郭俊成
- 作品数:29 被引量:87H指数:6
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- 利用母胎间基因甲基化的差异性检测母血中微量胎儿DNA方法的建立被引量:1
- 2011年
- 随着表观遗传学方法在无创性产前诊断中的逐步应用,第一个普通应用的胎儿表观遗传学标记低甲基化maspin基因突破了胎儿性别和基因多态性的局限,为母血中胎儿DNA应用于临床开辟了新的领域,象征着非创伤性产前诊断的研究向前迈进了一大步。
- 王健赵富玺刘润花武永明郭俊成穆雅琴
- 关键词:胎儿DNA基因甲基化母血MASPIN基因非创伤性产前诊断无创性产前诊断
- cyclin E、p16ink4、ki67的高度表达对宫颈癌高危人群筛查的意义被引量:3
- 2005年
- 目的:探讨宫颈脱落细胞中cyclinE、p1 6ink4、ki6 7的高度表达对宫颈癌高危人群筛查的意义。方法:采用免疫组织化学方法对78例宫颈脱落细胞标本(不明意义的鳞状上皮非典型增生ASCUS 1 2例、宫颈上皮内瘤样病变CIN11 7例、CINⅡ~Ⅲ3 8例、浸润癌1 1例)进行cyclinE、p1 6ink4、ki6 7检测,实验数据进行χ2 检验及四格表Fisher确切概率计算。结果:cyclinE、p1 6ink 4、ki6 7在各级宫颈癌中的阳性率均较ASCUS组差异有非常显著意义(P <0. 0 0 5 ) ;cyclinE在CIN1 的表达率较其它各组也有非常显著意义( 91.4%均P <0.0 1 ) ;p1 6ink4、ki6 7均随着宫颈上皮细胞损伤程度加重而表达上升(P <0.0 0 5 ) ,在浸润癌阳性率达到最高(分别为1 0 0 %和90.9% )。CIN1 组3指标特异度均较高(分别为91.7%、1 0 0 %和91 .7% ) ,灵敏度cyclinE最高( 94. 1 % ) ,p1 6ink4与ki6 7均较低(分别为5 8.8%和4 7.1 % )。结论:采用宫颈脱落细胞检测cyclinE、p1 6ink 4、ki6 7中的1项或多项作为诊断指标应用于宫颈癌高危人群筛查,对降低筛查的假阳性和假阴性率,提高筛查的灵敏度和特异度具有重要意义。
- 郭俊成赵富玺刘丽华熊思东
- 关键词:P16INK4高危人群筛查KI67宫颈癌宫颈上皮细胞ASCUS
- 孕妇血浆中胎儿表观遗传标记的检测效率评价
- 2014年
- 目的 分析母血中非性别依赖的胎儿表观遗传学标记超甲基化Ras相关区域家族1A(Ras association domain family 1A,RASSF1A)基因的检测效率,探讨其替代SRY基因检测游离胎儿DNA的可行性. 方法 选择2011年5月1日至2012年4月30日于山西省大同市第一和第五人民医院进行产前检查的正常妊娠妇女50例,分别于妊娠早、中、晚期采集外周静脉血,胎儿出生后确定为男胎的孕妇(28例)为研究对象.选择20例同期体检的健康未妊娠女性作为阴性对照.通过甲基化敏感的限制性内切酶消除母源性(非甲基化)RASSF1A基因,采用TaqMan实时荧光定量聚合酶链反应检测胎源性(超甲基化)RASSF1A基因,同时测定孕妇血浆中SRY基因并作为参照,对检测结果进行相关性分析.统计学方法采用Shapiro-wilk分析、Pearson或Spearman秩相关分析和x2检验. 结果 28例男胎孕妇共进行84次检测,超甲基化RASSF1A基因最早于妊娠第8+2周检出,检出率97.62%(82/84).对照组未检测到超甲基化RASSF1A基因和SRY基因.妊娠早、中、晚期孕妇血浆中酶切后RASSF1A基因及SRY基因的含量分别为(60.19±14.16) copies/ml与(58.22±15.13) copies/ml(r=0.933,P<0.01)、(99.18±28.44) copies/ml与(95.43±32.33) copies/ml(r=0.931,P<0.01)、(144.93±33.51) copies/ml与(132.96±28.24) copies/ml(r=0.654,P<0.01).酶切后RASSF1A和SRY基因含量均与孕周呈正相关(r分别为0.933和0.896,P均<0.01). 结论 检测表观遗传学标记超甲基化RASSF1A基因所得的游离胎儿DNA结果与SRY基因具有较高的一致性,该基因突破了胎儿性别的局限,有助于扩大无创伤性产前诊断的临床应用范围.
