刘彩宏
- 作品数：10 被引量：36H指数：4
- 供职机构：延安大学附属医院更多>>
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- 红景天苷对LPS刺激人牙周膜细胞增殖和分泌表达的影响
- 2016年
- 目的研究红景天苷(salidroside,SAL)对大肠杆菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激后体外培养人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,h PDLCs)的增殖及对分泌表达Toll样受体(Toll-like receptor 4,TLR 4)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)及核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)的影响,为红景天苷在牙周炎治疗方面提供初步的实验依据。方法组织块法原代培养正常h PDLCs;以2 mg/L LPS刺激第4代细胞,加入不同浓度的红景天苷作用12、24、48 h;采用MTT方法检测细胞的增殖;采用Western blot、ELISA、qRT-PCR等方法检侧TLR-4、TNF-α、IL-1β、IL-6、OPG及RANKL的表达水平,并进行统计学分析。结果 MTT结果显示低浓度的红景天苷(≤10μmol/L)均能促进细胞增殖,并存在浓度依赖性,其中0.5μmol/L对h PDLCs增殖作用最明显(P<0.05),高浓度的红景天苷(>10μmol/L)不能促进牙周膜细胞增殖;Western blot、ELISA及qRT-PCR结果显示:0.5μmol/L红景天苷可使LPS刺激的h PDLCs的TLR4、TNF-α、IL-1β、IL-6及RANK表达水平随时间延长而逐渐降低,其中48 h降低的最为明显,存在显著性差异(P<0.05);另外,LPS刺激对OPG的表达几乎没有影响,而0.5μmol/L红景天苷作用可以显著上调OPG的表达水平。结论红景天苷可减轻LPS刺激后h PDLCs的细胞损伤,其机制可能通过调节与TLR4相关信号通路,降低炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6及与骨吸收相关因子RANKL、OPG的表达,从而抑制炎症反应和骨吸收。
- 刘彩宏王军强
- 关键词：红景天苷牙周膜细胞分泌表达
- 白藜芦醇减轻LPS诱导的牙周膜细胞损伤并抑制TLR4/NF-κB活化被引量：4
- 2017年
- 目的:探究白藜芦醇(RES)对脂多糖(LPS)诱导的人牙周膜细胞(hPDLCs)损伤的保护作用。方法:体外培养并鉴定hPDLCs,将培养的hPDLCs随机分为5组:对照组、LPS(10μg/ml)+RES(0、30、60、90μmol/L)组,MTT法检测各组细胞增殖能力,ELISA检测各组细胞分泌TNF-α/IL-6水平,PCR和Western blot检测各组细胞TLR4/NF-κB mRNA和蛋白表达。结果:分离培养的hPDLCs抗波丝蛋白表达阳性,抗角蛋白表达阴性。与对照组比,LPS处理后细胞增殖能力明显降低,细胞分泌TNF-α/IL-6水平和TLR4/NF-κB mRNA和蛋白表达明显增加;30~90μmol/L白藜芦醇预处理后,细胞增殖能力增加(P<0.05),细胞分泌TNF-α/IL-6水平、TLR4/NF-κB mRNA以及蛋白表达则下调(P<0.05),均呈现一定的浓度依赖性。结论:白藜芦醇可抑制TLR4/NF-κB活化并减轻LPS诱导的牙周膜细胞损伤。
- 呼海燕刘彩宏
- 关键词：白藜芦醇NF-ΚB
- 转化生长因子β1在骨形态发生蛋白2诱导的人牙周膜干细胞成骨分化中的作用被引量：6
- 2016年
