高越 作品数:82 被引量:362 H指数:12 供职机构: 浙江大学医学院 更多>> 发文基金: 浙江省医药卫生科学研究基金 浙江省中医药科技计划项目 杭州市卫生科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 社会学 自动化与计算机技术 历史地理 更多>>
兔关节软骨细胞的体外培养及凋亡相关基因在传代细胞中的表达 被引量:1 2017年 目的验证体外Ⅱ型胶原酶消化法培养兔软骨细胞的可行性,探讨凋亡及抗凋亡基因在软骨细胞传代中的变化,寻找关节软骨退变老化研究的最适宜靶细胞。方法在无菌条件下取6周龄新西兰大白兔双侧膝关节软骨,采用Ⅱ型胶原酶消化并机械吹打的方法分离关节软骨细胞并进行原代、传代培养;形态学观察时采用甲苯胺蓝染色法对关节软骨细胞进行鉴定;RT-PCR法检测P0~P4代软骨细胞烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)、信息沉默因子1(Sirt1)、p53、Bax基因的mRNA相对表达量,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各代关节软骨细胞增殖情况。结果显微镜下观察兔原代软骨细胞大多呈透亮椭圆形、短梭形、多角形特征,72h全部贴壁生长。甲苯胺蓝染色显示培养的软骨细胞细胞质染成浅蓝色,细胞核染成深蓝色;前3代软骨细胞表型稳定,增殖力良好;连续培养至P4代后,绝大部分细胞变为长梭形和不规则形状。随着软骨细胞的传代,NAMPT的表达量逐渐下调。与P0代软骨细胞相比,Sirt1的表达量在P1代细胞中明显上调,在P2代细胞急剧下降至P0代以下,在P3~P4代细胞中Sirt1的表达量逐渐下调。凋亡基因p 53和Ba x的表达量随着软骨细胞的传代而上调。前3代软骨细胞增殖差异无统计学意义(均P>0.05);在培养到第4~7天时,P1~P3代与P4代软骨细胞增殖差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用体外Ⅱ型胶原酶消化法培养兔关节软骨细胞是切实可行的。随着软骨细胞的传代,抗凋亡基因NAMPT、Sirt1的表达逐渐下调,凋亡基因p53、Bax的表达逐渐上调。P1~P3代关节软骨细胞作为研究关节软骨凋亡的细胞体系是合适的。 周叶 高越 王晓楠 朱立 厉蓓关键词:软骨细胞 体外培养 传代 一种用于失禁性皮炎的治疗装置 本实用新型公开了一种用于失禁性皮炎的治疗装置,包括底板和支撑件,底板水平分布,支撑件竖直设置在底板的顶面中心位置处,支撑件的顶端安装有烘烤机构,支撑件的两侧均固定有支撑块,支撑块的顶面且靠近支撑件的一端设有保暖套,保暖套... 刘素贞 高越 李益民 王晓楠 孔利萍 陈美红 包红霞文献传递 牛膝多糖对硝普钠诱导的兔关节软骨细胞凋亡的影响及机制研究 被引量:7 2018年 目的研究牛膝多糖(ABPS)对硝普钠诱导的兔软骨细胞凋亡的影响及可能机制。方法取新西兰白兔膝关节软骨建立兔软骨细胞体系,分别用白芦藜醇、尼克酰胺及不同浓度ABPS(200、300、400μg/ml)处理经硝普钠诱导凋亡后的P3代软骨细胞。采用流式细胞仪检测细胞凋亡率。采用RT-PCR法检测烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)、信息沉默因子1(Sirt1)、p53和Bax m RNA表达水平。结果与硝普钠组比较,白芦藜醇组、ABPS各组软骨细胞凋亡率均明显下降(均P<0.05),而尼克酰胺组软骨细胞凋亡率明显上升(P>0.05)。与ABPS 200μg/ml组比较,ABPS 300μg/ml组及ABPS 400μg/ml组软骨细胞凋亡率明显下降(均P<0.05)。ABPS可上调抗凋亡基因NAMPT、Sirt1 m RNA表达,同时使凋亡基因p 53、Ba x m RNA表达下调,并且浓度300μg/ml时效果最明显。结论 ABPS可能通过激活NAMPT、Sirt1来抑制p38信号通路下游的关键基因p53,对软骨细胞凋亡起保护作用。 周叶 高越 王晓楠 朱立 厉蓓关键词:软骨细胞 硝普钠 凋亡 牛膝多糖 "三师共管模式"在全科住院医师规范化培训中的应用探索 被引量:20 2020年 导师制被逐步应用于住院医师规范化培训的教学管理,现行的导师制基本是基于“一对一”导师制、“双师”共管制,而全科医生的培养需要来自综合医院的全科师资、专科师资及来自社区实践基地的师资共同完成,基于此提出“三师共管模式”,即全科导师、专科导师、社区实践基地导师共管的教学管理新模式。实践证明开展以“全科导师”为中心的“三师共管”教学管理新模式可提高专科、社区实践基地导师的积极性,激发其责任心,各导师之间取长补短,优势互补,可提高整体全科师资水平,从而保障全科住院医师规范化培训质量。 厉蓓 高越 王晓楠 周叶 于晓红 高虹霞关键词:全科医学 导师制 住院医师规范化培训 pH依赖-时控型大黄素结肠定位微丸的药动学研究 2022年 目的:分析pH依赖-时控型大黄素微丸在大鼠体内的药动学过程。