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SIRT1在小鼠肾脏发育中的表达和作用被引量：3: 2015年; 目的观察SIRT1在小鼠肾脏发育过程中的表达变化及SIRT1基因敲除对小鼠肾脏发育的影响,探讨SIRT1在小鼠肾脏发育过程中的作用.方法应用基因型分型方法观察SIRT1敲除后对小鼠生存率的影响;应用免疫组化和免疫荧光技术检测胚龄14 d小鼠肾脏中SIRT1蛋白的表达部位;应用实时定量PCR对胚龄15d、16 d、17d、18d和出生后日龄0d、5d、9d、23 d小鼠肾脏组织中SIRT1 mRNA表达水平进行半定量分析;观察SIRT1敲除对胚龄17d、18d和出生后4d、10 d小鼠肾脏大小的影响;离体肾脏培养观察SIRT1敲除后对肾脏输尿管芽分支的影响;应用免疫组化、实时定量PCR技术观察SIRT1敲除后对小鼠肾脏增殖细胞核抗原（PCNA）表达水平的影响.结果大多数SIRT1（-/-）小鼠在孕期可以存活,出生后不久死亡;免疫组化及免疫荧光染色结果显示SIRT1在肾脏发育早期即有丰富表达,主要表达在后肾间充质部位,输尿管芽部位表达较少;实时定量PCR结果显示SIRT1在胚龄17 d表达水平最高,随后明显下降,在出生后维持低水平表达;SIRT1敲除后肾脏体积减小,镜下主要表现为肾小球数目减少以及肾小球面积减小（P＜ 0.01）;SIRT1敲除后肾脏输尿管芽分支数目明显减少,PCNA表达水平明显下降（P＜0.01）.结论 SIRT1可能通过调控PCNA表达在小鼠肾脏发育过程中对肾单位发育起重要作用.; 马乐婷张敏谢琼虹任明衡关熠王苏容陈靖林善锬郝传明; 关键词：胚胎发育输尿管 SIRTUIN SIRTUIN

白藜芦醇对慢性肾衰竭大鼠肾脏的保护作用及相关机制被引量：6: 2013年; 目的探讨白藜芦醇（RSV）对5／6肾切除大鼠肾脏的保护作用及对转化生长因子（TGF）-β-Smad信号通路的影响。方法将50只雄性SD大鼠随机分为3组：假手术组（Sham组，n=10）、5／6肾切除组（Nx组，n=20）和5／6肾切除＋RSV治疗组（Nx＋RSV组，n=20），术后1周开始每天给予生理盐水或RSV（20mg／kg）灌胃。建模后每4周收集24h尿液检测尿蛋白含量，12周后处死大鼠，收集血和肾组织标本观察血肌酐和肾组织病理改变。免疫组化法观察各组大鼠肾组织TGF-β、结缔组织生长因子（CTGF）、纤连蛋白（FN）和Ⅰ型胶原（ColⅠ）变化。Western印迹法检测肾组织Smad3、磷酸化和乙酰化Smad3表达，免疫共沉淀检测Sirtl与Smad3的相互结合。结果Nx组在术后12周尿蛋白量[（152．14±30．49）mg／24h比（25．34±7．54）mg／24h]、血肌酐[（111．60±21．50）μmol／L比（53．90±11．59）μmol／L]和肾小球硬化指数（1．56±0．34比0．35±0．08）均显著高于Sham组（均P〈0．01），RSV治疗可显著抑制上述改变（均P〈0．01）。免疫组化结果显示Nx组大鼠FN、ColⅠ、TGF-β和CTGF的表达高于Sham组（均P〈0．01），RSV治疗能显著抑制上述改变。Western印迹显示，Nx组大鼠磷酸化Smad3和乙酰化Smad3的表达显著高于Sham组（均P〈0．05），RSV治疗可显著降低乙酰化Smad3的表达（P〈0．05），但并未显著降低磷酸化Smad3的表达。免疫共沉淀研究显示Sirtl与Smad3相互作用。结论RSV可改善肾切除大鼠蛋白尿、肾功能和纤维化等指标，其作用机制可能与激活Sirtl，降低乙酰化Smad3的表达有关，提示Sirtl可能是慢性肾脏病潜在的治疗靶点。; 黄新忠温东海张敏谢琼虹马乐婷任月衡关熠陈靖林善锬郝传明; 关键词：肾切除术转化生长因子Β SMAD蛋白质类白藜芦醇

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马乐婷

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