高巧艳
- 作品数：20 被引量：61H指数：4
- 供职机构：宁波大学更多>>
- 发文基金：宁波市科技创新团队项目国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人白细胞介素37的二级结构及B细胞表位预测被引量：4
- 2014年
- 目的:预测人IL-37b蛋白质的二级结构及B细胞抗原表位。方法:以IL-37b蛋白质的氨基酸序列为基础,应用ProScale、Bcepred服务器,分析人IL-37b亲水性、柔韧性、可及性和抗原性指数,并结合二级结构特征,预测IL-37b的B细胞表位。结果:IL-37b的二级结构主要由β折叠(31.65%)、无规则卷曲(52.75%)、α螺旋(8.26%)和β转角(7.34%)组成。其B细胞表位可能位于第21-27、34-75、175-192和213-215氨基酸区段。结论:此结果将有助于确定IL-37b的B细胞表位,为研制人IL-37单克隆抗体提供了理论依据。
- 高巧艳李燕周密高雪明袁仙丽李明才
- 关键词：B细胞表位
- 白细胞介素-38及其相关细胞因子在炎症中的作用被引量：23
- 2013年
- 白细胞介素(interleukin,IL)-38是最近发现的IL-1家族细胞因子的第10个成员。IL-38的基因序列与IL-1受体拮抗剂(IL-1Ra)和IL-36Ra的基因有较高的同源性。IL-38的特异性受体为IL-36R,它是IL-36的部分受体拮抗剂。IL-38可抑制Th17细胞产生IL-17和IL-22等炎症介质,也可抑制IL-36γ诱导产生IL-8,从而抑制炎症反应。该文对IL-38的生物学特征、受体与信号通路、生物学活性及其相关细胞因子作一综述。
- 袁仙丽李明才李燕高雪明高巧艳
- 关键词：受体拮抗剂炎症
- 靶向IL-33基因RNA干扰重组慢病毒载体的构建方法
- 本发明针对IL-33基因，设计合成双链DNA片段，连接到慢病毒载体中，制备出重组慢病毒质粒载体，然后将重组慢病毒质粒载体与病毒包装成所需的3个辅助载体共转染到293T细胞中，获得靶向IL-33基因RNA干扰的重组慢病毒载...
- 李燕高巧艳李明才高雪明袁仙丽彭笑
- 文献传递
- 芍药苷对原发性干燥综合征患者外周血单个核细胞分泌细胞因子IL-1、IL-6的影响被引量：1
- 2015年
- 目的从细胞因子分泌调控水平研究芍药苷(PF)抗炎抗风湿的作用机制。方法收集20例原发性干燥综合征(p SS)患者空腹肘静脉血于肝素抗凝管中,用Ficoll-hypague密度梯度离心分离外周血单个核细胞(PBMC),分为PF干预组和不干预组。体外干预培养,分离细胞培养上清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测不同浓度PF对三磷酸腺苷(ATP)刺激下该细胞分泌白细胞介素(IL)-1,IL-6的影响。结果 2、20、80 mol/L PF作用4 h,PBMCs培养上清中IL-1、IL-6水平与不干预组比较,差异均无统计学意义(均>0.05);100、150 mol/L PF作用4 h,PBMCs培养上清中IL-1、IL-6水平与不干预组比较,差异均有统计学意义(均<0.05)。结论 PF可能通过下调p SS患者PBMC的IL-1,IL-6分泌发挥对p SS患者的治疗作用,且具有剂量依赖性。
- 于静雅陈勇彭勇李明才邬秀娣张振高巧艳龚琼瑶
- 关键词：芍药苷原发性干燥综合征白细胞介素-1白细胞介素-6
- 一种人白细胞介素-38的生产方法
- 本发明公开了一种人白细胞介素-38的生产方法，采用基因工程方法生产，该基因工程方法包括以下步骤：1）合成PCR引物；2）PCR扩增目的基因获得IL-38目的基因片段；3）构建重组载体pET-44-hIL-38；4）将重组...
