宋海燕
- 作品数：11 被引量：27H指数：3
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划卫生部科学研究基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- EGF在糖尿病足坏疽治疗中的应用研究被引量：15
- 1995年
- 根据表皮生长因子（ＥＧＦ）能启动细胞生长的有关基因、促进表皮细胞生长的原理，在８例糖尿病足坏疽患者中，实验组５例外用ＥＧＦ；对照组２例用６５４－２，１例用０．９％盐水。对照组在上述药物治疗效果不明显时改用ＥＧＦ。８例患者１３个创面用ＥＧＦ后第３～５天皮肤生长，经８～６２天创面愈合。临床和实验证明ＥＧＦ有明显促创面皮肤生长作用。
- 朱西娥黄华梁刘德辉宋海燕关小宏笪冀平
- 关键词：糖尿病足坏疽表皮生长因子
- 抗乙型脑炎病毒单克隆抗体轻链可变区基因的分离和鉴别被引量：4
- 1993年
- 为了构建抗乙型脑炎病毒的人—鼠嵌合抗体,以分泌抗乙型脑炎病毒单克隆体的51-8杂交瘤细胞株为材料,以J_κ和V_κ为探针,从λEMBL-3为载体构建的基因文库中分离有功能性的轻链可变区基因。经3次复筛得到19个阳性噬菌斑。将阳性噬菌斑的DNA重组体和小鼠肝DNA分别用BamH I酶切后进行分析,在分析的8个重组体中,其中5个含有2.8kb片段,而肝DNA含有8.9kb、5.6kb、3.6kb及3.1kb4个片段,没有2.8kb片段。由于肝DNA的4个片段是未经重排的种系基因,因此可以推断重组体中的2.8kb片段是经过重排的轻链可变区基因。为了进一步鉴定,又从中选出3个含有2.8kb片段的重组噬菌斑,以V_κ和J_κ作探针分别进行点杂交,结果都为阳性,进一步说明了2.8kb片段是经过重排的轻链可变区基因。将这一2.8kb片段克隆到pUC19中,得一重组子,命名为pVLD24。利用pCR扩增技术从pVLD24中扩增出预期的334 bp轻链V基因。综合证实了所鉴别得到的功能性轻链可变区基因是完整的,并且用不同的限制性内切酶绘制了这一功能性基因的酶切图谱。
- 黄发灿黄华梁熊曦明桂进熊伟林晴宋海燕陈伯权
- 关键词：乙型脑炎病毒单克隆抗体轻链
- 表皮生长因子在糖尿病足坏疽治疗中的临床应用被引量：2
- 1994年
- 朱西娥刘德辉关小宏冯毅黄华樑宋海燕
- 关键词：表皮生长因子糖尿病足坏疽
- 抗人膀胱癌单克隆抗体重、轻链可变区基因体外扩增、克隆及序列分析被引量：2
- 1996年
- 应用人工合成的两套引物，从分泌抗人膀胱癌特异性单抗的杂交瘤细胞ＢＤＩ－１中提取总ＤＮＡ。以之作模板，经ＰＣＲ法扩增出重、轻链可变区基因片段。将扩增产物分别插入ＰＵＣ１９质粒，筛选出阳性克隆，用链终止法进行ＤＮＡ序列测定。结果表明：重链可变区基因全长３６６ｂｐ，编码１２２个氨基酸，属于小鼠重链可变区的ＳｕｂｇｒｏｕｐＩＩ，由种系基因中的ＶＨ与Ｄ基因的Ｄｓｐ２．２及ＪＨ４基因重排而成；轻链可变区基因全长３２４ｂｐ，编码１０８个氨基酸，属于小鼠轻链可变区的ＳｕｂｇｒｏｕｐＩＶ，由种系基因中的Ｖκ与Ｊκ４基因重排而成。与已发表的抗体可变区基因序列比较。
- 萧飒俞莉章顾征刘喜富郭应禄顾方六王勇陈艾宋海燕林晴黄华梁
- 关键词：基因表达调节单克隆抗体轻链
- 表皮生长因子促糖尿病足坏疽创面皮肤生长的研究被引量：3
- 1996年
- 表皮生长因子促糖尿病足坏疽创面皮肤生长的研究朱西娥，刘德辉，冯毅，唐兰，关小宏内分泌科黄华梁，宋海燕，林晴中国科学院遗传研究所１００１０１主题词表皮生长因子，尿抑胃激素，糖尿病足足坏疽是糖尿病的严重并发症之一，既往多采用截肢治疗。近十年来，采用控制血...
