙生蒋湘宁
- 关键词:银杏GUS报告基因转基因烟草木质部