- 李明才袁仙丽李燕高雪明高巧艳
- 文献传递
- 人白细胞介素-36受体拮抗剂的二级结构及B细胞表位的预测被引量：1
- 2015年
- [目的]预测人白细胞介素-36受体拮抗剂(interleukin-36 receptor antagonist,IL-36Ra)蛋白的特性及其B细胞抗原表位。[方法]以人IL-36Ra基因序列为基础,应用Expasy工具中Prot Param程序分析人IL-36Ra蛋白的氨基酸组成、理化性质和二级结构;采用Prot Scale网络服务器预测亲水性和柔韧性;采用Emini和Kolaskar方案分析其可及性。结合其二级结构的特性,进一步预测IL-36Ra的B细胞抗原表位。[结果]人IL-36Ra的二级结构主要由无规则卷曲(44.52%)、β折叠(30.97%)、α-螺旋(18.06%)和β-转角(6.45%)组成。IL-36Ra蛋白肽链的36-37、72-79、91-96、103-110、126-130和134-138区段为B细胞表位区域的可能性较大。[结论]该研究采用多参数方案综合预测人IL-36Ra蛋白的二级结构和B细胞表位,为深入鉴定IL-36Ra的抗原表位及试验方法探索其单克隆抗体奠定了理论基础。
- 彭笑潘秀和袁仙丽高巧艳李燕李明才
- 关键词：B细胞表位
- 人白细胞介素-36受体拮抗剂基因的克隆及序列分析
- 2015年
- [目的]构建人白细胞介素-36受体拮抗剂(interleukin-36 receptor antagonist,IL-36Ra)的真核表达载体,并对其基因全长编码区进行分析。[方法]提取总RNA,逆转录出IL-36Ra c DNA序列。设计人IL-36Ra基因的上游引物和下游引物。利用热启动PCR扩增目的基因,将扩增出的IL-36Ra基因编码区通过限制性内切酶酶切后,把酶切的目的片段与载体pc DNA3.1连接,转化到感受态细胞大肠杆菌DH5α中。通过氨苄青霉素抗性筛选、双酶切及菌落PCR鉴定,最后选取阳性克隆进行测序。[结果]重组载体pc DNA3.1-h IL-36Ra经菌落PCR和酶切鉴定,最后通过序列分析证实,其序列与Gen Bank中数据一致。[结论]人IL-36Ra基因的重组真核表达载体pc DNA3.1-h IL-36Ra的成功构建,为进一步研究IL-36Ra在免疫性疾病中的作用奠定了实验基础。
- 彭笑袁仙丽潘秀和高巧艳李燕李明才
- 关键词：基因克隆RT-PCR
- 小鼠白细胞介素IL-35基因慢病毒表达载体的构建及鉴定被引量：2
- 2016年
- [目的]构建小鼠白细胞介素IL-35基因慢病毒表达载体并鉴定。[方法]通过PCR法扩增出小鼠IL-35基因片段,将其与经XhoⅠ和XbaⅠ双酶切的慢病毒载体pLVX-IRES-ZsGreen1连接,构建慢病毒重组质粒pLVX-IL-35-IRES-ZsGreen1。用无内毒素试剂盒提取重组质粒后,将其与病毒包装所需的3个辅助质粒共转染到人肾胚(HEK)293T细胞中包装能表达IL-35的慢病毒颗粒。该病毒培养上清经浓缩后,梯度稀释法检测其滴度。用浓缩后的病毒感染HEK293T细胞,然后通过荧光显微镜观察荧光蛋白的表达并结合RT-PCR法检测IL-35基因在该细胞中的表达。[结果]IL-35慢病毒表达载体构建成功,包装的慢病毒滴度为1×109TU/m L,通过荧光显微镜和RTPCR检测发现IL-35在HEK293T细胞中表达。[结论]成功构建IL-35慢病毒表达载体且IL-35蛋白能在HEK293T细胞中过表达。
- 潘秀和孙俊刘超波高巧艳李燕李明才
- 关键词：IL-35慢病毒共转染
- 人白介素-37b的基因克隆及其真核表达载体的构建与鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的:克隆人IL-37b基因cDNA,并构建其真核表达载体。方法:从包皮组织中提取总RNA,用逆转录-PCR技术,扩增人IL-37b基因全长编码区片段,经酶切后,克隆入pcDNA3.1(+)载体中,构建真核表达载体pcDNA3.1-hIL-37b,用内切酶双酶切鉴定与DNA测序。结果:获得的IL-37b基因序列与GenBank数据库中的一致。人IL-37b基因的全长编码片段为657 bp,翻译为218个氨基酸。结论:人IL-37b基因成功地克隆并构建了其真核表达载体,为进一步进行IL-37的表达与功能研究奠定了基础。
- 高雪明李明才李燕袁仙丽高巧艳
- 关键词：基因克隆真核表达载体
- 人白细胞介素-38的特性分析及B细胞表位的预测被引量：2
- 2014年
- 目的:为进一步了解人白细胞介素(IL)-38蛋白质的特性和B细胞表位,从GenBank中查得其序列,用生物信息学等方法预测人IL-38蛋白质的二级结构等特性,并对其B细胞表位进行预测。方法:应用ProtParam tool、ProtScale、Emini和Kolaskar等程序或方法,对IL-38的组成、理化特性、亲水性、柔韧性和可及性等进行分析,以进一步预测其二级结构和抗原表位。结果:IL-38的二级结构主要由无规则卷曲(44.08%)和β-折叠(39.47%)组成。其B细胞表位可能位于第26-36、45-55、78-98和124-143等氨基酸区段。结论:首次利用生物信息学方法对IL-38基因及其蛋白质结构进行了分析和预测,预测结果将有助于确定IL-38的B细胞表位,为IL-38基因功能的深入研究及研制IL-38单克隆抗体提供了理论依据。
- 袁仙丽李明才李燕高雪明高巧艳
- 关键词：B细胞表位
