金勤立
- 作品数:37 被引量:88H指数:6
- 供职机构:上海医科大学附属儿科医院更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金国家自然科学基金卫生部科技专项基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 疏水性肺表面活性物质结合蛋白质及其基因的表达
- 2000年
- 肺表面活性物质(PS)是降低肺泡表面张力、维持呼吸功能重要物质,主要成分为多种甘油磷脂和非血源性的肺表面活性结合蛋白质(SP)。由于PS缺乏,导致新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)或成人呼吸窘迫综合征(ARDS),二者死亡率均很高,又无特效治疗。国外率先开展大量的PS基础研究,用外源性PS治疗NRDS取得成功。本研究重点在疏水性肺表面活性蛋白质。
- 金勤立刘希红徐永华
- 关键词:肺表面活性物质结合蛋白SP基因表达
- 应用不同配方磷脂预防大鼠肺出血和肺水肿的研究被引量:9
- 1997年
- 为了观察5种不同配方磷脂预防大鼠肺出血、肺水肿的效果,应用静脉注射肾上腺素制备大鼠肺水肿、肺出血模型。结果:多种配方均使支气管肺泡灌洗液总蛋白质的量下降;但大豆磷脂组不能使血脂质过氧化物值下降,该组及人工合成磷脂组均不能使肺指数下降。提示不同磷脂配方预防大鼠肺水肿、肺出血效果,依次为牛肺表面活性物质或人工合成磷脂+牛肺表面活性物质蛋白质,大豆磷脂+维生素E,人工合成磷脂,大豆磷脂。
- 金勤立徐锦孙家娥吴静怡朱列伟
- 关键词:肺出血肺水肿磷脂药物疗法维生素E
- 肺表面活性物质结合蛋白B和C在大肠杆菌中的表达被引量:1
- 1996年
- 用基因工程方法表达出肺表面活性物质结合蛋白(SP)-B和SP-C,与人工合成磷脂制备成有效的外源性肺表面活性物质,以便今后用于治疗呼吸窘迫综合征。方法用人SP-B、SP-C基因的成熟多肽构建原核细胞表达载体pIN-Ⅲ-ompA2-B-C,在大肠杆菌BL21中,通过异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达。表达产物经Westernblot分析,并用膜天平检测表达产物的生物活性。结果SP-B和SP-C融合蛋白可以在大肠杆菌BL21中表达,分子量约为20000,但表达量较低。在大肠杆菌中,表达产物能使表面张力降低,最小表面张力可以达到0.004N/m2,且有较大滞后环面积。结论为今后通过基因工程方法获得SP,从而制备理想的外源性肺表面活性物质制剂创造了条件。
- 刘希红徐永华金勤立朱畅宁朱畅宁
- 关键词:呼吸窘迫综合征肺表面活性剂大肠杆菌
- 肺表面活性物质结合蛋白基因的克隆被引量:2
- 1995年
- 从正常人肺组织抽提总RNA,通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,扩增出肺表面活性物质结合蛋白(SP-B、SP-C)基因片段,分别为240bp、110bp。又通过PCR产物的回收、克隆、连接、转化、酶解以及DNA序列分析,证明所克隆的基因片段与已发表的人成熟SP-B、C的cDNA序列完全一致,未发现有任何突变。提示本研究为利用基因工程手段得到SP及其与人工合成磷脂重组成有效的外源性肺表面活性物质奠定了基础,同时也证明RT-PCR技术是很有效的cDNA克隆化手段,具有简便快捷的优点。
- 刘希红徐永华金勤立朱畅宁
- 关键词:聚合酶链反应基因克隆
- 疏水性肺表面活性物质蛋白质及基因工程表达
- 金勤立刘希红徐永华顾建人朱畅宁孙家娥曲淑敏徐锦朱列
- 该项目所属医学应用研究。从新生牛肺灌洗液或人羊水中抽提SP-B,C,在体外用膜天平测定活性,证明人工合成磷脂必须加SP-B或SP-C后才明显增加表面活性,联合加SP-B,C比单独加SP-B或SP-C任何一种时表面活性作用...
