曹琛福
- 作品数:138 被引量:428H指数:13
- 供职机构:深圳出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家质检总局科技计划项目深圳出入境检验检疫局科研项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 一对鹅源性成分PCR检测用引物
- 本发明涉及动物物种和动物源性成分鉴定技术领域,具体涉及一种用于检测鹅源性成分的检测方法,尤其涉及一对用于检测鹅细胞线粒体核苷酸序列的引物。本发明旨在鉴定饲料、食品等产品中是否含有鹅源性成分。通过设计特异性扩增引物,利用P...
- 宗卉汪燕玲曹琛福陶虹刘建利吕建强花群义卢体康秦智锋
- 文献传递
- 动物源性食品分子鉴伪关键技术研究及标准平台构建与应用
- 陈颖吴亚君曹际娟李莉曹琛福高宏伟
- 该成果属于食品科学技术领域。主要创新点包括:采用生物体内稳定的遗传物质DNA特征序列鉴定物种,解决了常规方法的局限性和适用范围;同时针对掺假掺杂等犯罪行为的不确定性和复杂性,有机结合基因条码和蛋白质指纹技术,通过单次实验...
- 关键词:
- 关键词:动物源性食品食品安全
- 驴或驴源性成分实时荧光PCR检测方法及检测用引物和探针
- 驴或驴源性成分实时荧光PCR检测方法及检测用引物和探针。技术领域:本发明涉及动物物种和动物源性成分鉴定技术领域,具体涉及一种驴或驴源性成分的检测方法;尤其涉及一种驴或驴源性成分的实时荧光PCR检测方法。本发明旨在鉴别如阿...
- 曹琛福宗卉张彩虹陶虹花群义秦智锋吕建强杨俊兴阮周曦刘建利
- 液相芯片鉴别检测7种出血性大肠埃希菌血清型被引量:2
- 2015年
- 为了建立一种同时检测O157、O26、O45、O103、O111、O121和O145等7种血清型的出血性大肠埃希菌的高通量检测方法,通过筛选比对大肠埃希菌O157血清型的fbE基因,O26、O103和O111血清型的WZX基因,O45、O121和O145血清型的WZY基因,设计了针对各个血清型的特异性引物和探针。通过在所有的特异性引物5′端加入超级引物的策略,达到了通过一次PCR反应,同时多重扩增7个血清型的7个目标片段的效果。将加尾多重扩增与液相芯片高通量检测相结合,建立了同时检测7种血清型的出血性大肠埃希菌的液相芯片检测方法,并对方法检测体系及反应条件进行了优化。所建立的7种出血性大肠埃希菌液相芯片检测方法灵敏,其灵敏度与荧光PCR的灵敏度相差100倍。所建立的方法特异,单个血清型的探针与相应的PCR扩增的阳性产物之间均有特异性的杂交,LQRR值介于17~63之间。7种血清型的混合探针与各个血清型菌株的PCR与扩增的阳性产物之间均有特异性的杂交,LQRR值介于11~23之间,与其他血清型出血性大肠埃希菌和非出血性大肠埃希菌均无交叉反应。试验结果表明,所建立的液相芯片检测大肠埃希菌O157、O26、O45、O103、O111、O121和O145等7个血清型的检测方法具有快速、特异性强、灵敏度高等特点,可用于主要出血性大肠埃希菌的快速鉴别检测。
- 陶虹陈兵孙洁唐金明林庆燕曹琛福吕建强杨俊兴花群义秦智锋
- 关键词:液相芯片
- 家蚕微孢子虫经不同冻存条件处理后对家蚕胚胎细胞的侵染性变化被引量:2
- 2014年
- 为了解家蚕微孢子虫保存方法对其侵染性的影响及大量获得细胞感染实验材料,将采用不同冻存液及冻存法处理的家蚕微孢子虫分别接种于家蚕胚胎细胞(Bm E),调查家蚕微孢子虫对细胞的感染率及感染细胞的传代能力。与液氮直接冻存法处理和高温高压灭菌法处理的微孢子虫相比较,用液氮梯度冻存法处理的微孢子虫的粘附率和感染率均显著或极显著提高。采用液氮梯度冻存法以水作冻存液处理的微孢子虫对宿主细胞的感染率为64%,感染细胞能进行连续传代培养;而以含10%二甲基亚砜(DMSO)的胎牛血清作冻存液处理的微孢子虫虽然对宿主细胞的感染率达到80%,但感染细胞在培养7 d后大量破裂死亡。因此,选用以水作冻存液经液氮梯度冻存法处理的家蚕微孢子虫有利于感染Bm E细胞并在细胞内增殖,从而获得大量的细胞感染实验材料。
- 马强党晓群王营陈洁刘方燕赵丽芳曹琛福吕建强潘国庆周泽扬
- 关键词:家蚕微孢子虫侵染性
- 小反刍兽疫病毒H蛋白的原核表达和免疫学活性鉴定被引量:2
- 2014年