- 朱西娥刘德辉冯毅唐兰关小宏黄华梁黄华梁林晴
- 关键词：表皮生长因子糖尿病足坏疽创面皮肤生长
- 抗乙型脑炎病毒单抗重链可变区基因的筛选和鉴别被引量：1
- 1992年
- 为了制备抗乙型脑炎病毒的人-鼠嵌合抗体,以分泌抗乙型脑炎病毒单抗的51-8杂交瘤细胞株为材料,分离这一单抗的重链可变区基因。杂交瘤细胞的大分子量DNA经Bam HI部分酶切后,以λEMBL-3为载体,构建了总数为2×10~7pfu的基因文库。以抗乙脑病毒单抗重链可变区cDNA为探针,从360000个噬菌斑中筛选出9个阳性斑,经点杂交及Southern杂交证明它们都含有重链可变区基因的片段。进一步以J_(11)探针(含J_3、J_4和重链增强子)对其中4个重组体进行鉴别。经EcoRI酶切后,有3个重组体含有与肝细胞和Sp2/0细胞相同的3.8kb片段,而第4个重组体(λ8a4)没有这一片段,却有一个4.5kb片段,这是在肝细胞和Sp2/0细胞中不存在的。从而证明前3个重组体的插入片段是未经重排的重链可变区基因片段,而λ8a4中的插入片段含有经过重排的功能性可变区基因。这一4.5kb片段不能与含有J_1—J_2的探针杂交,却同时含有V_H、J,或/和J_4和增强子。进一步证明,这是一个功能性的可变区基因。因此,将这一4.5kb片段分离出来之后,在pUC19中亚克隆并作酶切图。为构建抗乙脑病毒的人-鼠嵌合重链基因奠定了基础。
- 黄华梁桂进宋海燕王艳丽尚芙蓉林晴陈伯权叶群瑞吴美英刘琴芝杨志兴
- 关键词：乙脑病毒可变区基因单克隆抗体
- 表皮生长因子和654-2在糖尿病足坏疽治疗中的实验研究被引量：1
- 1994年
- 朱西娥刘德辉关小宏黄华梁宋海燕
- 关键词：表皮生长因子糖尿病足坏疽
- 菠菜BADH单抗细胞株及其应用初探
- 1996年
- 用菠菜甜菜碱醛脱氢酶 ( BADH)免疫巴比西 ( BALB/c)小鼠 ,将其脾细胞与骨髓瘤细胞 SP2 /O-Ag1 4融合 ,在 1 92孔中 ,有约 1 4 %孔生长的杂交瘤细胞 ,用间接酶联免疫方法 ( ELISA)检测表现为阳性。选择其中 2 G3和 2 D10 细胞系 ,用有限稀释法进行克隆化培养 ,约 2 0 %克隆化细胞为强阳性。选择其中 2 G3- H3细胞株注射到 BALB/c小鼠腹腔中诱导腹水 ,腹水的单抗效价为 1∶ 1 0 3。应用 BADH单抗检查了大麦、水稻、高粱、小麦幼苗的叶片和根的粗提物 ,均呈阳性反应 ,表明 BADH除在光合组织中存在外 ,在非光合组织中也可能存在。讨论了非光合组织
- 梁峥谭平平骆爱玲宋海燕张婷白琴华
- 关键词：菠菜甜菜碱醛脱氢酶单克隆抗体
- 表皮生长因子对体外建株瘤细胞的促增殖作用及其对瘤细胞顺铂敏感性的影响被引量：2
- 1997年
- 本文采用３，４，５－二甲基噻唑－２，５－二苯基－四唑溴化物（ＭＴＴ）比色法及乳酸脱氢酶释放法，研究了表皮生长因子（ＥＧＦ）对人骨髓红白血病细胞系（Ｋ５６２）、人Ｂ淋巴细胞白血病细胞系（Ｒａｊｉ）、人宫颈癌细胞系（Ｈｅｌａ）的促增殖作用及其对３种瘤细胞顺铂（ＣＤＤＰ）敏感性的影响。结果显示，ＥＧＦ能够促进Ｒａｊｉ、Ｈｅｌａ细胞增殖，对Ｋ５６２细胞的生长没有促进作用。ＥＧＦ与ＣＤＤＰ同时接触瘤细胞，不能增高瘤细胞对ＣＤＤＰ的敏感性，但提前２４小时接触瘤细胞，Ｒａｊｉ、Ｈｅｌａ细胞对ＣＤＤＰ敏感性明显增高；Ｋ５６２细胞的敏感性则未见增高。表明ＥＧＦ增高肿瘤细胞ＣＤＤＰ敏感性可能与其提前激活瘤细胞表面的ＥＧＦ功能性受体有关。揭示ＥＧＦ激活的信号传导通路在ＣＤＤＰ细胞毒作用中起调节作用。
- 洪新宋淑云仲来福白琴华宋海燕
- 关键词：表皮生长因子药物敏感性顺铂增殖
- 单克隆抗体γ_3重链可变区cDNA的合成与克隆
- 1989年
- 用异硫氰酸胍法从分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取总RNA,经oligo(dT)-纤维素柱亲和层析获得poly(A)^+ RNA后,用恒定区5′端第122—125号氨基酸密码的互补序列3′A-T-A-G-G-T-G-A-C-C 5′做为引物,进行逆转录酶反应,合成双链cDNA,大小为300bp左右,与重链可变区基因的长度相符。用dC:dG接尾的方法,将ds-cDNA插入pUC19质粒,转化E.coli HB101。分离出重组体之后,经菌落原位杂交,酶切重组质粒DNA及Southern印迹,证明插入片段是重链可变区基因。
- 尚芙蓉黄华樑宋海燕陈虹杨志兴
- 关键词：单克隆抗体CDNA克隆
