傅正
- 作品数：15 被引量：60H指数：5
- 供职机构：天津医科大学基础医学院免疫学系更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 酪丝亮肽对人肝癌BEL-7402细胞钙稳态影响的实验研究被引量：6
- 2005年
- 目前寻找有效的药物仍是治疗肿瘤的关键环节之一.酪丝亮肽为中国新近研发并具有自主知识产权的三肽化合物.观察了酪丝亮肽的抗肝癌作用,并研究了其对肿瘤细胞钙稳态的影响,以初步探讨它的抗肿瘤作用机制.结果发现,酪丝亮肽能显著抑制人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤的生长,160μg/(kg·d)治疗组肿瘤生长抑制率可达41.34%,电子显微镜观察发现酪丝亮肽可引起移植瘤细胞的坏死和凋亡,细胞器线粒体和内质网损伤,并出现钙沉积.应用激光扫描共聚焦显微镜及流式细胞仪观察发现,10μg/mL酪丝亮肽在400s内可引起体外培养BEL-7402细胞胞浆钙离子浓度迅速升高,最高幅度可达239.13%;持续作用1h后BEL-7402胞浆钙离子维持在高水平,作用2h后胞浆钙离子浓度开始下降,4和24h时的胞浆钙离子水平均低于对照,相同剂量的药物对人正常肝细胞株Chang氏肝无明显影响;酪丝亮肽还可使体外培养的BEL-7402细胞线粒体跨膜电位明显下降,提示其抗肝癌机制可能是通过影响肿瘤细胞的钙稳态,诱导其发生坏死或凋亡.
- 傅正陆融李国立赵岚高卫真车绪春简序周春雷姚智
- 关键词：BEL-7402细胞钙稳态肝癌生长抑制率肝细胞株
- 三肽化合物酪丝缬肽对人肝癌裸鼠移植瘤基因表达谱的影响被引量：4
- 2006年
- 目的：观察小分子三肽化合物酪丝缬肽(tyroservatide,YSV)的抗肿瘤作用,分析YSV对肿瘤细胞基因表达情况的影响。方法：建立人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤模型,应用基因芯片技术分析YSV对人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤肿瘤组织基因表达的影响,应用RT-PCR方法验证相关基因的表达情况。结果：给药剂量为320μg·kg^(-1)·d^(-1)时,YSV能显著抑制裸鼠人肝癌BEL-7402移植瘤的生长,抑瘤率为52.37%,与生理盐水组比较均有统计学意义(P＜0.05)。YSV组与生理盐水组比较有781个基因存在统计学差异,其中52个基因与抑瘤效果密切相关,37个促进肿瘤增殖的基因表达下调,15个抑制肿瘤增殖的基因表达上调。RT-PCR检测证实YSV能够明显抑制肿瘤细胞癌基因Akt与上调抑癌基因PTEN的表达。结论：YSV具有显著的抗肿瘤活性,可以抑制肿瘤增殖相关基因的表达,增强抑制肿瘤生长相关基因的表达水平,以恢复它们之间的平衡关系,达到抗肿瘤细胞效应。
- 王松陆融朱智彤赵茜卢奕贾静傅正周春雷赵岚李会强李鸿钊姚智
- 关键词：试验性异种移植模型抗肿瘤试验基因表达调控肿瘤
- 酪丝亮肽荧光标记物的合成及其在肿瘤治疗靶点研究中的应用被引量：4
- 2008年
- 酪丝亮肽是一种具有抗肿瘤活性的小分子三肽,它可以诱导造成肝癌细胞发生凋亡坏死,从而杀伤肿瘤细胞,但是酪丝亮肽在肝癌细胞的亚细胞定位尚不十分明确.为了达到对酪丝亮肽进行示踪进而观察其亚细胞定位的目的,使用荧光物质(5(6)-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯,5(6)-TAMRASE)对酪丝亮肽进行了标记,应用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、毛细管电泳和荧光分光光度法对标记酪丝亮肽进行纯化和鉴定.并在激光扫描共聚焦显微镜下观察了荧光标记酪丝亮肽在人肝癌BEL-7402细胞中的分布.结果显示,合成的酪丝亮肽荧光标记物性质稳定,标记的酪丝亮肽在人肝癌BEL-7402细胞的胞浆中呈聚集分布.
