张洪长
- 作品数：15 被引量：109H指数：7
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- 青藤碱对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞MyD88、TRAF-6表达的影响被引量：24
- 2015年
- 目的:探讨青藤碱(Sinomenine,SIN)对TLR信号转导通路及髓样分化因子88(Myeloid differentiation factor88,My D88)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(Tumor necrosis factor receptor associated factor-6,TRAF-6)表达的影响,阐明SIN抑制类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)成纤维样滑膜细胞(Fibroblast-like synoviocytes,FLS)增生导致RA软骨和软骨下骨破坏造成关节畸形的作用机制。方法:体外培养RA-FLS细胞,分为对照组与(0.125、0.25、0.5、1 mmol/L)SIN组,通过检测各组细胞内碱性磷酸酶(ALP)活性,确定体外用药最佳药物浓度;CCK-8法检测0.5 mmol/L SIN组的细胞增殖率;荧光定量PCR法测定对照组与0.5 mmol/L SIN组My D88和TRAF-6基因表达;Western blot法检测对照组与0.5 mmol/L SIN组My D88和TRAF-6蛋白表达。结果:SIN各组ALP活性均低于对照组,其中以0.5 mmol/L SIN组的ALP活性为最低(P<0.01)。CCK-8法检测,0.5 mmol/L SIN组RA-FLS细胞增殖率明显低于对照组(P<0.01),SIN诱导第4天细胞增殖率最高,进入平台期,之后细胞的增殖率开始下降。荧光定量PCR和Western blot法检测,0.5 mmol/L SIN组的My D88和TRAF-6基因及蛋白表达明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:SIN通过对TLR信号转导通路的影响有效地抑制RA-FLS细胞内My D88和TRAF-6的表达,这可能是其治疗RA防止软骨和软骨下骨破坏造成关节畸形发生的重要分子机制之一。
- 张洪长刘明昕张莹王恩鹏陈港姜鸿远
- 关键词：青藤碱类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞髓样分化因子88肿瘤坏死因子受体相关因子6
- 仿生化提取人参皂苷类成分的初步研究被引量：14
- 2012年
- 目的:对人参中的皂苷类成分进行仿生化提取。方法:以人参超微粉为原料,分别以仿生溶媒和水作为提取溶剂提取人参皂苷类成分。采用紫外-可见分光光度法测定人参总皂苷的含量;高效液相色谱法测定人参皂苷Rg1和人参皂苷Re含量之和,并分析色谱图特征;以成分的提取率为指标比较仿生化和水提取法的优劣。结果:仿生化提取人参总皂苷的提取率为61.31%,人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的总提取率为62.63%;水提取人参总皂苷的提取率为54.26%,人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的总提取率为43.09%。结论:仿生化提取法对人参总皂苷、人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的提取效率高于水提取法,且仿生化提取物色谱图中显示有新成分产生。
- 陈新胡朝奇张洪长孙艳
- 关键词：人参皂苷高效液相色谱法
- 参芩抗辐射凝胶抗UVB辐射作用研究
- 2015年
- 目的研究参芩抗辐射凝胶(SQ)对UVB照射所致小鼠皮肤及免疫系统损伤的保护作用。方法采用SQ处置、UVB照射小鼠后,观察其对小鼠脏器指数,皮肤组织形态学,血液中白细胞、血小板等改变;应用MTT法检测脾淋巴细胞转化率,醇生化法检测皮肤匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果 SQ能够增加小鼠胸腺指数及白细胞计数,提高小鼠淋巴细胞转化率及小鼠皮肤组织中SOD活性。结论 SQ能够抵御UVB照射及对小鼠免疫系统、皮肤组织有明显的保护作用。
- 唐燕刘明昕张洪长张鹏飞陈新
- 关键词：SOD小鼠
- 人参、黄芩仿生化提取物对UVB照射HaCaT细胞HIF-1α表达的影响被引量：4
- 2015年
