刘美芹
- 作品数：14 被引量：134H指数：6
- 供职机构：北京林业大学生物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学历史地理更多>>
- 沙冬青抗寒基因的克隆、功能分析与遗传转化研究
- 刘美芹
- 关键词：沙冬青遗传育种抗性育种抗冻性基因转录
- 沙冬青低温诱导基因的克隆与功能分析
- ＜正＞沙冬青是亚洲中部一种强抗逆植物,生长在荒漠地带,是我国北方地区极少有的长绿阔叶灌木,也是国家三级保护植物,对维持当地生态平衡起着重要的作用。沙冬青具有耐热、旱、盐碱,更耐寒等多种抗性,尤其能忍受冬季零下-30℃的低...
- 刘美芹卢存福沈昕尹伟伦
- 文献传递
- 北京颐和园西堤古柳组织培养体系的建立被引量：7
- 2009年
- 古树名木是大自然经过漫长的历史变迁,留给人类的宝贵遗产,具有重要的科学、文化和经济价值。为了传承历史文化,留传历史园林植物的宝贵遗传种质资源,以北京颐和园西堤古柳嫩枝为外植体进行茎段组织培养试验研究。结果表明:取古柳树外植体带有侧芽的茎条切段进行组织培养,以MS为基本培养基,附加不同浓度的6-BA和NAA进行分化诱导,其中最适启动培养基为不添加任何激素的MS培养基(2.0%蔗糖);最适不定芽诱导培养基及激素配比为MS+6-BA0.8 mg/L+NAA 0.2 mg/L+3.0%蔗糖;不定根最适诱导培养基为1/2MS+NAA0.2mg/L+1.5%蔗糖。
- 王雅群李辛晨陈玉珍刘美芹卢存福
- 关键词：茎段
- 沙冬青GATA型锌指蛋白基因序列及表达分析被引量：11
- 2011年
- 根据沙冬青低温干旱诱导cDNA文库表达序列标签中锌指蛋白基因序列设计特异引物,采用PCR技术扩增锌指蛋白基因AmZFPG的cDNA全长。序列分析表明,cDNA全长669bp,推测编码223个氨基酸残基、分子量约25kD的蛋白质。氨基酸保守性分析及同类锌指结构比对表明AmZFPG属于GATA结合蛋白家族,且具有高度的保守性。系统发生分析表明,其与紫花苜蓿富含脯氨酸的细胞壁蛋白进化亲缘关系最近。半定量RT-PCR分析显示,AmZFPG基因是受低温和干旱诱导表达上调的基因,初步得出AmZFPG基因与沙冬青低温和干旱胁迫响应相关。
- 史军娜刘美芹师静王艳萍智冠华陈玉珍卢存福
- 关键词：沙冬青锌指蛋白
- 外遗传分子生物学研究进展被引量：2
- 2003年
- 该文综述了外遗传 (Epigenetics)这一新的分子生物学研究领域的提出、发展和最新研究进展 .指出外遗传是DNA碱基序列之外的遗传系统 .阐述了DNA甲基化、RNA介导的基因沉默、基因组印记和组蛋白密码等外遗传相关因素在生物体生长发育过程中对基因表达的重要调控作用 ,以及这些因素与生物体的防御机制和生物遗传信息的传递间存在的密切联系 ,并提出了从外遗传角度探索物种进化和生物适应逆境的新途径 .
- 刘美芹卢存福尹伟伦
- 关键词：DNA甲基化基因组印记组蛋白密码
- 一种改进的固相扣除杂交法直接克隆全长差异表达基因被引量：2
- 2007年
- 该文集多种分离差异表达基因方法的优点于一体,自行优化了一种基于固相扣除杂交和聚合酶链式反应(PCR)技术直接克隆全长差异表达基因的策略.该策略中的所有操作步骤,包括poly(A)+mRNA的分离,cDNA的合成和扣除杂交都是在磁珠上进行的,操作简单易行.扣除杂交是用结合在磁珠上的以oligo(dT)为引物合成的对照材料(Driver)的cDNA第一链,直接扣除加有接头的处理材料(Tester)cDNA第二链中的共有序列.多次反复使用Driver一链与Tester二链进行杂交,能有效去除Tester二链中的共有序列.磁珠的分离能最小限度地减少每次杂交造成的损失.最后一轮扣除后的Tester二链中,含有大量差异表达序列,用Tester二链特有的接头引物进行扩增,能进一步提高扣除效率.该文选用此扣除方法,成功分离到了低温驯化沙冬青幼苗和对照苗2个群体的18个差异表达克隆,其中有4个克隆是全长cDNA序列.经序列分析发现,这些基因都与低温相关,进一步说明,该方法可用于克隆未知差异表达基因.
