马云胜
- 作品数:45 被引量:123H指数:7
- 供职机构:辽宁医学院更多>>
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- 相关领域:医药卫生生物学文化科学一般工业技术更多>>
- 枸杞多糖诱导大鼠骨髓间充质细胞向神经元样细胞转化的实验研究被引量:12
- 2006年
- ①目的探讨枸杞多糖诱导骨髓间充质细胞(BMSCs)向神经细胞转化的可能机制。②方法用贴壁筛选法分离培养出贴壁生长良好的骨髓BMSCs。选取第3代细胞,当传代细胞长满瓶底的80%以上时,先用含15%FBS和1g/L枸杞多糖的DMEM培养基预诱导24小时,然后,用不含血清的1g/L枸杞多糖的DMEM培养基诱导。光镜下观察细胞形态;用免疫组化技术检测细胞Nes-tin、NF、GFAP的表达。③结果预诱导后,BMSCs没有变化。而经过枸杞多糖诱导后,细胞在4小时后即出现形态学上的改变,细胞变凸,立体感增强,从胞体伸出突起。免疫组化检测显示,细胞Nestin、NF染色阳性,GFAP阴性。④结论骨髓间充质细胞经过枸杞多糖的诱导可以转化为神经细胞。
- 刘树辉马云胜曹中伟秦书俭郑德宇
- 关键词:骨髓间充质细胞枸杞多糖神经细胞
- 人脐血基质细胞生物学特性的实验研究被引量:2
- 2009年
- 目的:探讨人脐血基质细胞的生物学特性,为骨组织工程选择理想的种子细胞来源。方法:采用加入10%FBS、20ng/mlbFGF的L-DMEM培养基培养人脐静脉血基质细胞,以人骨髓基质细胞(BMSCs)做为对照。应用倒置显微镜观察细胞形态学特征,描绘生长曲线,流式细胞仪检测细胞周期。同时原代细胞进行成骨诱导分化培养。碱性磷酸酶染色和Von-Kossa染色法检测成骨能力。结果:①人脐血基质细胞原代培养形态呈长梭形,需21~30d长满瓶底,传代后细胞增殖缓慢并逐渐死亡。②在成骨诱导培养基里,脐血基质细胞增殖速度减慢,诱导前后形态无明显改变。碱性磷酸酶染色:脐血基质细胞阳性率为46.0%。Von-Kossa染色提示脐血基质细胞成骨诱导后形成钙化结节。结论:脐血基质细胞增殖能力有限,较骨髓基质细胞难于培养,成骨诱导证实可以向成骨细胞分化。
- 马云胜罗美刘树辉秦书俭
- 关键词:脐血骨髓基质细胞诱导分化
- 胶原蛋白复合壳聚糖支架的制备及生物学性状:壳聚糖及胶原比例筛选被引量:9
- 2010年
- 背景:壳聚糖和胶原类支架已成为组织工程常用的载体材料。但是,现阶段如何能够通过调节二者比例而达到理想的细胞载体仍是目前需要解决的问题之一。目的:调节胶原与壳聚糖二者配制比例制备支架材料,检测及对比不同比例支架材料生物学性质。方法:制备1∶1,1∶2,1∶3,1∶4,1∶5比例的壳聚糖、Ⅰ型胶原蛋白成分,经紫外线交联后冷冻干燥,再将其用NAOH与蒸馏水进行中和,二次冻干制备好支架。观察不同比例支架的材料性质、孔隙率、降解率、溶胀率;扫描电镜观察孔径的大小及形态。结果与结论:在壳聚糖含量固定,支架的大体孔径经统计比较差异有显著性意义(P<0.05)。1∶3比例制备的孔径最大,达到(298.0±36.0)μm;支架总体的孔隙率为93.9%~97.5%,胶原比例的增加对支架孔隙率的影响较轻微。各组支架的溶胀率可达到80%左右,支架的溶胀程度随胶原比例增加而减少。在支架的降解率随着胶原比例增加而增加,而壳聚糖含量越高,降解速度越慢。结果证实,通过紫外光交联法,按照1∶3配比的胶原和壳聚糖的支架材料更加适合软骨组织工程的要求。
- 王征马云胜穆长征王亚光
