辛海波
- 作品数：17 被引量：96H指数：6
- 供职机构：中国农业大学农学与生物技术学院观赏园艺与园林系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 百合MDHAR基因的克隆与表达分析被引量：7
- 2010年
- 抗坏血酸（ascorbic acid,AsA）作为植物细胞内重要的自由基清除剂,是通过参与一系列的氧化还原反应而发挥抗氧化剂的功能。单脱氢抗坏血酸还原酶（monodehydroascorbate reductase,MDHAR）在抗坏血酸-谷胱甘肽循环中，
- 陈莉辛海波李晓艳李晓昕义鸣放
- 关键词：铁炮百合克隆
- 铁炮百合的胚性愈伤组织诱导和植株再生被引量：16
- 2012年
- 以铁炮百合(又称麝香百合)杂种系品种‘White heaven'的组培苗叶片为外植体,研究了不同种类和浓度的激素对愈伤组织诱导和植株再生的影响,并通过叶片位置、接种方式以及光暗等不同处理进一步优化胚性愈伤组织的诱导。结果表明:以组培苗基部叶片为外植体,采用叶片近轴面向上的接种方式,在MS+1.0mg.L-12,4-D+0.1mg.L-16-BA的培养基上暗培养可诱导出胚性愈伤组织,诱导率可达65.74%;经石蜡切片鉴定可观测到球形胚和心形胚。最佳分化和生根培养基分别为MS+0.1mg.L-1NAA和1/2MS+0.5mg.L-1IBA,分化率达81.48%,生根率达91.67%。结果还显示2,4-D在百合胚性愈伤组织的诱导中起到了关键作用。
- 袁雪钟雄辉李晓昕辛海波连青龙义鸣放
- 关键词：铁炮百合石蜡切片胚性愈伤组织植株再生
- 唐菖蒲球茎脱落酸生物合成关键酶基因NCED的克隆及表达分析
- 9-顺式-环氧类胡萝卜素双氧合酶(Nine-cis-epoxycarotenoid dioxygenase,NCED)是脱落酸(Abscisic acid,ABA)生物合成途径中的一个关键酶。通过RT-PCR和RACE技...
- 罗弦易瑾连青龙辛海波钟雄辉张自由义鸣放
- 关键词：唐菖蒲克隆
- 文献传递
- 百合热激转录因子基因LlHSF1的克隆与表达分析被引量：8
- 2012年
- 以铁炮百合(Lilium longiforum)‘白天堂’的组培苗叶片为试材,通过RACE方法得到了一个热激转录因子(heat shock transcription factor,HSF)基因LlHSF1的cDNA全长序列。该序列全长1068bp,推断其含有一个780bp的开放阅读框(ORF),编码260个氨基酸,推导的蛋白质分子量为30.123kD。对推定的氨基酸序列与其它已知物种HSF进行比对发现,该基因有热激转录因子所具备的典型结构域和调控元件,据此推断,克隆到的基因是一个新的热激转录因子成员,命名为LlHSF1。荧光定量PCR分析结果表明:常温下该基因在百合根、鳞茎、叶中都有表达,但在叶片中表达量较高;实时荧光定量PCR分析结果表明,42℃处理1～12h,叶中该基因表达量增加。
- 易瑾罗弦曹兴陈莉辛海波李晓昕陈进义鸣放
- 关键词：百合铁炮百合热激转录因子荧光定量RT-PCR
- 铁炮百合热激转录因子基因克隆与表达分析被引量：4
- 2010年
- 以铁炮百合(Lilium longiforum)‘白天堂’为试材,通过RACE方法得到了一个热激转录因子(Heat shock transcription factor,HSF)A家族基因全长序列。该基因包含一个编码350个氨基酸的开放阅读框。对推定的氨基酸序列进行聚类分析,与已知的HSFA2同源性较高,据此推断,克隆到的基因是一个新的HSFA2成员。经过与功能明确的番茄和拟南芥HSFA2序列比对分析,该基因有热激转录因子所具备的典型结构域和调控元件。RT-PCR分析该基因时空表达模式的结果表明:37℃条件下处理1h,根、鳞茎、叶中能检测到其表达,叶片37℃处理0.5～12h均可检测到表达。
- 辛海波陈莉李晓燕何秀丽义鸣放
- 关键词：百合热激转录因子热激耐热性
- 农杆菌介导的唐菖蒲遗传转化体系的建立被引量：6
- 2011年
- 在唐菖蒲‘Advanced Red’胚性愈伤组织受体系统的基础上,建立其遗传转化体系。采用根癌农杆菌(GV3101)介导法,研究了侵染液浓度、侵染时间、乙酰丁香酮(AS)浓度、负压和筛选方式等因子对唐菖蒲遗传转化效率的影响。结果表明:在遗传转化过程中,不经预培养,负压处理下,农杆菌菌液OD600为0.6～0.8,侵染时间15～20min,添加100μmol/L AS,共培养3d,可获得较高的遗传转化效率。经过3～4个月选择培养,部分抗性植株经PCR和Southern杂交检测表明,目的基因gus已整合到唐菖蒲基因组中。