- 目的探讨人参、黄芩仿生化提取物(SQBE)对中波紫外线(UVB)照射人永生化角质形成细胞(Ha Ca T)缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达的影响,阐明SQBE预防UVB辐射所致皮肤癌发生的可能作用机制。方法将对数生长期的Ha Ca T细胞,接种于含有10%胎牛血清DMEM培养基的培养皿中,于37℃、5%CO2的细胞培养箱内常规培养;分为对照组和SQBE 1组(终浓度为12.5μg·ml-1的SQBE)、SQBE 2组(终浓度为25.0μg·ml-1的SQBE)、SQBE 3组(终浓度为50.0μg·ml-1的SQBE),各组在给药4 h后与对照组同时进行UVB(0、20、40、60 m J·cm-2)照射;继续培养24 h后,采用MTT法检测细胞生存率,荧光定量PCR法及Western blotting法检测HIF-1αmRNA及HIF-1α蛋白的表达。结果与对照组相同照射剂量比较,SQBE 3组的细胞生存率明显提高(P<0.05),SQBE1组和SQBE 2组差异无统计学意义(P>0.05);SQBE 3组能够有效降低细胞内HIF-1αmRNA及HIF-1α蛋白的表达。结论大剂量人参、黄芩仿生化提取物(SQBE)可通过对细胞内HIF-1α表达的影响,预防UVB辐射导致的皮肤癌发生。
- 张洪长刘明昕宋宁姜鸿远陈港陈新
- 关键词：人参黄芩中波紫外线缺氧诱导因子1Α
- 黄瓜子不同炮制品中化学成分的对比被引量：6
- 2014年
- 目的通过对黄瓜子不同炮制品中化学成分的对比分析,研究不同炮制方法对黄瓜子中化学成分的影响。方法分别用清炒法和微波炮制法对黄瓜子进行炮制,比较炮制品和生品中钙磷比、氨基酸及脂肪油含量的异同。结果黄瓜子生品钙磷比为2.79∶1,黄瓜子清炒品钙磷比为2.45∶1,黄瓜子微波制品钙磷比为2.26∶1;黄瓜子微波制品的氨基酸含量及脂肪油含量高于清炒品和生品。结论用微波法对黄瓜子进行炮制可提高黄瓜子的利用率。
- 祝洪宇隋莹宋宁张洪长纪绪陈新
- 关键词：钙磷比氨基酸脂肪油
- GC-MS分析比较人参花水蒸气与超临界CO2提取物及其脂肪酸成分的研究被引量：4
- 2016年
- 目的:对水蒸气蒸馏法(SD法)、超临界CO_2萃取法(SFECD法)提取的人参花挥发性成分进行分析比较,并鉴定人参花中的脂肪酸成分。方法:利用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS技术)检测提取物及酸催化的人参花脂肪酸衍生物。色谱条件:采用HP-5ms(30 mm×0.25 mm×0.25μm)石英毛细管柱,载气为氦气,流速为1 m L·min^(-1),汽化室温度280℃,进样方式为分流进样,分流比为50∶1(挥发油)及30∶1(脂肪酸衍生物),进样量为1μL,溶剂延迟时间为3.8 min;检测以SD法提取的挥发油,以SFECD法提取的挥发油,以及脂肪酸衍生物时的柱温采用不同的升温程序。质谱条件:电离源为EI源,电离能量为70 e V,离子源温度230℃,四极杆温度150℃,加速电压1 300 V,质量扫描范围为m/z 50~550。以峰面积归一化法测得挥发油各组分相对百分含量。结果:通过与数据库及文献比对,鉴定出以SD法提取的挥发油中的67种成分,以SFECD法提取的挥发油中的20种成分,以峰面积归一化法计算上述2种提取方法提取的各组分相对百分含量分别占挥发油总流出物峰面积的89.67%及61.84%。水蒸气法提取人参花挥发油组分中含量超过1%的共有11个,全部为萜类;SFECD法提取人参花挥发油流出物中,含量在1%以上的有9个化合物,经酸催化衍生后鉴定出13种脂肪酸,主要为亚油酸、十四甲基-十五酸、亚麻酸,棕榈酸。结论:水蒸气蒸馏法提取的挥发油中低沸点,高挥发性组分含量较多,而超临界CO_2萃取法可萃取出较高的极性、高沸点组分,表明超临界法提取的挥发油分解情况较少,稳定性更好。
- 王恩鹏陈雪孙岩张洪长刘淑莹陈长宝
- 关键词：水蒸气脂肪酸亚麻酸棕榈酸
- 鹿茸多肽对人骨髓间充质干细胞BMP-2和Runx2表达的影响被引量：21
- 2015年