- 关键词:壳聚糖胶原蛋白
- 脐血贴壁细胞体外培养与生长特性观察被引量:2
- 2006年
- 目的观察脐血贴壁细胞生长特性及提高体外培养脐血贴壁细胞成功率,为造血干细胞培养提供基质环境。方法采用密度梯度离心法分离脐血单个核细胞,在含20ng/ml bFGF,10%胎牛血清的低糖DMEM培养基中培养,于倒置显微镜下观察细胞生长情况、并描绘其生长曲线、流式细胞仪检测细胞周期。结果脐血贴壁细胞呈长梭形、针形或三角形,增殖周期G0/G1为85.12%,倍增时间为48h。结论体外培养的脐血细胞能够贴壁生长并形成单层细胞层。
- 马云胜齐艳朱姝朱蕊秦书俭
- 关键词:脐血贴壁细胞
- 人脐血CD29+细胞向神经元样细胞转化
- 2010年
- 脐血中富含造血干细胞,一直以来被用于血液疾病的治疗,近年来人们发现脐血中含有少量的非造血干细胞的成分,表达骨髓间充质干细胞(MSC)的表型并可以分化为骨、软骨、神经等多种组织。但是由于没有好的获取该细胞的方法,
- 马云胜罗美穆长征秦书俭
- 关键词:细胞转化神经元样人脐血造血干细胞血液疾病
- Wnt3a促进大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞的分化(英文)被引量:7
- 2010年
- 背景:Wnt 信号通路是细胞增殖分化的关键调控环节,但与骨髓间充质干细胞神经分化的联系并不十分明确。目的:寻找促进骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的 Wnt 信号分子。方法:首先体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞并传代,行形态学观察,并以流式细胞学方法检测细胞表型 CD44,CD9,CD34和 CD45。采用碱性成纤维细胞生长因子分别联合 Wnt3a 或 Wnt5a 的方案诱导分化,应用免疫组化和反转录-聚合酶链反应方法比较 Wnt3a 和 Wnt5a 对骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的影响。结果与结论:骨髓间充质干细胞为长梭形,CD9,CD44 高表达,CD34,CD45 低表达。Wnt3a 诱导组的巢蛋白和神经元特异烯醇化酶呈阳性,而胶质纤维酸性蛋白无明显表达,诱导后细胞的活力良好。Wnt5a 诱导组巢蛋白呈弱阳性表达,而神经元特异烯醇化酶及胶质纤维酸性蛋白阴性。反转录-聚合酶链反应结果显示,Wnt3a 诱导组巢蛋白在诱导前后均有表达,神经元特异烯醇化酶在诱导后 5 d 可见明显的扩增条带,10 d 后更加明显。胶质纤维酸性蛋白在诱导 10 d 后出现较弱的扩增条带。Wnt5a 组、对照组骨髓间充质干细胞在诱导后 10 d 巢蛋白有微弱表达,神经元特异烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白几乎无表达。提示 Wnt3a 分子能够促进体外培养的骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化。
- 王小梅穆长征马云胜
- 关键词:骨髓间充质干细胞WNT3AWNT5A神经元样细胞
- 软骨源形态发生蛋白基因转染自体骨髓间充质细胞修复关节软骨缺损被引量:1
- 2010年
