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金贤华

作品数：9 被引量：9H指数：2
供职机构：新疆农业大学农学院更多>>
发文基金：国家科技重大专项新疆维吾尔自治区科技计划项目新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目更多>>
相关领域：农业科学生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 8篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 5篇农业科学
  • 4篇生物学

主题

  • 6篇细胞
  • 4篇绵羊
  • 3篇多能性
  • 3篇胚胎
  • 3篇胚胎干细胞
  • 3篇干细胞
  • 2篇增殖
  • 2篇体外
  • 2篇体外培养
  • 2篇卵母细胞
  • 2篇卵泡
  • 2篇慢病毒
  • 2篇母细胞
  • 2篇基因
  • 2篇HEK293...
  • 2篇MILRIN...
  • 2篇SHRNA
  • 1篇凋亡
  • 1篇动力学
  • 1篇氧分压

机构

  • 7篇新疆农业大学
  • 3篇中华人民共和...
  • 2篇新疆畜牧科学...

作者

  • 9篇金贤华
  • 5篇黄俊成
  • 5篇周川
  • 4篇汪立芹
  • 4篇张秀华
  • 3篇陈博
  • 2篇赵云程
  • 2篇林嘉鹏
  • 2篇王静
  • 1篇刘莉
  • 1篇石庆华
  • 1篇王静
  • 1篇王静

传媒

  • 1篇安徽农业科学
  • 1篇生物学杂志
  • 1篇江苏农业学报
  • 1篇中国草食动物
  • 1篇中国生物化学...
  • 1篇中国农学通报
  • 1篇Agricu...
  • 1篇现代生物医学...