- 王健杨晶刘润花穆雅琴郭俊成武晓红刘丽华白光梅赵富玺
- 关键词:肿瘤抑制蛋白质类甲基化产前诊断
- 通过母血中胎儿表观遗传学标记物预测子痫前期的探讨被引量:1
- 2010年
- 目的通过实时荧光定量PCR法测定孕妇血浆中胎儿表观遗传学标记物非甲基化丝氨酸蛋白酶抑制剂B5(un-methylated serpin peptidase inhibitor,clade B,member 5,U-maspin)基因的含量,初步探讨母血浆中U-maspin基因的定量能否预测子痫的发生.方法随机选择子痫前期孕妇40例为实验组,其中轻度和重度患者各20例,以健康同期妊娠妇女20例为对照组.提取血浆游离DNA,用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测各组血浆标本中U-maspin基因的含量.结果子痫前期组孕妇血浆中U-maspin的水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),轻、重度子痫前期患者平均浓度有差异,分别为1 402.05 copies/mL及2 189.60 copies/mL(P<0.05).结论U-maspin基因作为孕妇血浆中游离的胎儿特异性表观遗传学标记物,可以预测子痫的发生.
- 刘润花王健武永明郭俊成穆雅琴赵富玺
- 关键词:孕妇血浆荧光定量PCR子痫前期
- 过继转输TSA诱导的CD4^+CD25^+调节性T细胞对不明原因复发性流产的治疗作用
- 2012年
- 目的观察过继转输TSA诱导的CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)对不明原因流产的作用机制及妊娠预后的影响。方法以雌性CBA/J×雄性BALB/c为正常妊娠模型,以雌性CBA/J×雄性DBA/2J为自然流产模型,使用免疫磁珠方法分选雌性CBA/J小鼠脾脏CD4+CD25+Treg细胞,并使用流式细胞术检测分选纯度。采用TSA对流产孕鼠外周CD4+/CD25-T细胞Foxp3基因特定位点进行表观修饰,以实现Foxp3稳定、持久的表达,并将CD4+Treg分别转输至流产模型孕4d(着床期)的雌性CBA/J孕鼠,于孕14d分别观察宿主孕鼠的胚胎吸收率。结果与对照组比较,过继转输TSA诱导的CD4+CD25+Treg细胞的宿主孕鼠的胚胎吸收率(11.27%)显著下降。结论孕早期过继转输TSA诱导的CD4+CD25+Treg细胞疗法能诱导宿主母胎免疫耐受,有利于妊娠的维持。
- 齐彦赵富玺郭俊成穆雅琴王键殷治华冯婷婷
- 关键词:曲古菌素A过继转输胚胎吸收率
- 促胃泌素释放肽(GRP)与小鼠自然流产的关系
- 2010年
- 目的:研究促胃泌素释放肽(gastrin-releasing peptide,GRP)与自然流产的关系,进一步探讨GRP在妊娠过程中所起的作用。方法:建立小鼠正常妊娠模型(对照组)和自然流产模型(实验组),于妊娠13.5 d计算胚胎吸收率;采用免疫组织化学法测定各组GRP的表达情况。结果:实验组孕鼠的胚胎吸收率明显高于对照组,差异显著(P<0.05)。实验组的GRP表达率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:GRP参与正常妊娠过程,自然流产的发生可能与GRP的低表达有关。
- 穆雅琴赵富玺朱壮彦郭俊成
- 关键词:自然流产GRP免疫组织化学小鼠
- 宫颈脱落细胞中cyclin E和Ki67的表达及意义被引量:9
- 2006年