- 背景:以支架或干细胞在一定程度上能够修复软骨缺损,但是研究中发现较大块的缺损修复效果还达不到令人满意的程度。基因转染后的干细胞能够不断的释放生长因子有可能够为软骨缺损研究带来突破。目的:进一步验证软骨源形态发生蛋白转染的骨髓间充质干细胞是否会促进体内兔软骨修复。方法:从兔骨髓内分离获得骨髓间充质干细胞,脂质体感染的方法将软骨源形态发生蛋白基因转染到骨髓间充质干细胞中。实验组移植转染后的细胞;单纯骨髓间充质干细胞组移植未转染的骨髓间充质干细胞;空白对照组缺损区不移植细胞。术后行组织学检测及组织学评分分析修复情况。结果与结论:体内修复过程中,软骨源形态发生蛋白转染的骨髓间充质干细胞促进了软骨再生。透明软骨填充了软骨缺损区,并且深部区域显示了软骨下成骨。透明软骨的重建区域优于单纯骨髓间充质干细胞移植组。组织学评分实验组高于骨髓间充质干细胞对照组和空白组。提示转染软骨源形态发生蛋白基因的骨髓间充质干细胞能够促进和提高关节软骨的改建和修复。
- 穆长征马云胜王征
- 关键词:软骨缺损骨髓间充质细胞软骨分化基因转染
- 五年制本科医学生临床实践能力的培养模式研究被引量:1
- 2015年
- 培养高素质、高质量的医学人才是21世纪中国高等医学教育发展战略的核心。目前,在医学临床教学阶段,要紧紧抓住临床实践能力的培养主线,进行扩展渗透,实施全方位教育。临床医疗是一项实践性很强的工作,毕业实习则是培养临床医学生理论联系实际的重要过程。培养临床医学生不能简单给学生灌输医学理论,也不能简单以理论考试作为毕业实习评价指标,必须理论与实际相结合,加强对学生临床技能培训与考核,
- 杨锐王庆军马云胜
- 关键词:临床实践能力医学临床教学本科医学临床技能培训医学模拟教学临床实习教学
- 胰岛素产生细胞微囊化后的活力观察被引量:2
- 2012年
- 目的观察胰岛素产生细胞经微囊化后活力变化,为糖尿病的治疗寻找可行方案。方法采用贴壁法获得纯化的BM-MSCs。制备RPE进行诱导分化,同时制备微囊并将诱导后的细胞包裹。观察细胞的形态并进行胰岛素分泌能力检测。结果经微囊包裹后的细胞呈聚集状态,并且培养一段时间后未发现微囊破裂、变形、囊内细胞溢出的现象。功能学检测结果显示,BM-MSCs不分泌胰岛素,未微囊化的IPCs和微囊化的IPCs均具有分泌胰岛素功能,且微囊不影响胰岛素的释放。结论胰岛素产生细胞经微囊化后活性依然良好,且RPE可诱导BM-MSCs分化为IPCs,此为糖尿病的治疗提供了新思路。
- 王恩达马云胜穆长征王雅光
- 关键词:骨髓间充质干细胞胰岛素产生细胞微囊化
- 大鼠胚胎脑组织神经干细胞的培养和鉴定被引量:20
- 2006年
- 目的探讨从不同胎龄的大鼠脑组织中分离,培养神经干细胞(NSC)并对其鉴定,了解生物特性。方法通过采用机械分离和消化分离相结合的方法分离不同胎龄大鼠脑NSC。在无血清DMEM/F12(含20ng/m lbFGF,20ng/m lEGF及B27辅助培养液)中培养、传代和鉴定。诱导分化后采用SABC法对分化的细胞进行神经元特异烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)检测作细胞鉴定。结果从不同胎龄的胎鼠脑组织中成功培养出神经干细胞,胎龄为12.5天的胎鼠提取的神经干细胞集落最多,在上述条件下培养及传代的细胞不断分裂增殖,形成悬浮生长的呈巢素蛋白(nestin)阳性的神经球;用血清诱导分化为大量表达NSE阳性的神经元和GFAP阳性的星形胶质细胞。结论胎龄为12.5天胎鼠大脑皮质培养出的神经干细胞数量最多,可分化为神经元、神经胶质细胞及少突胶质细胞。
- 曹中伟马虹曾倩马云胜秦书俭
- 关键词:神经干细胞细胞培养分化