年份

  • 6篇2012
  • 3篇2011
共 9 条 记 录，以下是 1-9
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排序方式：
多因素对昆明小鼠胚胎干细胞原代集落形成和后期增殖的影响
2011年
目的:研究细胞因子LIF、EGF、bFGF和肝素钠,以及氧分压、温度等多因素对昆明系小鼠胚胎干细胞(KM-ESC)原代集落形成和后期增殖的影响。方法:本研究选择LIF、EGF、bFGF、肝素钠、5%O2,20%O2和37℃、39℃作为研究条件。并检测不同情况下小鼠胚胎干细胞原代集落形成和后期增殖情况。结果:LIF对KM-ESC原代集落形成和后期增殖具有显著促进作用,极显著高于EGF、bFGF和肝素钠组(P<0.01)。温度对KM-ESC原代集落形成和增殖具有显著影响,39℃条件下,原代集落形成率、直径和后期增殖显著高于37℃(P<0.05);而氧分压对KM-ESC原代集落形成无显著作用(P>0.05),但是对原代集落直径和后期增殖有一定促进作用,20%O2组显著高于5%O2组(P<0.05)。结论:LIF、EGF、bFGF、肝素钠、39℃、20%O2对小鼠胚胎干细胞原代集落形成和后期增殖具有显著促进作用。
陈博赵云程陈士斌王静王静金贤华
关键词：胚胎干细胞细胞因子氧分压
bFGF浓度对oESC-like增值、凋亡、多能性相关基因表达的影响
2012年
使用免疫荧光技术检测与增值、凋亡、多能性相关基因的表达水平。提高bFGF浓度可增强PCNA、Oct-4、Sox-2、Bax和Bcl-2的表达,同时使Bcl-2/Bax比值维持较稳定水平。结果表明提高bFGF浓度可增强oESC-like的增值能力和多能性,增强其抗凋亡能力以适应长期培养。
周川赵云程汪立芹林嘉鹏金贤华张秀华黄俊成
关键词：胚胎干细胞多能性碱性成纤维细胞生长因子
绵羊BMPR-1B基因shRNA的设计与验证
骨形态发生蛋白/(Bone Morphogenetic Proteins, BMPs/)是转化生长因子-β/(TGF-β/)超家族的成员,它是多功能蛋白,在脊椎动物和无脊椎动物的骨骼发育及器官形成中具有重要作用,并且参与...
金贤华
关键词：SHRNAHEK293细胞卵泡颗粒细胞慢病毒
文献传递
添加不同因子对绵羊类胚胎干细胞多能性的影响
2012年
为筛选出更有利于维持绵羊类胚胎干细胞(oESC-like cell)多能性的因子,在基础培养基N2B27/CH中,分别添加PD、PD+hLIF、PD+BPM4、PD+hLIF+BMP4,通过比较分析,初步筛选出了比本实验室原培养体系(N2B27/CH+bFGF)更利于维持oESC-like多能性的培养基添加因子。结果显示:基础培养基中添加PD、PD+hLIF后细胞生长较好,细胞之间的结合更加致密;各种培养基培养物都表达AKP与Sox2、Oct4免疫荧光蛋白等oESC-like多能性标志;4种不同培养基与bFGF相比,细胞的生长速度减慢;在基础培养基N2B27/CH中添加PD和PD+hLIF使多能性候选基因Lin28与c-Myc表达量极显著升高(P<0.01),Nestin的表达量极显著下调(P<0.01),加入PD+hLIF使Oct4表达量极显著上调(P<0.01)。因此,在oESC-like基础培养液N2B27/CH的基础上,添加PD或PD+hLIF更有利于oESC-like细胞多能性维持。
张秀华石庆华赵云程林嘉鹏汪立芹周川金贤华黄俊成
关键词：体外培养候选基因
绵羊类胚胎干细胞长期培养中增殖、凋亡、多能性相关基因的表达动力学被引量：3
2012年
已报道的家畜类胚胎干细胞(embryonic stem-like cell,ESC-like)均无法实现长期培养,这制约了家畜ESC的研究.通过检测本实验室建系的绵羊类胚胎干细胞oESC-like,探究导致oESC-like无法持续培养的原因,为以后的研究打下基础.实验观察了oESC-like形态变化,检测了AKP的表达,使用免疫荧光技术检测了PCNA、Bcl-2、Bax、Sox-2、Oct-4蛋白的表达,并用软件Image-Pro Plus6.0计算蛋白表达水平.结果显示,oESC-like在长期培养过程中其形态具备ESC的典型形态特征;AKP持续表达;Sox-2和Oct-4的表达有不同程度的提高,增殖能力无明显变化;Bax表达水平逐代提高,Bcl-2的表达水平在5、10代显著高于Bax的表达水平可抑制Bax的活化,而从15代开始Bcl-2表达水平下降,低于Bax的表达水平,不能有效地抑制Bax的活化;Bcl-2/Bax表达水平的比值逐代下降,说明oESC-like在长期培养过程中逐渐走向凋亡.为解决绵羊类胚胎干细胞能够体外长期培养的科学问题,针对本实验室已有研究成果和存在的问题,进行逆向思维找出突破口,为遗传育种、基因工程、医疗等方面在实践上提供理论基础.
周川赵云程林嘉鹏汪立芹张秀华金贤华黄俊成
关键词：胚胎干细胞绵羊凋亡多能性
7个shRNA分子对绵羊BMPR-1B基因的干扰作用分析
2012年
