于群
- 作品数：10 被引量：14H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金国家自然科学基金黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 宿主细胞erp57基因敲除抑制流感病毒复制的研究被引量：1
- 2016年
- ERp57是细胞内质网内的蛋白二硫键异构酶家族成员,可以催化蛋白二硫键的合成以促进蛋白折叠。为研究erp57基因敲除对流感病毒复制的影响,本研究通过CRISPR/Cas9技术构建了erp57基因的向导RNA(g RNA)敲除质粒p GEM-erp57g RNA,并将其与p Cas9-EGFP共转染至人肺腺癌细胞A549中,采用流式分选及限制性稀释的方法筛选单细胞克隆株,通过靶基因组测序及western blot检测,筛选获得了erp57基因敲除的A549细胞系。erp57基因敲除细胞系与野生型细胞生长动力学无显著差异。此外,将H1N1亚型流感病毒分别感染野生型和erp57基因敲除细胞系以测定erp57基因敲除对流感病毒复制水平的影响。结果显示流感病毒在erp57基因敲除细胞中的复制显著地受到了抑制,表明ERp57是流感病毒复制过程中的一个关键蛋白。本研究为开发新的抗流感病毒手段提供了相关的实验依据。
- 胡丹王斌冷有龙王玉杰于群郑永辉范春玲
- 关键词：基因敲除流感病毒
- 鸡TOLL样受体3胞外区基因克隆、表达及多克隆抗体的制备
- 目的:研究鸡TOLL样受体3胞外区基因克隆、表达及多克隆抗体的制备。方法:采用Trizol法提取DF-1细胞总RNA,反转录成cDNA,根据GenBank上公布的chTLR3基因序列设计特异性引物,克隆chTLR3胞外区...
- 张瑞莉王杲强孟巍于群潘龙杨桂君
- 关键词：TOLL样受体基因克隆抗体制备
- 文献传递
- 中药复方金银花制剂对NDV感染雏鸡外周血液T、B淋巴细胞数量变化的影响
- 目的 本试验在前期筛选出有效抗新城疫病毒(NDV)中药复方的基础上,研究该中药复方制剂对人工感染NDV雏鸡外周血液T、B淋巴细胞数量变化影响,探讨该中药复方制剂抗NDV机理,为进一步研究开发更有效地防治新城疫的中药提供科...
- 张瑞莉于群梁尧葛铭
- 关键词：雏鸡外周血液
- 黄芪多糖对雏鸡黏膜sIgA含量的影响研究被引量：7
- 2014年
- 为研究黄芪多糖(APS)对雏鸡黏膜分泌型Ig A(s Ig A)分泌的影响,将240只7日龄雏鸡随机分为4组:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和C组,其中,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组雏鸡于7日龄以灌服方式分别给予80 mg/m L、40 mg/m L、20 mg/m L APS液各0.2 m L,1次/d,连续5 d,C组雏鸡以相同方式给予相同剂量的生理盐水,于14日龄采取滴口方式进行鸡传染性法氏囊病活疫苗免疫,在首次给药后1、3、5、7 d以及疫苗免疫后7、14、21、28、35、42、49 d,每组随机抽取5只雏鸡,收集泪液后,心脏采血处死,快速收集气管液、肠液,采用间接ELISA检测s Ig A含量。结果显示,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组雏鸡s Ig A含量与C组差异显著(P<0.05或P<0.01),泪液中s Ig A含量Ⅰ组雏鸡相对较高,气管液、肠液中s Ig A含量Ⅲ组雏鸡相对较高,提示APS对雏鸡黏膜s Ig A分泌有显著的促进作用。
- 刘瑞于群李莹赵霞张瑞莉葛铭
- 关键词：黄芪多糖雏鸡黏膜免疫SIGA
- 整合埃博拉病毒囊膜蛋白的伪病毒的构建
- 2015年
- 埃博拉病毒(EBOV)是一种能够引起人类和灵长类动物的烈性出血热的病原体,致死率高达90%。对该病毒活病毒的操作仅能够在生物安全4级实验室进行,高级别的生物安全要求限制了病毒的研究。为建立一个能够表达EBOV囊膜蛋白(GP)的伪病毒,本研究利用表达GP基因的重组质粒,与囊膜蛋白缺失、表达绿色荧光蛋白(GFP)的人免疫缺陷病病毒1型(HIV-1)基因组的重组质粒共转染人胚胎肾细胞(293T),以包装整合含有囊膜蛋白的伪型EBOV。结果表明,EBOV GP蛋白能够正确组装至HIV-1病毒表面;利用组装的伪型病毒粒子感染293T、人宫颈癌细胞(Hela)、人骨肉瘤细胞(Ghost)和非洲绿猴肾细胞(Vero)几种细胞系,结果显示在不同细胞系中均可检测到GFP蛋白的表达,表明组装的伪型病毒可以模拟野生型病毒感染相关细胞。本研究构建的伪型EBOV作为活病毒的替代工具,为研究EBOV的感染机制及中和抗体的筛选提供了一个良好的平台。
