霍万学 作品数:44 被引量:141 H指数:8 供职机构: 内蒙古民族大学 更多>> 发文基金: 内蒙古自治区自然科学基金 国家自然科学基金 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 农业科学 理学 更多>>
蒙药古古勒-4味汤对原代肝细胞氧化应激损伤的保护作用及机制 被引量:2 2019年 目的:研究古古勒-4味汤(黑云香四味汤散)对H2O2所致的原代肝细胞氧化应激损伤的保护作用及其作用机制.方法:取新生乳鼠肝脏,加入0.1%Ⅱ型胶原酶以及0.1%胰蛋白酶混合液分离培养原代肝细胞,加入不同剂量(100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L)H2O2建立原代肝细胞氧化应激损伤模型.原代肝细胞氧化应激损伤模型建立成功后,加入0.5 mg/mL、l mg/mL及1.5 mg/mL古古勒-4味汤确定古古勒-4味汤最佳剂量.MTT检测H2O2和古古勒-4味汤最佳剂量及肝细胞活性;收集细胞,采用ELISA检测不同组细胞中GSH-Px和SOD的表达情况;采用real-time PCR法检测各组肝细胞Nrf2、Keapl的mRNA表达情况.结果:对数生长期的原代肝细胞加人终浓度为200μmol/L H2O2培养6个小时后,给予1mg/mL古古勒-4味汤处理肝细胞后,肝细胞活力较模型组明显上升;古古勒-4味汤处理后,细胞中S0D、GSH-Px活性增强;古古勒-4味汤处理后,肝细胞活性氧明显降低;古古勒-4味汤处理后,肝细胞Nrf2、Keapl的mRNA水平下调.结论:古古勒-4味汤通过影响Keapl-Nrf2/ARE信号通路,保护由H2O2所致的原代肝细胞氧化应激损伤. 图门吉日嘎勒 魏成喜 霍万学 张冬丽 包琳 翟景波 王迪 刘兰英 刘鑫 周培清 樊志菲关键词:氧化应激 连翘-4对临床常见致病菌体外抗菌有效物质筛选研究 目的:检测连翘-4味汤散不同溶剂提取物对临床常见致病菌体外抗菌作用.
方法:采用琼脂平板稀释法、微孔板TTC法,以连翘-4味汤散不同溶剂(石油醚、氯仿、乙酸乙酯、无水乙醇、75%乙醇、水)提取物为实验药物,选用... 王欢 霍万学 乌仁图雅 王颖 巴根那关键词:提取物 致病菌 抗菌作用 民族医科院校《医学微生物学》教学改革探讨 2016年 为了提高民族医科院校医学微生物学教学效果,提升教学质量,多年来我们探索出适合自己院校医学微生物学课程的教学方法。 韩梅 崔桂玉 刘鑫 包常华 成岩 王敏 鲁仁杰 霍万学关键词:医学微生物学 教学改革 布鲁氏菌S2株L7/L12蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备 被引量:4 2014年 目的用大肠埃希菌表达布鲁氏菌S2株L7/L12蛋白,制备其多克隆抗体。方法设计引物,以S2弱毒株DNA基因组为模板扩增目的基因片段L7/L12,构建pET28a-L7/L12质粒并转化入E.coli BL21(DE3),IPTG诱导目的蛋白表达,SDS-PAGE检测表达蛋白的可溶性及其分子质量;金属亲和层析法纯化目的蛋白,BCA法对纯化蛋白定量。将rL7/L12蛋白与弗氏完全佐剂混合(终浓度为0.5mg/ml),每次1ml分两次间隔21d免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体。免疫结束后12d,颈静脉采血,分离血清,采用间接ELISA法检测血清抗体效价。以免疫血清1∶200倍稀释作为一抗,采用Western blot分析其与r-L7/L12、布鲁氏菌S2株全菌体蛋白及大肠埃希菌DH5α全菌体蛋白结合的特异性。结果经测序与酶切鉴定,成功构建表达载体pET28a-L7/L12,SDS-PAGA分析表达产物部分为可溶性,分子质量单位约为14ku;SDS-PAGE分析亲和纯化蛋白为单一条带,蛋白质含量为0.8mg/ml。