刘瑞
- 作品数:13 被引量:19H指数:3
- 供职机构:南京农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学轻工技术与工程生物学医药卫生更多>>
- HPLC/紫外-荧光检测器串联用于检测土壤和植物中的PAHs方法
- 本发明公开了一种HPLC/紫外?荧光检测器串联用于检测土壤和植物中的PAHs方法,属于分析检测领域。该方法用超声提取法提取,并结合HPLC/UV?FLD分离和分析土壤和植物样品的PAHs,具有操作简单、省时、回收率较高、...
- 高彦征刘瑞康福星
- 文献传递
- STK在猪链球菌2型穿透血脑屏障中的作用机制
- <正>猪链球菌2型(SS2)是重要的人畜共患病病原菌,致病能力强,给养殖业造成了巨大的经济损失,亦能感染人引起脑膜炎严重威胁公共卫生。尽管已报道了SS2相关的多种毒力因子,但致脑膜炎机理仍不清晰。本研究利用可用于猪链球菌...
- 刘瑞
- 文献传递
- 鸭细胞因子克隆表达及ELISA检测方法的建立
- 细胞因子是由细胞分泌的蛋白质,在炎症和免疫应答中发挥着重要作用,主要参与激活和调节其他细胞和组织。目前对哺乳动物细胞因子研究较多,但对禽类细胞因子的作用以及它们相应的蛋白质研究甚少。原因是因为禽类与哺乳动物同源细胞因子的...
- 刘瑞
- 关键词:细胞因子ELISA检测法基因克隆免疫系统
- 文献传递
- AI-2对鸭疫里氏杆菌粘附入侵Vero细胞及其相关基因转录水平的影响被引量:2
- 2013年
- 【目的】自诱导信号分子AI-2(Autoinducer-2,AI-2)作为细菌间的通用自诱导信号分子,参与细菌众多生理功能的调控。本研究通过开展AI-2在鸭疫里氏杆菌(Riemerella antatipestifer,RA)CH3株对非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)的粘附、入侵以及对RA相关基因调控作用的研究,为进一步研究AI-2对RA的调控作用奠定基础。【方法】在CH3(血清型1型)对Vero细胞的粘附、入侵过程中加入不同浓度的AI-2,研究其对CH3粘附、入侵Vero的影响;在添加184.0μmol/L AI-2的胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)中培养RA CH3菌株,利用real-time PCR来检测AI-2对RA相关基因转录水平的影响。【结果】结果表明,AI-2浓度为18.4μmol/L时,AI-2对CH3粘附Vero细胞的抑制性最强,为62%,当AI-2浓度为184.0μmol/L时,AI-2对CH3入侵Vero细胞的促进性最强为194%。荧光定量PCR结果表明AI-2对部分基因的转录有促进作用,对部分基因的转录有抑制作用。【结论】AI-2参与调控RA粘附、入侵Vero细胞及RA毒力因子、免疫原性蛋白基因以及代谢相关基因转录水平的调控。
- 刘蕾韩先干刘瑞白灏董洪亮丁铲刘海文于圣青
- 关键词:鸭疫里氏杆菌粘附入侵REAL-TIMEPCR
- 猪链球菌2型丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶通过影响紧密连接穿越血脑屏障的机制
- 猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype2,SS2)是猪链球菌病主要病原菌之一,亦能够引起人的感染,是一种重要的人兽共患病原菌。 1998年和2005年曾两次在我国引起重大人员伤亡,临床症状...
