吕占禄
- 作品数：7 被引量：40H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家肉羊产业技术体系建设项目“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 羊口疮病毒B2L蛋白二级结构及其细胞表位的预测被引量：9
- 2012年
- 采用网络平台的SOPMA服务器和DNAStar软件预测羊口疮病毒(ORFV)B2L蛋白的二级结构;综合利用DNAStar软件、二级结构预测及ABCpred方案预测羊口疮病毒B2L蛋白的B细胞表位;分别采用人工神经网络法(ANNA)和在线程序预测羊口疮病毒B2L蛋白的细胞毒性T细胞和辅助T细胞的抗原表位。结果显示,羊口疮病毒B2L蛋白的整个结构中α-螺旋区域和无规则卷曲区域出现得较多,其中α-螺旋占30.42%,β-片层占24.34%,β-转角占5.56%,无规则卷曲占39.68%;有6个优势B细胞表位,3个细胞毒性T细胞表位和2个辅助T细胞表位。本研究为ORFV诊断方法的建立、单克隆抗体的制备及表位疫苗的研制提供了理论依据。
- 王光祥尚佑军吕占禄田宏张克山刘湘涛
- 关键词：羊口疮病毒B2L基因B细胞表位T细胞表位
- 羊口疮病毒F1L蛋白二级结构分析与表位预测被引量：20
- 2012年
- 目的利用软件预测羊口疮病毒(ORFV)F1L蛋白的二级结构和细胞表位。方法利用SOPMA服务器预测ORFV F1L蛋白的二级结构,以DNAStar软件单参数(二级结构、亲水性、可及性、柔韧性及抗原性)预测结果为基础,通过二级结构预测初步筛选,并以ABCpred方案作为最终验证,预测羊口疮病毒(ORFV)F1L蛋白的B细胞表位;运用神经网络+量化矩阵法(ANNs+QM法)预测ORFV F1L蛋白的CTL细胞表位;使用MHC-II类分子结合肽在线程序预测ORFV F1L蛋白的Th细胞表位。结果 ORFV F1L蛋白含有α-螺旋34.71%、β-片层18.82%、β-转角5.88%、无规则卷曲40.59%;没有信号肽,可能存在7个B细胞表位,2个CTL表位,3个Th细胞表位。结论该研究结果将为建立ORFV诊断方法、制备单克隆抗体及合成肽疫苗提供理论依据。
- 王光祥尚佑军吕占禄张克山田宏刘湘涛
- 关键词：羊口疮病毒
- 口蹄疫病毒受体基因的克隆及猪源受体β1和β3亚基基因稳定转染CHO细胞系的建立
- 口蹄疫（Foot-and-Mouth Disease，FMD）是由口蹄疫病毒（FMDV）引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病，主要感染牛、羊、猪等家畜动物和野生动物，并且对牲畜产品、动物和动物产品贸易中造成严...