- 研究小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus,PPRV)H蛋白生物学活性,为建立PPRV抗体检测方法提供材料。根据GenBank已发表的PPRV H蛋白质序列,设计上、下游引物,以PPRV核酸为模板进行PCR扩增,扩增产物克隆至pET52/LIC载体中,构建了pET52/LIC-PPRV H表达载体。将pET52/LIC-PPRV H重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)进行融合表达,经SDS-PAGE电泳分析,可见PPRV H蛋白成功得到了表达,融合蛋白的分子质量约为75ku,Western blot分析表明所表达的重组蛋白可与PPRV阳性血清发生特异性反应,说明表达的PPRV H蛋白可以作为建立PPRV抗体检测的蛋白。
- 陶虹孙洁李健波刘建利阮周曦张彩虹曹琛福吕建强花群义杨俊兴
- 关键词:小反刍兽疫病毒原核表达
- 隐孢子虫和贾第鞭毛虫双重实时荧光PCR检测方法的建立被引量:3
- 2014年
- 本研究根据隐孢子虫和贾第鞭毛虫相对保守序列,设计2对引物及其相应的Taqman探针,通过对引物和探针浓度、Taq酶以及反应条件等优化筛选后,建立了能同时检测隐孢子虫和贾第鞭毛虫的双重实时荧光PCR方法。所建立的隐孢子虫和贾第鞭毛虫双重荧光PCR检测方法的灵敏度为10-9,相当于46.1copies/!L,重复性好,特异性佳。本研究建立的双重荧光PCR技术,可以快速、准确地于一管一次反应检测隐孢子虫和贾第鞭毛虫。
- 廖立珊肖娜孙洁阮周曦林庆燕吕建强曹琛福曾少灵张彩虹陶虹刘建利唐金明杨俊兴花群义秦智锋
- 关键词:隐孢子虫贾第鞭毛虫
- 禽流感病毒H7亚型RT-exoRPA检测方法的建立被引量:3
- 2018年
- 为了建立一种简便、快速的禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)H7亚型的检测方法,根据GenBank中禽流感病毒H7亚型的HA保守序列,并按照RPA引物探针的要求,设计多对引物及探针,通过条件的优化,建立禽流感病毒H7亚型RT-exoRPA检测方法,并与实时荧光定量PCR方法进行比较。特异性试验结果显示,该方法特异性强,只有禽流感病毒H7亚型出现特异性曲线;灵敏性试验结果显示,该方法能检测到禽流感病毒H7亚型最低浓度为0.24×10-3μg/mL,与实时荧光定量PCR方法相比,灵敏性稍差,但该方法的检测快速,仅需要20min。表明所建立的禽流感病毒H7亚型RT-exoRPA检测方法简单、快速,适合用于禽流感病毒H7亚型的现场检测。
- 王潇王潇曹琛福黄超华林彦星花群义
- 进境冻畜禽产品中产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药性的监测与分析被引量:2
- 2013年
- 为监测进境冻畜禽产品中受产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)大肠埃希茵污染的情况,采用ESBL显色平板初筛结合Vitek2compact确证及药敏测试的方法,经过与美国临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐方法(M100-S22)进行比对,并且通过对249份进境冻畜禽产品进行了检测。结果表明,采用的方法与CLSI推荐方法相比,具有快速、准确、操作简便和特异性好等优点,有良好的推广价值。同时,经检测获得产ESBL大肠埃希茵18株,占样品总量的7.23%。所获菌株对氨苄西林、头孢唑啉和头孢曲松高度耐药,多重耐药率为16.67%~38.89%,为检验检疫部门评估进境冻畜产品中受产ESBL大肠埃希菌污染的情况提供了科学数据。
- 阮周曦唐金明徐鹏吕建强陶虹曾少灵卢体康秦智锋曹琛福花群义
- 关键词:超广谱Β-内酰胺酶大肠埃希菌
- 非洲猪瘟病毒基因II型毒株单克隆抗体及制备方法和应用
- 本申请公开了一种非洲猪瘟病毒基因II型毒株单克隆抗体及其制备方法和应用。本申请的制备方法,包括用纯化p54免疫蛋白对小鼠免疫,取免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合制备杂交瘤细胞,用三种筛选抗原进行筛选,获得可稳定分泌单克隆抗...
- 曹琛福花群义吕建强张彩虹刘建利宗卉唐金明杨俊兴阮周曦陶虹