- 简序傅正张燕玲韩丽霞朱志峰徐琼王莉周春雷石琳熙刘俊燕陆融姚智
- 关键词：酪丝亮肽肝癌荧光标记激光扫描共聚焦显微镜
- 四肽化合物CM ST1对大鼠佐剂性关节炎治疗作用的实验研究被引量：2
- 2005年
- 包乐媛陆融李国立王松傅正贾静高文远赵琳姚智
- 关键词：佐剂性关节炎淋巴细胞增殖白介素-1Β肿瘤坏死因子-Α
- 酪丝亮肽对人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤的抑制作用被引量：7
- 2005年
- 目的:观察酪丝亮肽对人肝癌BEL-7402的抑制作用,并分析其可能机制。方法:制备裸鼠移植瘤模型,随机分为生理盐水、氨基酸混合物、环磷酰胺、酪丝亮肽高低剂量等5组,每组12只,观察酪丝亮肽对人肝癌BEL-7402肿瘤组织坏死和凋亡的影响;电镜观察其对肿瘤细胞超微结构改变;流式细胞技术分析其对细胞周期及细胞凋亡率的影响。结果:酪丝亮肽能够诱导肿瘤细胞坏死和凋亡、细胞周期阻抑、显著抑制肿瘤的生长,给药剂量为80μg.kg-1.d-1和160μg.kg-1.d-1时,肿瘤抑制率分别为42%与58%。结论:酪丝亮肽可以显著抑制人肝癌BEL-7402的生长,作用机制与促进肿瘤细胞的凋亡和坏死有关。
- 王莉陆融王犁明赵琳傅正王松李会强杨海贤章明放金孟珏姚智
- 关键词：细胞凋亡酪丝亮肽
- 基因芯片分析三肽化合物酪丝亮肽对人肝癌基因表达谱的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:观察三肽化合物酪丝亮肽(YSL)的抗肿瘤作用,分析酪丝亮肽对肿瘤细胞基因表达情况的影响。方法:建立人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤模型,应用基因芯片技术分析酪丝亮肽对人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤肿瘤组织基因表达的影响,应用RT-PCR方法验证相关基因的表达情况。结果:给药剂量为160μg(/kg·d)时,酪丝亮肽能显著抑制裸鼠人肝癌BEL-7402移植瘤的生长,抑瘤率为41.34%,与生理盐水组比较均有统计学意义(P<0.05)。酪丝亮肽组与生理盐水组比较有33个基因变化倍数大于1倍以上,21个促进肿瘤增殖的基因表达下调,12个抑制肿瘤增殖的基因表达上调。结论:酪丝亮肽具有显著的抗肿瘤活性,可能是通过影响肿瘤细胞的PI3K信号转导通路,并籍此影响该通路的下游事件,损伤肿瘤细胞线粒体,诱导凋亡。
- 孙亚军傅正朱志峰王莉贾静车绪春陆融林刚姚智
- 关键词：酪丝亮肽裸鼠基因芯片PI3K
- 人脂肪源性间充质干细胞的分离培养和鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的:分离培养并鉴定人脂肪源性间充质干细胞(hAD-MSC)。方法:采用贴壁法从人脂肪组织分离获得hAD-MSC,并从表面分子表达和定向分化两个方面进行鉴定。结果:成功从脂肪组织中分离获得间充质干细胞,该群细胞贴壁生长,形态类似成纤维细胞样;具有较强的体外增殖能力和自我更新能力;一致性好,纯度高,99%的细胞阳性表达CD105、CD90、CD13、CD44分子;CD117、CD34、CD45和HLA-DR阴性表达,阳性率低于2%;可向脂肪和成骨细胞定向分化。结论:分离所得细胞符合间充质干细胞基本特点,可确定为hAD-MSC。
- 赵辉吕军强贾静王松傅正车绪春陆融林刚姚智
- 关键词：定向分化
- 酪丝缬肽对裸小鼠人肝癌BEL-7402移植瘤的抑制作用被引量：5
- 2006年