- 目的:研究转化生长因子β1(TGF-β1)在骨形态发生蛋白2(BMP-2)诱导人牙周膜干细胞(h PDLSCs)成骨分化中的作用。方法:体外分离、培养h PDLSCs,经流式细胞术鉴定后随即分为4组:空白对照组、单纯BMP-2(50 ng/m L)诱导组、BMP-2+TGF-β1(20 ng/m L)联合处理组、BMP-2+LY364947(10μmol/L)联合处理组,分别于诱导培养后3、6、9、12 d时,用实时定量PCR检测各组细胞中成骨相关基因ALP、Col-1、Runx2、OCN mRNA的表达水平;诱导培养12 d后,用Western blot法检测各细胞中上述各成骨相关基因的蛋白表达水平;诱导培养28 d后,Von Kossa染色观察各组的矿化结节形成情况。结果:单纯BMP-2诱导能显著提高h PDLSCs中ALP、Col-1、Runx2、OCN mRNA及蛋白的表达水平(P<0.05),并能显著促进其矿化结节的形成。当在BMP-2诱导液中加入TGF-β1后,可显著促进BMP-2的上述效果(P<0.05);而加入LY364947后则会显著抑制BMP-2的上述效果。结论:TGF-β1可显著促进BMP-2诱导h PDLSCs的成骨分化。
- 刘彩宏王军强
- 关键词：人牙周膜干细胞成骨分化转化生长因子Β1
- 560例老年口腔修复问题的临床分析被引量：1
- 2011年
- 目的：探讨老年人口腔修复的特点。方法：分析560例老年修复治疗的病例资料。结果：本组老年人平均缺失牙齿8．5颗。21．5％的病例颌骨间无咬合接触关系，21．5％的病例修复时需咬合重建或咬合抬高，22．5％的病例修复前存在食物嵌塞。结论：活动艾齿是老年修复治疗的主要方法，咬合重建及防治食物嵌塞、颞下颌关节病是老年修复的特点。
- 刘彩宏
- 关键词：老年口腔
- 茶多酚抑制过氧化氢诱导的牙周膜细胞损伤被引量：9
- 2017年
- 目的探讨茶多酚(Tea polyphenols,TP)对过氧化氢(H2O2)诱导的牙周膜细胞损伤的保护作用及其机制。方法构建H2O2诱导牙周细胞损伤模型。细胞随机分为正常对照组、H2O2组、H2O2+TP组。MTT检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡。试剂盒检测各组细胞中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。Western blot检测细胞中caspase-3、caspase-12、Bcl-2和Bax的表达。Elisa检测细胞中IL-1β和IL-6的表达情况。结果 H2O2处理会降低牙周膜细胞的活性,并且浓度越高,细胞活性降低越明显。茶多酚可抑制在H2O2介导下牙周膜细胞的活性降低、凋亡升高,MDA含量增加,SOD活性降低,caspase-3、caspase-12和Bax的表达升高,Bcl-2的表达降低,以及IL-1β和IL-6的表达增高。结论茶多酚对H2O2诱导的牙周膜细胞损伤有明显的保护作用,其机制与减轻细胞氧化应激损伤、抑制线粒体凋亡通路和降低细胞炎性水平有关。
- 刘彩宏呼海燕
- 关键词：茶多酚H2O2牙周膜细胞
- 人参皂苷Rg1通过Akt/eNOS信号调控尼古丁胁迫下人牙周膜细胞的增殖和迁移被引量：2
- 2017年
- 目的 :探讨人参皂苷Rg1对尼古丁胁迫下的人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,HPDLCs)增殖和迁移的影响及分子机制。方法:采用组织块法分离培养HPDLCs,尼古丁(500 ng/m L)胁迫培养细胞7 d。第3天分别进行人参皂苷Rg1(0.01μmol/L)处理、人参皂苷Rg1与PI3K抑制剂LY294002(0.5μmol/L)共处理、人参皂苷Rg1与Akt抑制剂Tricirbine(5μmol/L)共处理、人参皂苷Rg1与e NOS抑制剂L-NAME(1 mmol/L)共处理(Rg1+LNAME组),持续处理至第7天。采用MTT法和Transwell法检测各处理组HPDLCs活力变化和细胞迁移率,并使用实时定量PCR与Western印迹法检测PI3K/Akt/e NOS信号蛋白变化,采用SPSS20.0软件包对数据进行统计学分析。结果:尼古丁抑制HPDLCs的增殖和迁移并显著上调PI3K表达,抑制Akt和e NOS表达;人参皂苷Rg1减缓尼古丁对细胞增殖和迁移抑制作用以及尼古丁对Akt和e NOS表达的抑制作用;Tricirbine与L-NAME衰减人参皂苷Rg1对尼古丁的抑制作用。结论:人参皂苷Rg1通过Akt/e NOS信号调控尼古丁胁迫下HPDLCs的增殖和迁移。
- 刘彩宏杜莉
- 关键词：牙周膜细胞尼古丁人参皂苷RG1
- siRNA沉默CPNE7基因表达抑制人牙周膜细胞的增殖及骨向分化被引量：3
- 2016年
