何小鹃
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一株健康人γδT细胞克隆的建立及鉴定被引量：3
- 2009年
- 目的建立健康人γδT细胞克隆并进行鉴定。方法以60Co照射的同种异体PBMC作为饲养细胞,以有限稀释法对经过阳性分选的γδT细胞进行克隆化。用流式细胞术及分子生物学检测鉴定所获克隆,以MTT掺入法对所获克隆进行增殖实验检测。结果获得一株γδT细胞单克隆,为Vγ9Vδ2亚型,CD4分子和CD8分子表达均为阴性。进一步的研究发现表位肽EP6不仅能够特异性结合γδT细胞单克隆,而且能够促进其增殖。结论成功建立了健康人外周血γδT细胞克隆,为深入研究γδT细胞抗原识别机制、亚群及功能奠定了坚实的基础。
- 何小鹃康宁陈慧崔莲仙何维
- 关键词：ΓΔT细胞克隆
- 人类γδT细胞抗原表位肽的鉴定和健康人γδT细胞克隆的建立及鉴定
- 尽管γδT细胞在机体抗感染、抗肿瘤的固有免疫应答中发挥重要的作用,但是目前所发现的配体抗原仅限于十余种,根本无法与承担特异性细胞免疫应答的αβT细胞可识别数以亿万计的抗原表位肽相比。此外,有关γδT细胞的表位蛋白多肽则尚...
- 何小鹃
- 关键词：过继免疫治疗
- 文献传递
- 具有生物学活性的hMSH2蛋白在昆虫sf9细胞中的表达被引量：2
- 2008年
- 目的表达具有生物活性的hMSH2蛋白。方法用搭桥PCR获得hMSH2全长基因,构建pAcGP67B-hMSH2重组质粒,与AcNPV昆虫病毒DNA共转染昆虫细胞sf9,表达hMSH2蛋白(同时构建pET30a-hMSH2重组质粒,用大肠杆菌表达hMSH2蛋白);Western blot鉴定hMSH2蛋白;ELISA,流式细胞仪检测蛋白与OT3肽及TCRγδ的结合特异性;检测细胞增殖(MTT法)和细胞因子分泌,观察重组蛋白体外活化γδT细胞的生物学功能。结果克隆到正确的hMSH2基因,并将其插入到表达载体pAcGP67B和pET30a中的正确位置。经Western blot鉴定获得了hMSH2蛋白。用昆虫病毒表达载体系统表达的hMSH2蛋白能与其探针肽OT3及TCRγδ特异性结合,并能在体外刺激γδ细胞增殖及分泌IFN-γ,其活性更优于原核表达的蛋白。结论成功利用昆虫病毒载体表达系统得到了比原核大肠杆菌表达系统更具生物活性的hMSH2蛋白。
- 陈慧李峥何小鹃崔莲仙何维
