郭娟
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
- 供职机构：北京大学第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 核因子κB激活剂1在类风湿关节炎发病机制中的研究被引量：2
- 2015年
- 目的 了解RA患者滑膜组织及外周血淋巴细胞中NF-κB激活剂1（Act1）的表达情况,探索其可能的调节机制.方法 收集47例RA患者、27名健康对照者的外周血,应用反转录PCR方法测定PBMCs中Act1-mRNA的表达量,采用流式细胞术检测淋巴细胞亚群中Act1的表达情况.收集10例RA患者及5例OA患者的滑膜组织,通过免疫组织化学方法了解Act1在滑膜组织的表达,免疫荧光双染色对Act1阳性细胞进行定位.采用Mann-Whitney U检验、两独立样本的t检验及Pearson相关分析进行统计学分析.结果 RA患者滑膜组织中可见大量炎性细胞浸润,并且高表达Act1,而OA患者滑膜组织中未见明显炎性细胞浸润及Act1阳性表达;通过免疫荧光双染发现Act1阳性细胞以CD4^＋T细胞为主,B细胞鲜见Act1表达.RA患者外周血CD4^＋T细胞、CD8^＋T细胞中Act1表达的平均荧光强度均略低于健康对照组,但差异无统计学意义[CD4^＋T细胞：133（69,380）与158（117,246）,U=36,P＞0.05;CD8^＋T细胞：127（63,363）与129（81,222）,U=35,P＞0.05],而CD20^＋B细胞中Act1表达的平均荧光强度均略高于健康对照组,但差异均无统计学意义[62（34,81）与52（33,105）,U=36,P＞0.05].RA组患者PBMCs中Act1-mRNA水平略低于健康对照组,但差异无统计学意义（0.71±0.32与0.79±0.21,t=1.717,P=0.091）;Act1-mRNA水平与RA疾病活动度指标未发现明显相关性.结论 Act1参与RA炎症过程,但尚未发现其与RA疾病活动度相关.
- 张晓慧周炜赵娟郭娟张卓莉
- 关键词：关节炎类风湿白细胞介素17
- 组蛋白去乙酰化酶在结缔组织病中的作用被引量：3
- 2014年
- 组蛋白的乙酰化状态影响基因的表达水平,受组蛋白乙酰化酶与组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDACs)共同调控。细胞异常状态下,组蛋白去乙酰化酶活性明显增强,打破原有的基因表达平衡状态,导致一些影响细胞增殖和调控细胞周期的分子表达失衡,则会导致疾病的发生。越来越多的研究证实组蛋白可逆性的乙酰化和去乙酰化在免疫反应调节中具有重要作用。本文从组蛋白去乙酰化酶结构功能出发,综述其在结缔组织病中可能的作用。
- 郭娟周炜
- 关键词：组蛋白去乙酰化酶组蛋白去乙酰化酶抑制剂类风湿关节炎系统性红斑狼疮系统性硬化症
- 通过慢病毒载体构建SSA/Ro52稳定基因沉默细胞系
- 2014年
- 目的利用慢病毒载体持续表达RNA干扰序列抑制基因表达,建立SSA/Ro52稳定基因沉默细胞系,为进一步研究SSA/Ro52的功能提供有效工具。方法 4条SSA/Ro52特异序列(克隆1为TGGCATGGTCTCCTTCTACAA,克隆2为CTGCCTTCTTTATGGGACTTA,克隆9为TGAG从GTTGGAAGTGGAAAT,克隆1 1为AGTTATCCTATGGTCCTGGGT)和无关对照序列克隆至慢病毒载体pLKO-puro,表达后可形成小发卡结RNA(small hair-pin,shRNA),通过RNA干扰机制抑制特异基因表达。表达SSA/Ro52特异序列的克隆1、2、9、11以及表达无关序列的对照克隆(scramble,S)分别与包装载体pGag-Pol和pVSV-G共同转染293T细胞,收集含病毒颗粒的培养液。