- 目的观察酪丝缬肽对裸小鼠人肝癌BEL-7402移植瘤的抑瘤作用,并初步探讨其可能的作用机制。方法通过动物模型观察酪丝缬肽对裸小鼠人肝癌BEL-7402移植瘤肿瘤重量及体积的影响；以电镜观察肿瘤细胞超微结构的改变；以免疫组化法观察瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达；以利用TUNEL法检测瘤组织细胞的凋亡情况。结果给药剂量为80μg·kg^(-1)·d^(-1)和160μg·kg^(-1)·d^(-1)时,酪丝缬肽可以显著抑制裸小鼠BEL-7402移植瘤的生长,抑瘤率分别为64．02%和66．27%,与生理盐水及相应氨基酸混合物组比较,差异均有统计学意义(P＜0．05)。酪丝缬肽可引起肿瘤细胞超微结构改变,导致肿瘤细胞广泛坏死和凋亡。酪丝缬肽给药组与生理盐水组比较,肿瘤组织细胞的PCNA表达明显降低,凋亡细胞明显增多。结论酪丝缬肽可显著抑制人肝癌BEL-7402细胞在裸小鼠体内的生长,抑制肿瘤细胞增殖,促进瘤细胞凋亡。
- 贾静陆融傅正邱爽石琳熙简序刘俊燕李会强车绪春姚智
- 关键词：酪丝缬肽裸小鼠移植瘤
- 乳腺癌CYP1B1的表达对紫杉醇耐药性的影响被引量：3
- 2012年
- 目的:探讨乳腺癌细胞CYP1B1表达与紫杉醇耐药产生的相关性。方法:以乳腺癌细胞系MCF-7为研究对象,经TCDD诱导MCF-7表达CYP1B1,观察CYP1B1表达后对紫杉醇药物的细胞毒效应的影响。将紫杉醇联合CYP1B1的拮抗剂ANF使用,观察ANF是否可逆转CYP1B1对紫杉醇的耐药作用。采用RT-PCR测定诱导后CYP1B1 mRNA水平,采用细胞免疫化学染色和蛋白印迹技术测定诱导后CYP1B1蛋白水平,MTS比色法测定紫杉醇对细胞增殖的抑制强度。结果:TCDD可诱导MCF-7细胞表达CYP1B1,其mRNA和蛋白表达水平与TCDD浓度具有明显的剂量依赖性(P<0.05);而单独紫杉醇不能诱导MCF-7细胞表达CYP1B1。当MCF-7细胞经TCDD诱导表达CYP1B1后,紫杉醇浓度在0.01～0.1μg/mL时,紫杉醇对MCF-7细胞的抑制率与对照组相比明显下降(P<0.05)。使用CYP1B1的特异性拮抗剂ANF后,MCF-7细胞对紫杉醇的敏感性升高,细胞抑制率与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:CYP1B1表达后可导致细胞产生对紫杉醇耐药。
- 任杰李迺昶李晓蕾李会强傅正朱志峰
- 关键词：人乳腺癌细胞MCF-7紫杉醇耐药
- 应用中空纤维法评价酪丝缬肽对肝癌的抑制作用被引量：1
- 2008年
- 目的观察三肽化合物酪丝缬肽（YSV）的抗肝癌作用。方法应用新型四氮唑盐（MTS）法，检测YSV对BEL-7402、SMMC-7721、Hep3B、HepG2和SK-HEP-1人肝癌细胞体外生长的抑制作用；应用中空纤维管皮下移植模型，进一步观察YSV对这5种人肝癌细胞体内生长的影响。结果0．1～1．6mg／ml的YSV能够明显抑制BEL-7402、SMMC-7721、Hep3B、HepG2和SK—HEP-1人肝癌细胞的体外生长，YSV组的吸光度（A）值与相应阴性对照组相比，差异均有统计学意义（P〈0．05），其中YSV对人肝癌细胞BEL-7402的抑制作用最强，1．6mg／ml的YSV抑制率达63．3％。160μg·k^-1·d^-1和320μg·k^-1·d^-1的YSV均能够明显抑制BEL-7402、SMMC-7721、Hep3B、HepG2和SK—HEP-1人肝癌细胞的体内生长，YSV组的A值与相应生理盐水组相比，差异均有统计学意义（P〈0．05）。YSV对人肝癌细胞BEL-7402的抑制作用最强，320μg·k^-1·d^-1 YSV的抑制率为53．1％。结论中空纤维法可以快速、准确地观察药物对不同肝癌细胞株体内生长的抑制作用，为YSV的临床应用提供了实验指导和可靠证据。
- 石琳熙陆融王莉周春雷徐琼朱志峰马睿张华俐贾静傅正姚智
- 关键词：肝细胞性肝癌