- 目的:探讨宫颈脱落细胞中cyclin E、Ki67的表达对宫颈癌高危人群筛查的意义。方法:采用免疫组化法对78例(不明意义的鳞状上皮非典型增生12例,宫颈上皮内瘤样痛变CINⅠ17例、CINⅡ~Ⅲ38例、浸润癌11例)宫颈脱落细胞标本进行cyclin E、Ki67检测。结果:cyclin E、Ki67在CINⅠ、CINⅡ~Ⅲ以及浸润癌标本中的阳性率均较ASCUS组高,差异有统计学意义,P〈0.005;CINⅠ组cyclin E的表达高于其他各组;Ki67的表达随着宫颈上皮细胞损伤程度加重而上升,浸润癌标本中阳性率最高;在CINⅠ组cyclin E和Ki672项指标特异度均为91.7%,灵敏度cyclin E(94.1%)高于Ki67(47.1%)。结论:采用宫颈脱落细胞检测cyclin E、Ki67作为辅助诊断指标应用于宫颈癌高危人群筛查,具有重要意义。
- 刘丽华赵富玺郭俊成崔克米亚英
- 关键词:细胞周期蛋白EKI-67抗原
- 促胃泌素释放肽在自然流产小鼠母胎界面作用
- 2011年
- 自然流产是妇产科常见病,育龄期妇女的发生率约为1%~2%,其中有50%原因不明。促胃泌素释放肽(gas-trin-releasing peptide,GRP)是一种与两栖类蛙皮素相似的物质,主要分布在哺乳动物胃肠系统、大脑、脑垂体、脊髓、交感神经节、泌尿生殖系统等组织。在人类妊娠阶段,GRP主要在胚胎绒毛滋养层、滋养层外绒毛和羊膜上皮细胞表达。
- 穆雅琴赵富玺朱壮彦郭俊成
- 关键词:自然流产免疫组化
- 乙酰肝素酶在人类妊娠过程中的作用研究被引量:2
- 2013年
- 目的:探讨乙酰肝素酶(heparanase,HPSE)与人类自然流产的关系及在正常妊娠和自然流产过程中所起的作用。方法:采用免疫荧光法和Western blot检测非意愿性正常妊娠者流产绒毛组织和早期自然流产者流产绒毛中HPSE的表达情况。结果:正常妊娠组的HPSE表达率明显高于自然流产组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HPSE参与正常妊娠的胚胎植入过程,自然流产的发生可能与HPSE的低表达、胚胎的低植入率有关。
- 穆雅琴朱壮彦郭俊成李拴明白光梅张艳霞赵富玺
- 关键词:妊娠自然流产乙酰肝素酶
- 不明原因复发性流产小鼠模型CD4^+CD25^+ Treg的比例及Foxp3表达的变化被引量:14
- 2012年
- 目的分析比较小鼠正常妊娠模型和流产模型中CD4+CD25+调节性T细胞CD4+CD25+Treg的比例、Foxp3蛋白表达水平及胎盘吸收率,探讨CD4+CD25+Treg与不明原因复发性流产的关系。方法以雌性CBA/J×雄性Balb/c为对照组,以雌性CBA/J×雄性DBA/2J为流产组,各10对,于妊娠第14天采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析CD4+CD25+Treg在CD4+细胞中所占比例,Western blot检测并比较2组CD4+T细胞中Foxp3的表达,并观察2组小鼠的胎盘吸收情况。结果流产组CD4+CD25+Treg所占比例为(10.1±0.59)%低于对照组(15.5±0.78)%(P<0.05)。流产组胚胎吸收率为(25.6±3.5)%,明显高于对照组(2.4±1.6)%(P<0.01)。流产组Foxp3谱带密度相对值为0.30±0.018,低于正常组的0.68±0.025(P<0.05)。结论小鼠的自然流产模型建立成功,流产组孕鼠CD4+CD25+Treg的比例和Foxp3蛋白表达水平明显低于正常妊娠组,提示流产组高流产率可能与CD4+CD25+Treg数量和Foxp3的表达减少有关,CD4+CD25+Treg细胞的数量减少和功能缺陷可能是不明原因复发性流产的发生机制之一。
- 冯婷婷郭俊成刘岳婷殷治华齐彦王健穆雅琴刘润花赵富玺
- 关键词:复发性流产CD4+CD25+调节性T细胞胚胎吸收率