- 目的:探讨鹿茸多肽(VAP)对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)中骨形态发生蛋白2(BMP-2)和骨特异性转录因子2(Runx2)基因和蛋白表达的影响,阐明其对骨合成及hBMSCs向成骨细胞方向分化的作用机制。方法:体外培养的hBMSCs分为对照组和5、10、15、20g·L-1 VAP组,通过检测各组hBMSCs中碱性磷酸酶(ALP)活性,确定体外用药最佳药物浓度;CCK-8法检测对照组和10g·L-1 VAP组hBMSCs增殖情况;荧光定量PCR法与Western blotting法测定对照组和10g·L-1 VAP组hBMSCs中BMP-2和Runx2基因与蛋白的表达。结果:VAP各组细胞中ALP活性均高于对照组,其中以10g·L-1 VAP组细胞中ALP活性最高(P<0.01);CCK-8法,10g·L-1 VAP组hBMSCs增殖率明显高于对照组(P<0.05),VAP诱导培养第9天hBMSCs增殖率最高,且进入平台期,之后hBMSCs的增殖率开始下降;荧光定量PCR和Western blotting检测,10g·L-1 VAP组hBMSCs中BMP-2和Runx2基因及蛋白表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:VAP能够提高hBMSCs中ALP活性,促进hBMSCs增殖分化,上调hBMSCs中BMP-2及其下游Runx2基因和蛋白的表达,这可能是VAP对hBMSCs骨形成及骨代谢影响的分子调控机制之一。
- 张洪长张莹刘明昕潘志律广富陈港姜鸿远郭骏骐
- 关键词：鹿茸多肽人骨髓间充质干细胞骨形态发生蛋白2
- 葛根素对人肾近曲小管上皮细胞ABCG2表达影响被引量：11
- 2016年
- 目的探讨葛根素(Pur)对人肾近曲小管上皮细胞(HK2)内三磷酸腺苷结合盒转运体G2(ABCG2)基因与蛋白表达的影响,阐明葛根素治疗痛风的可能机制。方法体外培养HK2细胞,分为对照组与25、50、100、200 mg/L葛根素给药组。CCK-8法检测葛根素对HK2细胞的影响;检测ALP活性,观察HK2细胞内酶促反应状态;荧光定量PCR法、Western blotting法检测对照组与给药组HK2细胞内ABCG2基因蛋白表达。结果葛根素对HK2细胞有促进增殖作用(P<0.05);100 mg/L葛根素组ALP活性最佳(P<0.01)。荧光定量PCR和Western blotting法检测结果显示,葛根素组HK2细胞内ABCG2基因及蛋白表达明显高于对照组,其中100 mg/L葛根素组HK2细胞内ABCG2最为明显,差异有统计学意义(P<0.01)。结论葛根素能够增加HK2细胞内ABCG2基因蛋白的表达,这可能是葛根素调节痛风患者血尿酸水平的重要分子机制之一。
- 张洪长张莹律广富王恩鹏陈新
- 关键词：葛根素痛风
- 雷公藤多苷对强直性脊柱炎患者成纤维细胞中BMP-2表达的影响被引量：3
- 2014年
- 目的:探讨雷公藤多苷(LGTDG)对骨形态发生蛋白(BMP)信号转导通路及BMP-2表达的影响,阐明LGTDG抗强直性脊柱炎(AS)骨化的作用机制。方法:体外培养的AS成纤维细胞分为对照组与0.5、1.0、1.5和2.0 mg·L-1给药组,检测各组细胞内碱性磷酸酶(ALP)活性及最佳药物浓度;CCK-8法检测1.0mg·L-1给药组的细胞增殖率;生化检测法定量检测对照组与1.0 mg·L-1给药组BMP-2表达水平;Western blotting法检测对照组与1.0mg·L-1给药组BMP-2和Cbfal蛋白表达。结果:各给药组细胞中ALP活性均低于对照组,其中以1.0mg·L-1给药组细胞的ALP活性为最低(P<0.01)。CCK-8法检测,1.0mg·L-1给药组AS成纤维细胞增殖率明显低于对照组(P<0.01),LDTDG诱导第4天细胞增殖率最高,进入平台期后细胞的增殖率开始下降。生化检测法和Western blotting法检测,1.0mg·L-1给药组BMP-2的蛋白表达明显低于对照组(P<0.01)。结论:LGTDG通过对BMP信号转导通路的影响有效地抑制AS成纤维细胞内BMP-2表达,延缓细胞向成骨型分化导致AS骨化发生。
- 张洪长张莹刘明昕唐燕张鹏飞潘志
- 关键词：雷公藤多苷强直性脊柱炎骨形态发生蛋白成纤维细胞BONE
- 黄瓜籽乙酸乙酯提取物对人成骨肉瘤细胞骨形态发生蛋白-2的影响被引量：5
- 2013年
- 目的通过测定骨形态发生蛋白-2(BMP-2)的表达,探讨黄瓜籽乙酸乙酯提取物(CSA)对人成骨肉瘤(MG63)细胞的活性的影响。方法采用体外培养MG63细胞,给予CSA与MG6置于37 e,5%CO2饱和湿度培养箱中共同孵育48 h,MTT比色法检测黄瓜籽提取物对细胞活性的影响;生化法检测ALP含量,ELISA法定量检测BMP-2的含量;免疫组化法测定BMP-2表达。结果 MTT法,CSA具有明显促进MG63细胞活力(P<0101);免疫组织化学染色法,CSA细胞中的BMP-2的表达量明显高于空白组;CSA组ALP和BMP-2含量高于空白组(P<0101)。结论 CSA对MG63具有保护作用,能够有效的提高MG63细胞的生存率,其机制可能与促进BMP-2表达、升高ALP和BMP-2的含量有关。
- 李娜潘志唐燕陈新宋宁张洪长
- 关键词：ALPBMP-2