- 刘美芹沈昕卢存福尹伟伦
- 关键词：聚合酶链式反应低温诱导基因
- 沙冬青A20/AN1锌指蛋白基因序列及表达分析被引量：4
- 2012年
- A20/AN1锌指蛋白普遍存在于真核生物中,在胁迫响应引起的信号传导过程中发挥着重要作用。本文利用生物信息学和RT-PCR方法从低温干旱胁迫的沙冬青叶片组织中分离锌指蛋白基因AmSTZF,该基因编码一条含172个氨基酸残基的多肽,含A20和AN1两个锌指蛋白保守结构域,属A20/AN1锌指蛋白。生物信息学分析显示该蛋白定位于细胞质中,具有磷酸化位点,参与细胞转录调控。RT-PCR分析表明:低温和干旱胁迫处理的沙冬青叶片中,AmSTZF的表达增强,初步推测该基因与沙冬青低温、干旱胁迫响应相关。
- 史军娜刘美芹刘杰陈玉珍卢存福
- 关键词：沙冬青
- 沙冬青AmLEA5基因的生物信息学分析及非生物胁迫下的表达模式被引量：5
- 2013年
- 对用固相扣除杂交方法从低温驯化沙冬青克隆得到的AmLEA5基因进行表达模式分析和生物信息学分析,表明该基因编码一种第5族胚胎发育晚期丰富蛋白(LEA),全长693 bp,含有1个297 bp的开放阅读框,编码98个氨基酸,预测Am-LEA5的分子量为10.6 kDa,是一种亲水性蛋白,有多个磷酸化位点。密码子偏好性分析表明该基因略偏好于用A或T结尾的密码子。系统发生分析表明,AmLEA5蛋白与蒺藜苜蓿LEA(ACJ84182.1)亲缘关系最近。qRT-PCR结果显示AmLEA5的表达量在低温、干旱、盐和热胁迫条件下均有上调,尤其在低温胁迫后期富集量最高。亚细胞定位表明,用YFP标记的AmLEA5位于细胞质和细胞核内。一系列试验结果表明AmLEA5基因在沙冬青抵御非生物胁迫,尤其是在抵御低温胁迫机制中发挥重要作用。
- 赵晓鑫刘美芹师静智冠华刘胜利张俊琦陈玉珍卢存福
- 关键词：沙冬青生物信息学分析亚细胞定位
- 过量表达沙冬青巯基蛋白酶抑制剂基因AmPI提高大肠杆菌低温与热胁迫抗性被引量：19
- 2010年
- 沙冬青是我国北方内蒙古荒漠地区特有的常绿阔叶灌木,具有很强的抗低温、干旱、盐碱能力,是重要的抗逆基因资源植物.将从低温诱导的沙冬青幼苗中克隆获得的巯基蛋白酶抑制剂基因AmPI亚克隆后构建到原核表达载体pTWIN1上,得到重组表达载体pT-PI,双酶切及测序结果证明pT-PI已经构建成功.将pT-PI转入大肠杆菌ER2566中,经异丙基β-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后,SDS-PAGE电泳检测发现有Mr35×103的目的融合蛋白表达,与预测结果一致,其中以在37℃诱导3～4h条件下表达量最高,表明目的基因AmPI在大肠杆菌中得到了成功表达.分别测定了低温(0℃)和热胁迫(50℃)条件下AmPI宿主菌的生存能力,结果表明AmPI的表达能提高宿主菌的存活率,可能是AmPI对细胞具有保护功能.
- 刘瑞玲刘美芹史军娜陈玉珍卢存福
- 关键词：沙冬青大肠杆菌融合蛋白非生物胁迫
- 珍稀濒危植物沙冬青生物学特性及抗逆性研究进展被引量：69
- 2004年
- 沙冬青是我国西北荒漠地区唯一的超旱生常绿灌木树种 ,生境严酷 ,抗逆性极强 ,是一种优良的种质资源 ,现已被列为珍稀濒危植物 .本文综述了沙冬青的生物学特性、生态生理特征、珍稀濒危的原因及扩大快繁的组织培养研究进展 ,从形态解剖特点、超微组织生理代谢调控角度 ,从抗旱、抗寒、抗盐碱 3个方面分析了沙冬青能在逆境中得以生存的原因及其适应残酷生境的机理 ,阐述了沙冬青的多种价值及开发应用前景 .参 4
- 刘美芹卢存福尹伟伦
- 关键词：沙冬青生物学特性抗逆性珍稀濒危植物灌木荒漠地区