间接ELISA检测免疫血清抗体效价为1∶12 800,该抗体能够与r-L7/L12、布鲁氏菌S2株全菌体蛋白结合,而不与大肠埃希菌DH5α菌体蛋白结合。结论成功克隆L7/L12基因并表达出目的蛋白,制备的抗布鲁氏菌S2株r-L7/L12多克隆抗体能特异识别该表达蛋白。 成岩 白靓 董丽刚 韩梅 王敏 张冬丽 霍万学关键词:布鲁氏菌 基因克隆 多克隆抗体 单味苦参汤对大肠埃希菌腹腔注射致家兔未熟热证期模型的催熟作用的研究 被引量:1 2014年 目的:实验证实蒙药单味苦参汤的催熟作用。方法:30只家兔分为空白组、模型组、苦参组共3组,每组10只,模型组和苦参组采用腹腔多点注射大肠埃希菌0.2ml(1ml)的方法制作蒙医黏性腹刺痛症及其未熟热证期、成熟热证期,苦参组于造模前灌胃单味苦参汤0.2856 g/10ml,各组正常饮食,检测家兔体温、观察症状变化。结果:实验期间空白组体温波动未超过0.4℃,模型组和苦参组于注入大肠埃希菌后30min、70min开始体温上升,并于80min、120min进入40℃以上高热阶段,两组高热持续时间分别约240min、200min,于造模后320 min体温逐渐下降,分别于440min、380min时恢复至基础体温水平,两组症状表现均出现明显的未熟热证期和成熟热证期症候。苦参组较对照组体温升高起始点推迟40 min,40℃以上高热时点推迟40 min,40℃以上高热持续时间缩短60 min,总的发热持续时间缩短约100 min。模型组和苦参组分别于造模后约30和70分钟出现未熟热证症状并持续100 min和50 min,苦参组较模型组短50min,苦参组较模型组未熟热证期平均体温低0.5℃。空白对照组在实验期间精神良好,无异常状况出现。结论:苦参具有抑制发热家兔体温升高的作用。该功效与蒙医温病学阐述病机论述、治疗原则吻合。 额尔敦朝鲁 李立 霍万学 胡玉荣 杨玉秋 加曼沙俄 包春生 纪月岭 王格日乐图 胡曙光 TSERENDAGVA Dalkh MUNKHTULGA Lkhagvasuren关键词:蒙医 蒙成药扎冲十三味丸对大鼠脑缺血组织细胞凋亡的影响 被引量:14 2013年 目的探讨扎冲十三味丸对缺血性脑组织损伤的保护机制。方法利用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞模型,采用Elisa法和流式细胞技术Annexin V fitc/pi细胞双染法,检测凋亡细胞相关蛋白和神经细胞凋亡百分率,观察扎冲十三味丸对脑缺血组织bcl-2和bax蛋白表达水平以及缺血组织细胞凋亡程度的影响。结果扎冲十三味丸能减低缺血脑组织Bax蛋白含量和上调Bcl-2蛋白含量以及降低缺血脑组织细胞凋亡百分率。结论扎冲十三味丸通过降低缺血脑组织细胞凋亡百分率,对脑组织缺血损伤有保护作用。 陶春 翟景波 刘鑫 张冬丽 霍万学 刘月英 宋葆华 汤文莉 宝鲁尔 宣丽颖 金殊杰 王灵战 林琳关键词:扎冲十三味丸 脑缺血 细胞凋亡 通辽地区过敏原检测结果及与其他地区对比分析 被引量:6 2018年 为了解通辽地区常见过敏原的分布情况与特点,采用欧蒙免疫印迹法,对428例疑似过敏性疾病患者的血清标本中18种过敏原的特异性IgE类抗体进行半定量检测。根据各种过敏原特异性IgE抗体阳性百分率,分别对通辽地区和其他地区的结果进行了排序,并计算出各地区同一过敏原特异性IgE抗体阳性百分率的平均序位,并将通辽地区序位与其他地区序位和各个地区平均序位进行了对比。结果显示,通辽地区食入性和吸入性过敏原阳性率最高的分别为淡水鱼组合(10.30%)和艾蒿(6.54%)。有20.56%的过敏性疾病患者只对某一种过敏原呈阳性反应,有10.51%的患者对两种过敏原呈阳性反应。通辽地区蟑螂、霉菌组合、屋尘、普通豚草、尘螨组合的特异性IgE抗体阳性百分率的序位明显低于各地区平均序位,而螃蟹/虾、葎草、花生、淡水鱼组合、海洋鱼组合和大豆的序位明显高于各地区平均序位。