- 目的 :探讨沉默CopineⅦ(CPNE7 si RNA)对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,h PDLs)增殖及骨向分化的作用及其可能机制。方法:体外分离培养h PDLs,采用脂质体转染法将沉默CPNE7的质粒p SUPER-CPNE7转染至h PDLs。采用RT-PCR和Western印迹法检测CPNE7的表达,ELISA检测CPNE7 si RNA对NF-κB活性的作用。给予10μmol/L NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代甲酸铵盐(pyrrolidinedithiocarbamic acid ammonium salt,PDTC)预处理h PDLs 30 min,采用CCK8检测CPNE7对细胞增殖的影响,ELISA检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,RT-PCR和Western印迹法检测RUNX2、OSX和OCN的表达。采用SPSS11.0软件包对数据进行统计学分析。结果:h PDLs经转染p SUPER-CPNE7,CPNE7表达下调,有显著性差异(P<0.05)。CPNE7 si RNA显著增强NF-κB的活性。与对照组(CON)相比,CPNE7 si RNA显著抑制h PDLs增殖,下调ALP活性及RUNX2、OSX和OCN的表达,给予PDTC促进h PDLs增殖,增强ALP活性并上调RUNX2、OSX和OCN的表达。结论 :CPNE7 si RNA通过NF-κB通路抑制h PDLs增殖和骨向分化。
- 刘彩宏呼海燕
- 关键词：人牙周膜细胞骨向分化
- 局部应用不同药物预防智齿拔除后干槽症的疗效对比被引量：6
- 2017年
- 目的观察不同方法预防智齿拔除后干槽症发生的临床疗效,为智齿拔除后干槽症的预防提供临床参考。方法以医院收治的下颌智齿拔除患者208例为研究对象,患牙均使用2%利多卡因麻醉,并采用联合挺拔方法拔除,随后将患者随机分为3组进行干槽症预防治疗:A组69例,采用明胶海绵局部填充治疗;B组71例,采用云南白药明胶海绵局部填充治疗;C组68例,采用米诺环素明胶海绵局部填充治疗。结果 A组干槽症的发生率为15.9%,B组为7.0%,C组为2.9%,3组间干槽症的发生率有显著差异(P<0.05)。A组发生干槽症患者的病情严重程度高于B、C组,而C组的病情严重程度轻于B组。结论云南白药和米诺环素明胶海绵局部填充可以有效减少干槽症的发生,且米诺环素明胶海绵局部填充可减轻换患者干槽症病情。
- 李诚刘彩宏
- 关键词：智齿拔除干槽症米诺环素
- 信号传导及转录激活因子1基因沉默促进人牙周膜细胞成骨细胞分化被引量：2
- 2016年
- 目的探讨信号传导及转录激活因子1(signal transducers and activators of transcription 1,STAT1)对人牙周膜细胞骨向分化的作用及其机制。方法采用酶消化法分离培养原代人牙周膜细胞,细菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激人牙周膜细胞,采用成骨分化培养基诱导人牙周膜细胞骨向分化。通过转染STAT1过表达载体或小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)实现STAT1基因过表达或基因表达沉默。采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性检测试剂盒和茜素红染色检测成骨分化。实时定量PCR方法检测STAT1,Ⅰ型胶原蛋白(collagen typeⅠα1,Col A1)和骨调素(osteopontin,OPN)的m RNA表达水平。Western blot方法检测STAT1和Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)的蛋白表达水平。结果 LPS炎性刺激诱导人牙周膜细胞STAT1高表达。STAT1过表达显著抑制ALP活性、骨质矿化、Runx2的核转移以及Col A1和OPN的表达水平。相反,STAT1基因沉默则显著促进ALP活性、骨质矿化、Runx2的核转移以及Col A1和OPN的表达水平。结论 STAT1基因沉默促进人牙周膜细胞成骨分化,其机制与促进Runx2核转移有关。
- 呼海燕刘彩宏
- 关键词：人牙周膜细胞成骨细胞分化
