徐进
- 作品数:9 被引量:52H指数:4
- 供职机构:云南大学生命科学学院云南省生物资源开发与利用重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划云南省应用基础研究基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 捕食线虫真菌捕食器相关基因标记Ⅰ.——REMI转化捕食线虫真菌及转化子特征分析被引量:5
- 2004年
- 采用REMI技术转化了少孢节丛孢、指状节丛孢和贵州节丛孢3种捕食线虫真菌,并对转化条件、转化子的形态特征、胞外蛋白酶的分泌差异、抗性稳定性进行了测定,分析了转化子对线虫的致病性和对土壤抑菌作用的忍耐性。
- 莫明和黄英徐进张克勤
- 关键词:捕食线虫真菌基因标记转化子线虫
- REMI及其相关技术在丝状真菌基因克隆中的应用被引量:13
- 2004年
- 综述了一种用于转化丝状真菌、标记目的基因的新技术———限制酶介导的整合 (REMI)。着重介绍REMI及其原理、优缺点、质粒的构建特点。以应用实例为例阐述了REMI及其相关技术的操作步骤。
- 莫明和徐进张克勤
- 关键词:丝状真菌基因克隆
- 捕食线虫真菌的潮霉素抗性基因标记及其在土壤抑菌研究中的应用被引量:3
- 2005年
- 用潮霉素磷酸转移酶基因(hygB)转化了捕食线虫真菌蠕虫节丛孢Arthrobotrysvermicola;转化率为1~3个转化子μg-1DNA;转化子的潮霉素抗性稳定性为87 5%。选取了一个潮霉素抗性稳定、生长和形态与原始菌株相似的转化子Tav36,研究了其在土壤中的生长及其对线虫的捕食,证明了此转化子能够在自然土壤中正常地生长和捕食线虫,但其生长速率和对线虫的致病能力受到了土壤抑菌作用的抑制。
- 徐进莫明和张克勤
- 关键词:捕食线虫真菌
- 绿色荧光蛋白(GFP)在真菌研究中的应用被引量:18
- 2004年
- 绿色荧光蛋白 (greenfluorescentprotein ,GFP)来源于海洋生物水母 (Aequoreavictoria) ,由于其具有荧光性质稳定、直观、操作方便和不需添加外源底物就可以在活细胞中直接检测等无可比拟的优点 ,以GFP为报告基因已经被广泛地应用于真菌的分子生物学研究中。GFP基因通过随机插入真菌基因组的方法 ,已经被成功地用来研究真菌的生态、生防菌对病原菌的侵染模式及病原菌与其寄主的关系等 ;GFP基因通过与目标基因融合的方法 ,则被广泛地用于真菌的基因转录规则、蛋白质及细胞器定位。
- 徐进莫明和张克勤
- 关键词:真菌报告基因
- 三种捕食线虫真菌的REMI转化被引量:2
- 2005年
- 采用REMI(restriction enzyme-mediated integration)技术,成功地用潮霉素磷酸转移酶基因(hygB)转化了捕食线虫真菌白色单顶孢(Monacrosporium candidum)、球状单顶孢(M. sphaeroides)和蠕虫节丛孢(Arthrobotrys vermicola)。这三种菌的转化率分别为10~18、25~35和0.2~3个转化子/μg DNA;它们的转化子的潮霉素抗性稳定性分别为12.5%、82.5%和87.5%。三种菌的野生型的生长在含有150μg/ml潮霉素的PDA培养基上完全被抑制,而它们的转化子一般都能在含有700μg/ml潮霉素的PDA培养基上正常生长。从每种菌中随机选择了40个转化子,在生长速率、菌丝形态、捕器形态及对线虫的捕食能力方面与野生型进行了比较,没有发现有明显差异。
- 徐进莫明和张克勤
- 关键词:捕食线虫真菌
- 细菌在线虫生防中应用的研究进展被引量:11
- 2006年
- 在具有杀线虫能力细菌的特征、作用方式及其在线虫生防中的潜在应用等方面,结合作者的研究工作,对国内、外的一些研究进展进行了综述,并提出了研究展望。
- 牛秋红黄晓玮徐进杨金奎田宝玉张林张克勤
- 关键词:细菌线虫侵染机制
- 捕食线虫真菌捕食器相关基因标记II.捕食器基因不表达转化子的形态特征及核酸杂交分析被引量:2
- 2004年
- 本文从利用质粒pBChygro转化少孢节丛孢YMF1.00544的2135个转化子中筛选到一株捕食器基因不表达的转化子YMF1.00110。该转化子的形态学特征与野生型菌株有明显区别,对该转化子的核酸杂交结果表明质粒DNA是以单拷贝的方式整合到真菌染色体上。此外,对部分转化子的杂交整合模式和标记率进行了杂交分析。
- 莫明和黄英徐进张克勤
- 关键词:转化子捕食质粒DNA核酸杂交真菌标记率
- 影响捕食线虫真菌原生质体形成的因素分析被引量:1
- 2005年
- 比较了不同的细胞壁降解酶、渗透压稳定剂、培养基、菌龄和酶解条件等因素对8种捕食线虫真菌原生质体形成的影响.在众多的影响因素中,培养基和配制酶液的缓冲溶液是提高原生质体得率的最有潜力的两个因素.采用优化的原生质体制备条件,其中6种捕食线虫真菌均获得了较高的原生质体得率(2.5×106~1.2×107个/mL).
- 徐进莫明和张克勤
- 关键词:捕食线虫真菌原生质体细胞壁降解酶
- 2种捕食线虫真菌大量原生质体的快速制备与再生技术被引量:1
- 2005年
- 比较了培养基、菌龄、溶壁酶、配制酶液的缓冲溶液和酶解条件等重要因素对2种捕食线虫真菌原生质体形成的影响.采用优化后的制备条件,用较低质量浓度的酶液(5mg/mL纤维素酶,5mg/mL蜗牛酶),在短时间内(5h)蠕虫节丛孢(Arthrobotrysvermicola)原生质体得率可达0.5×107~1.0×107mL-1,球状单顶孢(Monacrosporiumsphaeroides)原生质体得率为0.8×107~1.5×107mL-1.原生质体的再生除了受到原生质体制备方法的影响,还与再生培养基的营养成分、渗透压稳定剂及其浓度有很大关系.另外还对原生质体的释放和再生进行了详细的观察和描述.
- 徐进莫明和张克勤
- 关键词:食线虫真菌原生质体制备捕食酶液菌龄