方法:采用HPLC法研究pH依赖-时控型大黄素微丸在SD大鼠体内的药动学行为。结果:主要药动学参数:大黄素溶液组:T_(1/2)(0.85±0.32)h、T_(max)(1.00±0.01)h、MRT_(0→∞)(2.71±0.20)h、CL(4.84±0.41)L/(h·kg);pH依赖-时控型大黄素微丸组:T_(1/2)(8.01±2.31)h、T_(max)(7.00±0.01)h、MRT_(0→∞)(16.42±3.19)h^(-1)、CL(4.01±0.85)L/(h·kg)。结论:制备的pH依赖-时控型大黄素微丸具有缓释特性,延长了血中滞留时间,药效持久,具有结肠定位释药特性,为后续结肠肿瘤治疗提供实验参考。 叶晓莉 高越 宋清 陈玲 吴梅君 王丛瑶 王彬辉关键词:大黄素 微丸 药动学 AGEs对人主动脉内皮细胞线粒体动力学的影响及机制研究 章顺荣 高越 侯绪伟 封菲 周叶 陈金友 近年来线粒体动力学在心血管疾病中的作用日益引起人们的重视。该研究旨在明确致动脉粥样硬化的晚期糖基化终产物(AGEs)可否引起人主动脉内皮细胞的线粒体动力学变化,并对其内在机制作一初步探索。研究采用不同浓度的AGEs干预体...关键词:关键词:心血管疾病 急性有机磷农药中毒患者外周血淋巴细胞CD分子的变化及意义 被引量:12 2003年 高越 何建如 许国根 缪群关键词:有机磷农药 中毒患者 血淋巴细胞 CD分子 社区心血管疾病患者心理状态调查与心理保健对策 被引量:1 2016年 目的:调查分析社区心血管疾病患者心理状态,探讨有效心理保健对策。方法:随机选择出社区200例心血管疾病患者为对象,采用发放及填写自制问卷的形式,详细分析其心理状态。结果:社区总体心血管疾病患者的心理状态不容乐观,其中较大部分患者均存在一定的心理问题,约有67.5%的患者属于轻、中度问题,17%的患者属重度问题。结论:心血管疾病患者较容易产生负面情绪,发生心理问题。故社区应积极开展一系列的心理保健对策,促进社区心血管疾病患者生活质量的提高,帮助其尽早康复。 陈金友 高越 王晓楠关键词:心血管疾病 心理状态 心理保健 补肾益气方对哮喘大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴及CD4^+CD25^+调节性T细胞功能的影响 被引量:13 2020年 目的通过观察哮喘大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴与CD4^+CD25^+调节性T细胞(Regulatory T cells,Tregs)功能的改变,探讨补肾益气方对哮喘的干预机制。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、布地奈德组、低剂量中药组、中剂量中药组、高剂量中药组,每组10只。采用卵蛋白致敏并激发制备哮喘模型,中药组采用相应剂量药物灌胃给药,西医治疗组采用布地奈德雾化吸入。最后1次激发24 h后,采用Buxco有创肺功能仪检测气道阻力;HE染色观察肺组织病理形态学改变;Bio-Plex悬液芯片技术检测血清、BALF中细胞因子水平;流式细胞术检测BALF中Tregs比例;ELISA法测定血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)水平;采用Real time-PCR法检测下丘脑促肾上腺激素释放激素(CRH)mRNA的表达。结果与正常组比较,哮喘组气道阻力及气道炎症显著增加(P<0.05);BALF中Tregs比例明显下降(P<0.05);血清及BALF中IL-10水平显著下降(P<0.05);血浆中CORT、ACTH水平明显下降(P<0.05);下丘脑CRH mRNA表达水平无明显变化(P>0.05)。与哮喘组比较,低、中、高剂量中药组气道阻力和气道炎症明显减轻(P<0.05);BALF中Tregs比例显著增加(P<0.05),并增加血清中IL-10水平(P<0.05);血浆中CORT、ACTH水平明显升高(P<0.05);下丘脑CRH mRNA表达水平明显增加(P<0.05)。结论哮喘大鼠存在下丘脑-垂体-肾上腺轴与Tregs功能紊乱,补肾益气方可显著改善哮喘大鼠气道炎症和气道高反应性,可能与其改善HPA轴与调节Treg细胞功能,增加内源性皮质酮,增加血清IL-10分泌有关。 厉蓓 高越 金华良 罗清莉 吴金峰 张红英 刘宝君 董竞成关键词:淫羊藿 下丘脑-垂体-肾上腺轴 调节性T细胞 复方倍他米松治疗高龄慢性肾功能不全合并急性痛风的疗效观察 目的:观察复方倍他米松治疗高龄慢性肾功能不全氮质血症合并急性痛风的临床疗效。方法:本院治疗的60例高龄(≥80岁)慢性肾功能不全氮质血症合并痛风急性发作的患者,随机分为治疗组和对照组,每组均为30例。两组均口服双氯芬酸钠... 周叶 洪鸣鸣 高越 王晓楠 陈雯关键词:高龄 慢性肾功能不全 氮质血症 痛风急性发作 文献传递