韩嵘
- 作品数：11 被引量：102H指数：7
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- 相关领域：生物学更多>>
- 小鼠ES细胞可在体外诱导分化为神经元样细胞被引量：3
- 2002年
- 通过悬浮培养和 0 5 μmol LRA诱导 ,建立了定向诱导ES细胞向神经元样细胞分化的体系。在该体系中 ,神经元样细胞于类胚贴壁后 4 8h之内出现 ,4～ 6d时达到最多 ,8～ 10d后减少。由ES细胞分化而来的神经元样细胞具有典型的形态特征 ,并且可以与NF抗体发生特异反应。
- 韩嵘汤富酬尚克刚
- 关键词：ES细胞体外分化神经元样细胞细胞分化
- 两个可进入种系的ES细胞系的建立被引量：8
- 1999年
- 从129／ter小鼠中建立了9个ES细胞系，它们在核型、生长速度、体内外分化能力等方面显示了各自不同的特点。通过囊胚显微注射法，将ES细胞注入C57BL／6J胚胎中，制作了嵌合体，并通过对嵌合体后代毛色的观察，判断了嵌合体生殖细胞的组成。结果表明，ES细胞系MESPU21、MESPU22都具有很强的种系嵌合能力。比较这两个细胞系与其他细胞系，证明一个好的ES细胞系必须具备核型正常、生长速度快、体外分化速度适中的特点。建系过程中精心的操作有利于获得好的ES细胞系。ES细胞体内分化形成的肿瘤的组织成分可能与嵌合体制作的结果间存在一定的相关关系。
- 韩嵘陈伟胜童英尚克刚孟令国
- 关键词：小鼠ES细胞系
- 具高效种系嵌合能力的C57BL/6J小鼠ES细胞系的建立被引量：12
- 1999年
- 采用小鼠原代成纤维细胞作为饲养层，在含1×103单位白血病抑制因子（LIF）的DMEM高糖培养基中，建成了11个C57BL／6J小鼠的ES细胞系，成系率为9．6％。所建的11个ES细胞系中有5个核型正常率大于70％。这些细胞具早期胚胎细胞的特征，呈碱性磷酸酶阳性，具表达0014基因的特性5进行体内分化实验时能发生广泛的分化。通过嵌合体制作实验证明其中3个系具嵌合能力，并从中筛选出具高效种系嵌合能力的MESPU35细胞系，MESPU35细胞的克隆能达到种系传递，经过基因操作的细胞克隆，也保留了高效的嵌合能力。因此，MESPU35细胞可作为制作突变小鼠的有效载体。
- 童英韩嵘郑玉兰苏平尚克刚
- 关键词：ES细胞系
- 小鼠ES细胞种系嵌合体的获得被引量：35
- 1999年
- 种系嵌合体的获得是实现ＥＳ细胞介导的转基因途径的决定步骤。ＥＳ细胞种系分化能力的保持是决定种系嵌合的前提条件，而嵌合体的制作及种系嵌合体的获得则是判定ＥＳ细胞系是否具有种系分化能力的唯一方法。为考察本室新近建立的３种小鼠ＥＳ细胞系ＭＥＳＰＵ２１、ＭＥＳＰＵ２２和ＭＥＳＰＵ２９的种系分化能力，选用近交系Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ及远交系ＫＭＷ和ＩＣＲ为受体胚胎提供者，分别通过囊胚注射法和８细胞期桑椹胚注射法进行了嵌合体构建实验。共获得嵌合体８１只，经毛色分析确定在进行测交的４２只嵌合体中有１９只是种系传递者，为国内小鼠ＥＳ细胞种系嵌合体的首例报道。在所考察的３种ＥＳ细胞系中，ＭＥＳＰＵ２ｌ和ＭＥＳＰＵ２２均能以较高效率获得种系嵌合体，并且多数种系嵌合体（１４／１９）可高效传递ＥＳ细胞来源的毛色性状，确凿证明两细胞系均具有较强的种系分化能力，可作为优良的细胞载体介导小鼠基因组进行的基因改造。
- 陈伟胜韩嵘尚克刚
- 关键词：ES细胞小鼠
- 大鼠心肌条件培养基对形成小鼠ES细胞集落的影响被引量：27
- 1997年