- 刘瑞
- 关键词:猪链球菌2型毒力因子苏氨酸蛋白激酶血脑屏障
- 信号分子AI-2对禽致病性大肠杆菌的调控作用被引量:6
- 2012年
- 【目的】研究信号分子AI-2对禽致病性大肠杆菌(APEC)的调控作用。【方法】采用改良结晶紫半定量法和荧光染色法检测AI-2对APEC生物被膜形成能力的影响。Real-time PCR检测AI-2对APEC毒力基因转录水平的影响。活菌计数法观察AI-2对APEC黏附和入侵鸡胚成纤维细胞DF-1的影响。【结果】AI-2在浓度为0.185 mmol.L-1时,生物被膜形成能力显著增强,而浓度为0.037mmol.L-1和0.285mmol.L-1时,生物被膜形成能力无显著变化。Real-time PCR结果显示加入AI-2后,APEC毒力基因pfs,vat,luxS,tsh,fuyA,iucD转录水平显著下调,ompA和iss则上调。加入AI-2后,APEC对DF-1细胞的黏附和入侵能力分别下降到原来的57.35%和36.64%。【结论】AI-2对禽致病性大肠杆菌生物被膜形成具有浓度依赖性,在适宜浓度下能显著增强。AI-2能减弱禽致病性大肠杆菌毒力基因的转录水平和对DF-1的黏附和入侵能力。表明AI-2参与调控APEC致病性。
- 白灏韩先干刘蕾单雪芹宋军刘瑞董洪亮刘海文丁铲于圣青
- 关键词:禽致病性大肠杆菌生物被膜毒力基因入侵
- AI-2对鸭疫里氏杆菌粘附入侵Vero细胞及其相关基因转录水平的影响
- 自诱导信号分子AI-2(Autoinducer-2,AI-2)作为细菌间的通用自诱导信号分子,参与细菌众多生理功能的调控。本研究通过开展AI-2在鸭疫里氏杆菌(Riemerella antatipestifer,RA)C...
- 刘蕾韩先干刘瑞白灏董洪亮丁铲刘海文于圣青
- λpL/pR-cI857温控系统的改造及其对大肠杆菌菌蜕制备的影响被引量:4
- 2012年
- 菌蜕是革兰氏阴性菌在噬菌体Phix174的溶菌基因E的作用下形成的细菌空壳,通常由λpL/pR-cI857温控系统通过调控E基因的表达制备。通过重叠PCR技术,将λpL/pR-cI857温控系统中λpR启动子的第2个操纵基因(OR2)的第9位碱基由T突变为C(T→C)。溶菌试验结果表明,突变后的λpL/pR-cI857系统在37℃时仍能稳定抑制基因E的表达,对大肠杆菌的溶菌率为99.9%。通过对λpR启动子的改造,扩大了λpL/pR-cI857温控系统的温度调控范围,为菌蜕疫苗的研制提供了参考。
- 董洪亮韩先干白灏何亮刘蕾刘瑞柴同杰丁铲刘海文于圣青
- 关键词:大肠杆菌重叠PCR突变
- 土壤-植物系统中PAHs检测方法和分布规律
- 多环芳烃(PAHs)主要是由化石燃料不完全燃烧或高温裂解等产生、由两个或两个以上苯环稠合在一起的一类持久性有机污染物(POPs),具有高脂溶性、强疏水性特征,和“致畸、致癌、致突变”等“三致”效应。其结构稳定、易在土壤中...
- 刘瑞
- 关键词:土壤污染多环芳烃
- 文献传递
- 鸭白细胞介素-2基因的克隆表达和单克隆抗体的制备被引量:1
- 2013年
- 为研制鸭IL-2单克隆抗体,运用RT-PCR技术从樱桃谷鸭脾淋巴细胞中扩增鸭IL-2基因,将其克隆至原核表达载体pCold TF DNA中,进行诱导表达。用纯化的IL-2重组蛋白免疫BALB/c小鼠,融合后筛选抗鸭IL-2的阳性杂交瘤细胞株。通过间接ELISA法测定腹水效价、Western-blot法检测其免疫反应性,并鉴定抗体的亚类。测序结果显示,去除信号肽后的鸭IL-2基因,其编码区全长为363bp,编码120个氨基酸;SDS-PAGE检测结果表明,获得了可溶性的65ku的IL-2融合蛋白;免疫小鼠后获得3株抗鸭IL-2的阳性杂交瘤细胞株,腹水效价均达到1∶512 000以上,为IgG2b亚类。Western-blot结果表明,制备的单克隆抗体具有良好的免疫反应性。上述结果表明,成功制备了抗鸭IL-2的单克隆抗体,为进一步建立鸭IL-2的检测方法奠定了基础。
- 刘瑞韩先干范红结王少辉刘海文丁铲于圣青
- 关键词:克隆单克隆抗体