为获得有效干扰绵羊BMPR-1B基因的shRNA干扰分子,从绵羊卵巢组织中扩增了1 515 bp BMPR-1B基因全长编码区cDNA序列,添加HA标签序列后,插入Plex-mcs慢病毒质粒,构建Plex-BMPR-1B慢病毒表达载体,转染HEK293细胞,并与2个包装质粒共转染293T细胞进行病毒包装,用获得的重组慢病毒感染HEK293细胞;同时,将7个干扰分子与Pll-LentiLox 3.7载体重组,并与3个包装质粒共转染293T细胞进行病毒包装,获得干扰分子的重组病毒颗粒。最后用干扰分子重组的病毒颗粒感染整合Plex-BMPR-1B的HEK293细胞,进行qRT-PCR和Western blot检测。结果显示:重组BMPR-1B蛋白质在稳定整合Plex-BMPR-1B的HEK293细胞系中获得了表达;研究中设计的7个shRNA分子能抑制绵羊BMPR-1B基因表达水平68.30%～99.86%,其中PLL-BMPR-1B-1306和PLL-BMPR-1B-1475干扰分子的干扰效果最好。
金贤华林嘉鹏白杰刘晨曦汪立芹阿米娜周川黄俊成
关键词：SHRNAHEK293细胞慢病毒
Application of PDE3 and Brilliant Cresyl Blue in In-vitro Culture of Sheep Oocyte
2011年
[Objective] The aim of this study was to increase the viability of sheep oocytes in vitro by using phosphodiesterase type 3（PDE 3） inhibitor milrinone combined with brilliant cresyl blue（BCB） staining.[Method] The differences between BCB tested and morphologically selected oocytes,as well as the effect of them on embryo development were compared;and then suitable inhibitive time of milrinone to sheep oocytes in vitro was studied and used in BCB-oocytes for in vitro embryo production（IVEP）.[Result] The BCB＋ oocytes percentage in A-and B-level sheep oocytes was 64.42%,which was extremely significantly higher than that in C-level（17.0%）.The maturing rate,cleavage rate and blastocyst rate of BCB＋ oocytes（86.16%,85.29% and 34.40%） of was significantly higher than those of BCB-oocytes（50.94%,36.19% and 6.73%）.The best time for PDE 3 inhibitor delaying the sheep oocyte mature in vitro was 6 h.In addition,the rate of embryo development in vitro could be significantly increased by inhibiting the BCB-oocytes for 6 h with Milrinone.[Conclusion] The study will provide reference for improving the efficiency of sheep oocytes culture in vitro.
汪立芹王静王静金贤华陈博
关键词：MILRINONE
PDE3与亮甲酚蓝在绵羊卵母细胞体外培养中的应用研究被引量：3
2011年
[目的]探讨磷酸二酯酶3(PDE3)特异性抑制剂Milrinone与亮甲酚蓝染色液(BCB)相结合在绵羊卵母细胞体外培养中的应用。[方法]比较了BCB对绵羊卵母细胞的筛选与传统的形态分级之间的差异,以及对胚胎后期发育的影响;研究了Milrinone对绵羊卵母细胞的最佳抑制时间,并用于BCB-卵母细胞体外培养。[结果]A、B级卵母细胞中BCB+卵母细胞的比例为64.42%,极显著高于C级卵母细胞的17.00%;BCB+卵母细胞的成熟率(86.16%)、卵裂率(85.29%)、囊胚率(34.40%)分别极显著高于BCB-卵母细胞(50.94%、36.19%和6.73%);6 h是Milrinone对绵羊卵母细胞的最佳抑制时间,该试验组体外培养效率显著高于其他组;Milrinone对BCB-卵母细胞抑制培养6 h,极显著提高了体外胚胎发育率。[结论]为提高绵羊卵母细胞体外培养效率提供了依据。
汪立芹王静王静金贤华陈博
关键词：MILRINONE绵羊卵母细胞
诱导幼龄绵羊卵泡发育的研究被引量：1
2012年
为了稳定并提高幼龄绵羊卵泡的发育效率。本研究从激素处理方案、激素生产厂家、羔羊日龄、重复处理周期等4个方面进行了研究。结果表明:国产FSH剂量在60、120、180IU之间差异显著(P<0.05);国产FSH和加拿大生产的FSH对幼羔卵泡发育没有影响;5～9周龄羔羊的卵泡数和卵母细胞数显著高于4周龄和11周龄的羔羊(P<0.05);4～7周龄羔羊首次处理后间隔15～30天再次处理的卵泡数和卵母细胞数都没有差异(P>0.05),2次重复处理总卵泡数和卵母细胞数间也没有差异(P>0.05)。
汪立芹林嘉鹏周川张秀华金贤华刘莉黄俊成
关键词：羔羊卵泡卵母细胞
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