吕鑫钰
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：哈尔滨市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人—鼠嵌合抗CD20单抗的研究与开发
- 目的:完成能够稳定表达CD20蛋白和能够稳定分泌抗CD20单克隆抗体细胞株的建立，为嵌合抗体制备的后续工作做准备。 方法和结果:提取Raji细胞RNA后以此为模板，通过基因工程的方法构建重组表达质粒PET32a-CD2...
- 吕鑫钰
- 关键词：真核表达嵌合抗体非霍奇金淋巴瘤单克隆抗体基因工程
- 人肝脏凝血因子Ⅺ的原核表达及其兔多克隆抗体的制备被引量：2
- 2014年
- 目的利用原核表达系统表达人肝脏凝血因子Ⅺ(coagulation factorⅪ,F11)蛋白,并制备F11的兔多克隆抗体。方法从cDNA文库中筛选并扩增F11基因,将其分别与带有HIS标签的pET-32a及GST标签pGEX-4T-1载体连接,获得表达质粒,将表达质粒转入BL21菌中表达F11融合蛋白(分别含有HIS、GST-Tag),通过SDS-PAGE进行鉴定。获得的F11融合蛋白经纯化后作为免疫原及检测原,制备兔多克隆抗体,Western blot分析获得的兔多克隆抗体的特异性。结果成功构建pET-32a-F11、pGEX-4t-1-F11表达质粒,获得两种标签的融合蛋白。将重组蛋白纯化后作为免疫原免疫兔,取得了能与重组蛋白特异性结合的兔血清。结论成功制备了F11重组蛋白及F11兔多克隆抗体,为进一步研发F11诊断试剂打下了基础。
- 吕鑫钰廖林李淑珍朱大岭
- 关键词：原核表达融合蛋白
- 对氧磷脂酶PON1蛋白的原核重组表达
- 2012年
- 目的重组及表达对氧磷脂酶PON1的融合蛋白,为进一步制备相应单克隆抗体作准备,为建立一种冠心病辅助诊断方法奠定基础。方法以成人肝cDNA文库为模板,应用PCR技术扩增出PON1基因,将其分别与带有HIS标签的pET-32a及GST标签的pGEX-4T-1载体连接,转化入DH5α菌中进行克隆并测序鉴定。进一步构建表达体系,用异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,最终在BL21菌中表达PON1融合蛋白(分别含有HIS、GST-Tag),并进行SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果以成人肝cDNA文库为模板经PCR扩增后得到一条234 bp的DNA片段,经测序鉴定为PON1基因序列;并在大肠杆菌中实现了包涵体形式的表达,经Western blot鉴定为PON1融合蛋白。结论采用原核表达方法可获得高纯度的PON1融合蛋白,为进一步制备相应的单克隆抗体和开发PON1诊断试剂盒打下基础,为冠心病的诊断开辟新途径。
- 郝雪微李淑珍吕鑫钰朱大岭
- 关键词：冠心病生物标志物原核表达