用表达SSA/Ro52特异序列和无关对照序列的病毒颗粒感染Hela细胞,抗生素筛选,建立稳定细胞系。以GAPDH为内对照定量实时PCR检测SSA/Ro52 mRNA的表达。免疫印记检测SSA/Ro52蛋白,扫描SSA/Ro52条带与β-actin条带相比为SSA/Ro52蛋白的相对表达水平。克隆1、2、9、11转染细胞中SSA/Ro52的表达水平与对照克隆S的比值为基因表达的抑制程度。结果慢病毒颗粒可以有效感染Hela细胞,含shRNA表达框架的病毒序列可以整合至细胞基因组,形成稳定细胞系。克隆1、2、9、1 1转染细胞在抗生素筛选3 d后,其SSA/Ro52 mRNA表达水平分别是克隆S转染细胞的25.5%、31.2%、13.0%和77.2%;而上述克隆转染细胞SSA/Ro52蛋白表达水平是对照的5%、50%、10%和80%。培养4周后上述克隆SSA/Ro52蛋白表达水平没有明显变化。但用干扰素α刺激细胞后,SSA/Ro52在对照克隆转染细胞中表达增加,而克隆1、2、9、11转染细胞SSA/Ro52的表达是对照的30%、70%、5%和100%。结论克隆1、2、9可以有效抑制SSA/Ro52的表达,通过慢病毒载体转染细胞建立了SSA/Ro52稳定基因静默细胞系。在SSA/Ro52表达被上调时,克隆9仍然可以有效抑制SSA/Ro52的表达,为进一步研究SSA/Ro52的功能打下了基础。
- 郭娟周炜
- 关键词：自身抗原慢病毒载体细胞系
- 多发性大动脉炎免疫发病机制被引量：6
- 2014年
- 大动脉炎(Takayasu's arteritis,TA)是主要累及升主动脉及其主要分支的慢性非特异性全层动脉炎性反应,感染、遗传、免疫机制等诸多因素均可参与其发病,本文就近年TA发病的免疫机制作一综述。细胞免疫是参与TA发病的重要因素,而体液免疫是否参与其发病过程目前研究仍存在争议。
- 张倩茹郭娟周炜
- 关键词：大动脉炎发病机制细胞免疫体液免疫
- 核因子-κB激活剂1在干燥综合征中的表达及其调节机制的探讨被引量：1
- 2014年
- 目的了解SS患者唇腺组织及外周血淋巴细胞中核因子-KB激活剂1（Act1）的表达情况，探索其可能的调节机制。方法收集10例SS患者及5例非SS患者的唇腺组织，通过免疫组织化学方法了解Act1在唇腺组织的表达，免疫荧光双染对Act1阳性细胞进行定位。收集28例SS患者及22名健康对照者的PBMCs，应用RT—PCR方法测定PBMCs中Act1-mRNA的表达量，应用流式细胞术检测淋巴细胞亚群中Act1的表达情况。采用Wilcoxon检验和Mann—whitneyU检验及Pearson相关分析进行统计学分析。结果SS患者唇腺组织中可见大量Act1阳性细胞，明显高于非SS患者，而非SS患者唇腺组织中仅偶有Aetl阳性表达；通过免疫荧光双染发现Actl阳性细胞以CD4＋T细胞为主，B细胞鲜见Actl表达。外周血CD4＋T细胞、CD8＋T细胞以及CD20＋B细胞中Act｜表达的平均荧光强度均略高于健康对照组，但差异均无统计学意义。SS组患者PBMCs中Actl-mRNA水平高于健康对照组（分别为0．84±0．35和0．79±0．21，U=274．5，P〉0．05）；伴IgG升高的SS患者Act1—mRNA表达水平高于IgG正常SS患者（分别为0．88±0．39和0．75±0．27，U=73．0，P〉0．05），存在内脏器官受累的SS患者Act1表达水平高于无内脏受累的SS患者（分别为0．92±0．38和0．77±0．33，U=75．0，P〉0．05），但差异均无统计学意义。结论SS患者唇腺组织T细胞中高表达Act1，但B细胞表达Act1受抑制，外周血T、B淋巴细胞中Actl表达略高于健康对照者，推测Act!可能分别通过正反馈和负反馈机制调节IL-17介导的T细胞免疫以及B细胞介导的免疫反应参与SS的发病。Actl很可能参与SS发病，可能与SS疾病活动性和严重性有关。
- 张晓慧周炜郭娟赵娟张卓莉
- 关键词：干燥综合征白细胞介素17