- 关键词:
- 关键词:表面活性新生儿疾病蛋白质固相多肽合成
- 氦-氖激光在预防肺出血中对肺表面活性物质的影响被引量:12
- 1998年
- 目的观察氦-氖激光照射的生物效应对内源性肺表面活性物质(PS)的影响,探索预防肺出血的综合措施。方法在大鼠肺出血模型上使用氦-氖激光照射。对比实验大鼠的生存率,肺病理,肺指数,分析支气管灌洗液(BALF)中的相关成份和观察超微结构。结果氦-氖激光照射组较之对照组提高了造模条件下的大鼠生存率;肺病理,肺指数明显改善并与BALF的分析结果均有显著的统计学意义;超微结构显示存活大鼠不但未出现明显的病理变化,且肺Ⅱ型细胞大量分泌板层小体即肺表面活性物质。结论低强度氦-氖激光照射的系统效应,减轻了血液流变对肺组织的影响,促进了内源性PS的产生,起到了预防肺出血的作用。
- 朱列伟施炳培金勤立孙家娥周丽君
- 关键词:肺表面活性剂肺出血氦氖激光
- 新生儿呼吸衰竭的肺表面活性物质变化
- 陈超金勤立邵肖梅
- 关键词:先天性畸形呼吸衰竭新生婴儿肺表面活性剂透明膜病
- 牛肺表面活性物质预防大鼠肺出血模型的观察被引量:3
- 1996年
- 肺表面活性物质(PS)是维持肺功能的重要物质,缺乏PS即会导致肺不张、肺萎陷、肺透明膜产生等变化。肺出血、水肿是各种严重疾病导致肺部危重病理变化,可致PS不足,PS不足又可加重肺出血、水肿。本文采用天然PS预防实验性大鼠肺出血、水肿,并观察其大体变化,光镜、电镜以及肺灌洗液BALL蛋白质量以及血脂质过氧化物(LPO)等变化,现报告如下。
- 吴静怡孙家娥朱列伟金勤立
- 关键词:肺出血肺表面活性物质动物模型
- 转化生长因子β_3对早产大鼠肺表面活性物质蛋白质基因表达的影响及机理被引量:1
- 1997年
- 为研究转化生长因子β3(TGF-β3)对发育期肺表面活性物质蛋白质(SPs)基因表达的影响。利用孕19天早产大鼠肺组织块及肺Ⅱ型细胞培养,检测SPs(SP-A、SP-B和SP-C)基因表达。结果:单纯使用TGF-β3对SP-A、SP-B、SP-C基因表达无明显影响,但TGF-β3可明显抑制100nmol/ml地塞米松增加SP-B、SP-C基因表达的效应,随TGF-β3浓度增加抑制显著。TGF-β3并非直接作用于肺Ⅱ型上皮细胞,而是以成纤维细胞为介导产生抑制效应。TGF-β3对地塞米松增加SP-A基因表达无影响。提示:TGF-β3对肺发育期SPs基因表达有抑制作用,糖皮质激素预防新生儿呼吸窘迫综合征效果不理想可能与TGF-β3作用有关。
- 王晓川金勤立徐锦沈惟堂
- 关键词:转化生长因子ΒSPS呼吸窘迫综合征新生儿
- Ru486对胎鼠肺Ⅱ型上皮细胞的影响
- 1996年
- 为研究糖皮质激素的可能作用位点,以分离培养的肺Ⅱ型上皮细胞为主要材料,通过板层小体染色的方法,观察Ru486对该细胞的影响。结果显示,无血清培液中Ru48610^(-4)mol/L至培养第1d或10^(-5)mol/L培养至第3d时均使Ⅱ型细胞出现坏死现象,但加入地塞米松(DEX)10^(-6)mol/L4h后再用Ru486则坏死现象消失。由此从形态学角度证实了肺Ⅱ型上皮细胞具有糖皮质激素受体。Ru486是通过阻断该受体发挥作用的。
- 徐锦夏绿蒂丁韵珍朱列伟金勤立
- 关键词:RU486糖皮质激素