- 王玉杰王斌时静胡丹于群郑永辉
- 关键词：埃博拉病毒囊膜蛋白
- 金银花复方制剂对新城疫病毒感染雏鸡外周血液免疫学变化的影响被引量：2
- 2014年
- 为研究金银花复方制剂对新城疫病毒(NDV)感染雏鸡外周血液免疫学变化的影响,采用免疫荧光试验、流式细胞术、间接ELISA法和放射免疫法对NDV感染雏鸡、金银花复方制剂治疗雏鸡的外周血液淋巴细胞数量、免疫球蛋白及细胞因子含量进行检测。结果显示,雏鸡感染NDV后,其外周血液CD4+、CD8+T淋巴细胞和B淋巴细胞数量及IgG、IgM、白细胞介素(IL-2)含量均较未感染雏鸡明显降低,γ-干扰素(IFN-γ)含量较未感染雏鸡明显升高,提示NDV感染能够引起雏鸡外周血液免疫功能紊乱;金银花复方制剂能够显著提高感染雏鸡外周血液CD4+T淋巴细胞和B淋巴细胞数量及IgG、IgM、IL-2含量,降低IFN-γ含量,表明该复方制剂能够改善NDV感染雏鸡外周血液的免疫功能。
- 张瑞莉于群梁尧孟巍刘瑞葛铭
- 关键词：新城疫病毒雏鸡
- 新城疫病毒感染鸡胚成纤维细胞TLR7 mRNA表达的动态变化
- ：检测鸡胚成纤维细胞(CEF)感染新城疫病毒(NDV)后,其TOLL样受体7(chTLR7)基因表达动态变化,为研究chTLR7在抗病毒过程中发挥的作用及生物学意义提供科学的实验依据. 材料方法：将培养至单层的CE...
- 张瑞莉孟巍王杲强李广兴于群郑世民
- 关键词：新城疫病毒感染成纤维细胞TOLL样受体7微小核糖核酸
- 中药复方金银花制剂对NDV感染雏鸡外周血液免疫学变化的影响
- 本试验在前期筛选出有效抗NDV中药复方的基础上,研究该中药复方制剂对人工感染新城疫病毒(NDV)雏鸡外周血液T、B淋巴细胞数量、免疫球蛋白IgG和IgM以及细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)与白介素-2(IL-2)含量变化...
- 张瑞莉于群梁尧孟巍刘瑞葛铭
- 关键词：雏鸡新城疫病毒感染外周血液免疫学变化
- 文献传递
- 感染传染性法氏囊病病毒的DF-1细胞中chTLR3表达的动态变化被引量：3
- 2014年
- 为研究鸡Toll样受体3(chTLR3)基因在传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染DF-1细胞过程中的表达情况,用3种不同毒力的IBDV感染DF-1细胞,采用实时荧光定量PCR法以及间接免疫荧光法对细胞内chTLR3基因的表达情况进行了检测。结果显示,DF-1细胞感染IBDV标准株后,其chTLR3mRNA的表达量呈增长趋势,感染后第48小时mRNA表达量达到峰值(P<0.01),之后逐渐下降;DF-1细胞分别感染IBDV弱毒疫苗株与分离株后,其chTLR3mRNA表达量均出现先上升后下降的趋势,但其表达量低于标准株(P<0.01)。采用间接免疫荧光法检测的chTLR3蛋白的表达变化规律与其基因的表达变化规律相同。结果证实,chTLR3参与IBDV感染DF-1细胞的过程;IBDV的毒力可影响chTLR3的表达。
- 王成成王杲强葛铭于群潘龙张瑞莉
- 关键词：传染性法氏囊病病毒
- 鸡TLR3胞外区基因克隆、表达及多克隆抗体的制备被引量：2
- 2013年
- 为了研究Toll样受体3(chTLR3)在病毒感染过程中的作用,试验采用RT-PCR技术从雏鸡法氏囊组织中扩增chTLR3胞外区部分基因片段(大小为1 317 bp),将其克隆于表达载体pET30a(+)中,经酶切鉴定后转化大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞,然后进行IPTG诱导表达;用纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔,获得抗血清;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫印迹(Western-blot)及体外瞬时转染方法进行检测。结果表明:该基因片段得到较高表达,融合蛋白的分子质量约为55.8 ku,主要以包涵体形式存在,试验制备的兔抗chTLR3抗血清效价在1∶32 768以上,具有良好的免疫反应特性。
- 王杲强葛铭于群李广兴张瑞莉
- 关键词：基因表达多克隆抗体