- 吕占禄
- 关键词：口蹄疫病毒CHO细胞系
- 文献传递
- 口蹄疫病毒OT株的全基因组序列测定及比较分析
- 2012年
- 参考GenBank上已发表的口蹄疫病毒(FMDV)全长基因组序列,设计了覆盖基因组全长的数对引物,通过RT-PCR方法对口蹄疫病毒OT株进行分段克隆及序列测定。结果表明不含poly(C)序列的OT株基因组全序列长8 142nt,开放读码框(ORF)长6 969nt、编码2 322aa,5′UTR长1 004nt,3′UTR长93nt,3′UTR之后为23nt的poly(A)尾巴。应用分子生物学软件将OT株与FMDV其它参考毒株进行序列比对,并对其基因特征进行分析。结果显示,OT株的假结节(Pseudoknots)从第415—499位连续缺失85nt,但是其3A基因却未发生碱基的缺失。其VP1基因的核苷酸同源性与O/Akesu58、OMⅢ两株最高,但OT株在进化时间上要比O/Akesu58、OMIII早很多,其毒株起源和遗传衍化关系还需要进一步的关注。
- 吕占禄王光祥尚佑军刘湘涛
- 关键词：口蹄疫病毒全基因组编码区分子生物学特性
- 猪口蹄疫病毒受体β3亚基的基因克隆与分子特征
- 2012年
- 目的为研究β3亚基在口蹄疫感染过程中所扮演的角色,同时也为进一步深入研究FMDV嗜性、与宿主细胞的相互作用、病毒的侵入机制等问题奠定基础。方法从正常的猪肾细胞(pk15)中克隆到了整联蛋白β3亚基的基因,对其核苷酸序列和推导的氨基酸序列以及蛋白结构进行了分析并与真核表达载体pCDNA3.1(+)相连接。结果猪整联蛋白β3亚基基因的编码区含有2 355个核苷酸,编码785个氨基酸残基,其信号肽由22个氨基酸组成;胞外域由692个氨基酸组成,含有8个潜在的糖基化位点(NXS/NXT)和57个半胱氨酸(Cys)残基;跨膜区由29个氨基酸组成;胞浆域由41个氨基酸组成。猪β3基因与羊、人、马、犬、家鼠和挪威大鼠此基因核苷酸序列的同源性分别为94.3%、90.1%、92.1%、90.9%、86.1%、86.2%,推导氨基酸序列的同源性分别为95.0%、91.8%、92.5%、91.7%、88.8%、88.7%。结论通过生物学软件分析发现猪β3亚基形成复杂的2、3级结构,其中1-22位、715-743位氨基酸区段疏水性较强,分别是该亚基的信号肽和跨膜区,以及成功构建了β3亚基的重组真核表达载体pCDNA3.1(+)β3。
- 吕占禄王光祥尚佑军刘湘涛
- 关键词：口蹄疫病毒受体分子特征
- 虎源猫瘟热病毒的分离和鉴定被引量：4
- 2010年
- 为了分离并鉴定发病虎粪便和脾脏中的1株疑似猫瘟热病毒(FPV),试验将金标记FPV试纸条初步鉴定阳性的虎粪样经无菌处理,接种于猫肾传代(CRFK)细胞。结果表明:经细胞传代成功分离猫瘟热病毒,命名为FPV-HLJ;该毒株接种细胞后能够产生明显细胞病变(CPE);病毒细胞培养液能凝集猪红细胞(凝集效价达26～28),但不能凝集鸡红细胞;电镜观察可见大量外观呈圆形或六边形,大小20～23nm的病毒粒子;对该病毒VP2全基因克隆并测序,该基因全长均为1755个核苷酸,编码584个氨基酸,与FPV标准毒株CU-4(GenBank登录号M38246)VP2基因大小相同,其决定抗原性、血凝性和宿主特异性的几个关键位点的氨基酸符合FPV的氨基酸序列特征,证明该毒株为猫瘟热病毒。
- 张亚成田丽红吕占禄王颖句仁杰陈雁飞
- 关键词：猫瘟热病毒
- 湖北省羊口疮病毒的分离鉴定被引量：10
- 2012年
- 利用MDBK传代细胞系对湖北通山县某羊场疑似羊口疮(Orf)的黑山羊病料进行分离,通过病毒理化特性试验、动物回归试验和PCR等方法对分离的毒株进行鉴定。结果表明,病料悬液接种MDBK细胞后出现细胞病变,接种病料的羊只出现典型的Orf症状,扩增出羊口疮病毒(Orf virus)B2L基因,该毒株与台湾山羊株(EU935106.1、DQ904351.1)相似性最高(均为99%),亲缘关系最近。本研究成功分离鉴定到一株ORFV,命名为ORFV/HB/09。
- 王光祥尚佑军陈江涛吕占禄张克山刘湘涛
- 关键词：动物回归试验聚合酶链反应
