魏甜甜
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：青岛农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 大型肉鸡养殖场中死淘鸡病原菌分析被引量：5
- 2012年
- 本试验通过对山东某地区8个大型集约化肉鸡养殖场的27只死淘鸡进行剖检、电镜观察、病原菌分离鉴定,明确了细菌混合感染为其显著特征,此地区优势致病菌依次为粪肠球菌、浅绿气球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、嗜水气单胞菌。用专利产品(专利号:ZL 2009 2 0253251.5)吸管药敏检测盒对死淘鸡病变组织的细菌混合感染进行药敏检测,对照传统的药敏检测结果,表明吸管药敏检测盒具有准确的原位药敏检测的特点和优势,有助于了解肉鸡养殖场潜在的致病因素、提供可行的预防方案。
- 蔡亚娜白华齐静魏甜甜单虎刘玉庆胡明
- 关键词：病原菌
- 用线性梯度平板准确测定药物敏感性和分离抗药性菌株被引量：4
- 2011年
- 菌群在药物的最低抑菌浓度附近的动力学过程是抗生素药理学研究的核心问题.建立一种能确定精确的MIC且又能准确分离抗药性菌株的方法,是目前临床对药敏实验新的要求.根据Fick扩散定律制备了线性梯度平板:将15mL含适当浓度恩诺沙星的琼脂培养基在9cm培养皿中倾斜凝固,刚好覆盖整个平板底面,然后水平放置,再在其上层加入同样体积的无药琼脂培养基,凝固12h后,药物浓度达到扩散平衡而呈均匀连续线性梯度.通过实测验证药物浓度在平板表面呈线性梯度分布.将待检E.coli菌群均匀涂布在梯度平板上,培养12h后,随恩诺沙星浓度提高依次形成连续密集小菌落区和离散大菌落区,根据两区域的分界线可以确定菌群自然形成的真实的MIC,与常规药敏实验方法测定结果一致.大菌落重新涂布高梯度平板,分界线显著上升,并检测出抗药性基因突变,表明该方法很容易筛选出菌群中的抗药性菌株.梯度平板可以方便地呈现整个菌群在MIC附近的动力学过程和遗传生理变化,并预警该抗生素使用后可能出现的抗药性,从而指导临床抗菌药物的选择和使用.
- 刘玉庆李靖冉杜加法胡明白华齐静高超魏甜甜苏红金健玲高培基
- 关键词：E.COLI恩诺沙星MIC
- 鸡咽部混合菌群16S rDNA序列分析方法的建立被引量：2
- 2011年
- 通过优化鸡咽拭子预处理方法、储存条件、提取咽拭子标本中的细菌总DNA条件、细菌16SrDNA保守区通用引物设计及PCR扩增条件,成功建立了鸡咽部菌群16SrDNA序列分析方法,并初步分析了健康鸡的咽部菌群种类和组成,同时发现鸡咽部菌群中未知细菌和未可培养细菌所占的比例很大,需要深入研究其对鸡呼吸道疾病的影响。
- 蔡亚娜刘玉庆胡明魏甜甜白华高超
- 关键词：混合菌群RDNA
- 利用重建祖先基因方法研究连续诱导培养大肠杆菌对恩诺沙星抗药性突变的规律
- 2012年
- 目的研究大肠杆菌对氟喹诺酮抗药性突变的规律及基因型与表型的对应关系。方法以质控菌株Escherichia coli ATCC 25922为初始菌株,恩诺沙星浓度由0.031 25μg/mL增加到128μg/mL,分步诱导得到13株稳定的抗药性菌株,检测氟喹诺酮靶酶基因gyrA、gyrB和parC、parE的序列及其突变位点,检测恩诺沙星的最低抑菌浓度(MIC)及抑制外排泵后MIC,分析抗药性表型与基因型、蛋白结构、外排泵及生化特性的关系。结果低浓度氟喹诺酮可诱导GyrA的Ser83-Leu和ParC的Glu84-Lys单一位点突变,致低水平抗药性,而Ser83-Leu逐步与Asp87-Gly、Glu84-Lys组合,导致氟喹诺酮突变决定区突变位点氨基酸的极性、空间位阻变化,影响靶蛋白与DNA和恩诺沙星的结合,可致高水平抗药性。外排泵与基因突变共同作用,使细菌耐受逐步升高药物浓度,M IC基本平行高出培养浓度1倍。结论增加恩诺沙星的使用剂量,能诱导高抗菌株产生,恩诺沙星抗药性表型与基因型具有对应关系和规律性变化。
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- 关键词：大肠杆菌连续传代点突变