这提示淡水鱼组合、海洋鱼组合、大豆、花生、艾蒿、树木组合、蟑螂、狗上皮、豚草、尘螨组合是通辽地区常见的引起过敏性疾病的过敏原。多数患者只对一种或两种过敏原呈阳性反应。通辽地区过敏原特异性IgE抗体阳性百分率的序位与其他地区序位和各地区平均序位对比显示,通辽地区疑似过敏性疾病人群的过敏原分布具有鲜明的特征。 张冬丽 霍万学 王迪关键词:特异性IGE 排序 黑大蒜提取物对小鼠过敏性哮喘的治疗作用 被引量:7 2012年 目的观察黑大蒜提取物对小鼠过敏性哮喘的治疗作用。方法 BALB/c小鼠随机分为空白组、阴性组、药物组、鲜大蒜组和黑大蒜组。阴性组及各治疗组用鸡卵蛋白(OVA)和氢氧化铝致敏,用OVA诱发,建立小鼠哮喘模型,空白组用PBS代替。其中各治疗组分别于激发后注射富马酸酮替酚溶液、鲜大蒜提取物溶液和黑大蒜提取物溶液。空白组和阴性组于激发后注射相同体积的PBS。末次治疗后采集小鼠血液,ELISA法检测血清中的IFN-γ、IL-4、IL-33和IgE水平,显微镜下直接计数全血中嗜酸粒细胞数量。结果与空白组比较,阴性组IL-4、IL-33、IgE水平和嗜酸粒细胞数明显升高,而IFN-γ明显降低;各治疗组可有效降低IL-4、IL-33、IgE水平和嗜酸粒细胞数量,同时可升高IFN-γ的水平,与阴性组相比有统计学差异;黑大蒜组小鼠的各项检测指标(IL-33除外)均与鲜大蒜组有统计学差异(P<0.05)。结论黑大蒜提取物对哮喘具有一定疗效,其机制除通过调整Th1/Th2型应答平衡外,也可能通过抑制IL-33-ST2信号途径达到治疗目的 。 李洋 李胜军 陈浏丹 侯颖 霍万学 王大南 吕昌龙关键词:哮喘 白细胞介素4 医学检验专业“自助”实验教学模式探讨 被引量:3 2006年 所谓“自助”实验教学模式,就是从实验筹划准备和预试验到正式实验都是由学生完成的实验教学方法.学生在整个过程中,有机会全方位了解实验教学准备的全过程,利于熟悉毕业实习和就业环境;以“主角”身份进行的主观能动性思考,利于培养责任心和提高组织能力;参与学生从带教老师的指导和答疑中获得的知识和技能,在实验课过程中易于向全班同学辐射传播.经过合理设计的这种教学模式,可以激发学生的学习热情,可以加强学生的综合素质训练,利于更好地与临床实际工作接轨. 鲁仁杰 霍万学 张冬丽 王敏关键词:实验教学 自助式 布鲁氏菌S2株L7/L12蛋白B细胞线性抗原表位的预测与鉴定 被引量:10 2015年 目的预测猪布鲁氏菌S2株L7/L12蛋白B细胞线性抗原表位,并鉴定其抗原性。方法以布鲁氏菌S2株为对象,采用NCBI提供的BLAST程序分析其L7/L12蛋白与原核模式生物大肠埃希菌L7/L12蛋白的同源性;使用IEDB网络服务器初步预测B细胞线性表位;在大肠埃希菌L7/L12蛋白空间结构的基础上,使用SWISS-MODEL服务器构建猪布鲁氏菌S2株L7/L12蛋白空间结构模型,参考空间结构特点筛选符合形成表位的区域,同时分析区域内易形成表位的3种氨基酸(缬氨酸、亮氨酸、半胱氨酸)所在位置,综合分析以上结果获得所预测表位;以预测表位序列为基础,人工合成表位多肽-匙孔血蓝蛋白复合抗原并包被酶标板,分别以rL7/L12多克隆抗体及小鼠布鲁氏菌免疫血清为一抗,采用间接ELISA方法验证所预测表位的抗原活性。结果 L7/L12含有潜在的B细胞线性抗原表位,所预测表位区位于N末端第51-66aa,60-75aa,87-102aa;ELISA检测合成的表位多肽蛋白复合物抗原性,60-75aa表位能够与rL7/L12多克隆抗体及布鲁氏菌免疫鼠血清抗体结合。结论筛选的猪布鲁氏菌L7/L12蛋白B细胞线性表位位于N末端第60-75aa区域,具有与特异性血清结合的能力,为布鲁氏菌的感染诊断与疫苗研发奠定了基础。 成岩 白靓 董丽刚 韩梅 王敏 张冬丽 霍万学关键词:布鲁氏菌 表位 生物信息学