- 报道一种新的从小鼠囊胚中培养和分离出ＥＳ细胞集落的方法。取出生２～３周龄大鼠的心肌组织制备单层培养物，收集６代以内的条件培养基（ＲＨＣＭ）。以ＲＨＣＭ培养Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠的囊胚（无饲养层），对照组以小鼠胚胎原代成纤维细胞（ＭＥ）为饲养层，并补加ＬＩＦ因子。经过１９０个胚的实验证明，以ＲＨＣＭ为培养基培养小鼠囊胚时，胚胎贴壁率、ＩＣＭ增殖率和ＥＳ细胞集落的出现率与对照组没有显著性差异，分别为６７％、９３％和１３％。这种新的方法为简便而有效地建立与培养小鼠ＥＳ细胞系提供了有益的资料。
- 韩嵘柴桂萱尚克刚
- 关键词：心肌条件培养基小鼠胚胎ES细胞
- C57 BL/6J小鼠ES细胞系的建立及其特性分析被引量：31
- 1996年
- 本文报道从C57BL/6J个鼠的囊胚中,建立了三个ES细胞系MESPU17,MESPU18,MESPU19。这些细胞的细胞学特征和强AKP反应,表明这三个细胞系具有干细胞的特征。这三个细胞系均为XY型,正常二倍体核型分别占70％、88％和59％。体外分化可形成简单类胚,体内分化可形成瘤块。与国际上通用的CCE和来自129/ter的ES细胞MESPU13相比,这三个细胞系的ES细胞较大;在体外培养时,生长较慢;细胞也较粘,进行显微注射时,很容易粘在注射针壁上。MESPU17,MESPU18进行了嵌合体制作,以BALB/c和昆明鼠的囊胚为受体,采用囊胚注射法未获嵌合体,但使用昆阴鼠的8细胞胚注射法和共培养法得到嵌合体。
- 柴桂萱韩嵘尚克刚
- 关键词：细胞系细胞生物学
- RNA/DNA嵌合分子介导的高效基因修复被引量：2
- 2000年
- 本文介绍了RNA/DNA嵌合分子介导的高效基因修复技术。这一技术是1996年开始发展起来的全新技术 ,它通过人工合成的双链开环RNA/DNA嵌合分子转染细胞而使特定基因靶位点产生单碱基改变 ,从而修复突变基因。这一技术高效 (目前最高可达50 %以上 )、特异性强、安全、无随机插入致变的危险、无免疫反应、无明显毒性 ,能够用于定点突变、基因敲除、动植物功能基因组学、药物遗传学等很多方面的研究 ,在不久的将来能够应用于人类基因治疗 ,具有很高的应用价值和医学前景。
- 汤富酬韩嵘薛友纺
- 关键词：基因治疗基因修复
- 小鼠生殖细胞的胚胎发育被引量：7
- 2002年
- 本文综述了近年来小鼠胚胎发育过程中生殖细胞的起源、迁移与增殖、性别分化及其基因组修饰等方面的研究进展。小鼠生殖细胞在 7～ 7.5dpc时由原始生殖细胞 (PGC)演变而来 ,至 12 .5dpc时PGC全部迁移进入生殖嵴 ,到 13.5dpc时停止分裂。Steel/c -kit信号途径在PGC迁移过程中起重要作用。生殖细胞的性别主要是由生殖腺中体细胞的微环境决定的。Y染色体上存在精子形成所必需的基因。生殖细胞的全基因组范围的重新甲基化晚于胚胎体细胞的重新甲基化 ,到 18.5dpc时才完成。雌性生殖细胞的X染色体重新活化在 14.5～ 15 .5dpc时完成 ,并且与生殖嵴的性别分化无关。
- 韩嵘尚克刚
- 关键词：原始生殖细胞小鼠胚胎发育基因组
- 具有高效种系嵌合能力的小鼠胚胎干细胞系的建立和特异标记
- 该文报道研究人员从129/ter小鼠中建立了9个ES细胞系,并从中筛选出两个具有高效种系嵌合能力的ES细胞系,MESPU21和MESP22.该文报道了研究人员对ES细胞群体中未分化 细胞的特异标记.oct-4是一个在大鼠...
- 韩嵘
- 关键词：小鼠
- 不同ES细胞系体外定量神经分化的比较被引量：8
- 2001年
- 利用视黄酸 (RA)诱导小鼠胚胎干细胞通过悬浮类胚培养法体外定量分化为神经样细胞。结果显示能够进行种系嵌合的MESPU2 2细胞系与不能进行种系嵌合的MESPU13细胞系的体外神经分化比例在统计学上没有明显差异。此结果对于人的胚胎干细胞全能性的鉴定与检测有重要启示。
- 汤富酬韩嵘薛友纺尚克刚
- 关键词：胚胎干细胞