- 张自由连青龙辛海波钟雄辉罗弦义鸣放
- 关键词：唐菖蒲GUS根癌农杆菌
- 唐菖蒲脂氧合酶基因GhLOX1对球茎膨大的影响被引量：1
- 2012年
- 以唐菖蒲(Gladiolus hybridus)品种'Rose Supreme'的球茎为试材,应用Real time RT-PCR技术,分析唐菖蒲球茎在不同浓度的茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MJ)0.1、0.2、0.5mmol·L-1和水杨酸异羟肟酸(salicylhydroxamic acid,SHAM)0.5、0.75、1.0mmol·L-1处理后脂氧合酶(LOX)基因的的表达水平,并且对LOX活性、内源MJ含量以及球茎鲜样质量与体积进行测定。分析结果表明,GhLOX1表达水平、脂氧合酶活性、内源MJ含量以及球茎的鲜样质量与体积均随着MJ浓度的增加而逐渐提高。与此相反,经过不同浓度的LOX抑制剂SHAM处理后,以上各项指标随着SHAM浓度的增加而逐渐降低。同时,构建35S-GhLOX1过表达载体,利用根癌农杆菌介导法将GhLOX1导入马铃薯栽培品种'中薯3号'的试管薯薄片中,转基因马铃薯植株块茎的数量、体积和鲜样质量分别得到了不同程度的提高。
- 连青龙辛海波李晓昕钟雄辉尹义蕾义鸣放
- 关键词：唐菖蒲脂氧合酶茉莉酸甲酯
- 唐菖蒲2种主要病毒的多重RT-PCR检测被引量：4
- 2011年
- 根据黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV)和烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)外壳蛋白基因序列分别设计特异性引物对,运用单重RT-PCR检测到病毒并筛选出适合多重RT-PCR的引物对。以唐菖蒲18S rRNA为内参照,建立同时检测CMV和TMV的多重RT-PCR方法。此方法可从带病样品中扩增出CMV(629bp)和TMV(423bp)2条特异片段。测序结果表明:CMV扩增产物与其他植物分离物核苷酸的同源性为93%～97%,TMV扩增产物与其他分离物核苷酸的同源性可达99%。
- 胡小燕陈莉辛海波连青龙义鸣放
- 关键词：唐菖蒲多重RT-PCR黄瓜花叶病毒烟草花叶病毒
- 百合鳞片薄层细胞培养高效再生体系的建立被引量：8
- 2009年
- 为了建立适宜百合遗传转化的受体系统,以铁炮百合品种白天堂无菌苗的叶片和鳞片为外植体,薄层切割后接种于添加不同植物激素的培养基上,观察其植株再生情况,并对其建立的再生体系的遗传转化前景进行了分析比较。结果表明,叶片薄层细胞几乎没有再生能力;2,4-D和Picloram均可诱导横向薄层鳞片细胞直接产生鳞茎芽,最适的培养基是MS+2,4-D 0.002 mg/L,在30 d内就可直接诱导出鳞茎芽,再生率达到100%,平均出芽数为2.38;MS+TDZ 0.4 mg/L+NAA 0.5 mg/L可以诱导横向薄层鳞片细胞产生愈伤。综合考虑,百合鳞片薄层培养以MS+2,4-D 0.002 mg/L诱导的直接再生体系为最佳的再生体系。
- 李晓艳陈莉辛海波义鸣放
- 关键词：百合鳞片
- 唐菖蒲GhAOS基因的表达特性及其在拟南芥中的过表达分析被引量：1
- 2012年
- 【目的】分析唐菖蒲AOS基因的表达模式及其对JAs生物合成的影响,研究GhAOS基因对伤害胁迫的应答机理。【方法】利用基因枪的方法进行GhAOS的亚细胞定位分析;运用Real-time RT-PCR技术分析GhAOS基因的表达模式,采用农杆菌介导的侵染拟南芥花粉法进行GhAOS基因的过表达分析。【结果】GhAOS定位在叶绿体的内囊体膜上;该基因在唐菖蒲各组织中均表达,其中在籽球和匍匐茎中表达量最高;经过0.1—0.5 mmol.L-1的茉莉酸甲酯(MJ)处理后,逐渐提高了GhAOS在球茎中的表达量和内源MJ含量;在拟南芥中过量表达该基因,提高了拟南芥的耐盐性和抗旱性;经过机械损伤后提高了转基因拟南芥相关基因的表达水平和内源MJ含量。【结论】GhAOS促进了唐菖蒲茉莉酸类化合物(JAs)的生物合成,提高了拟南芥的耐盐性和抗旱性;转基因拟南芥机械损伤后提高了相关抗性基因的表达水平以及内源MJ的含量。
- 连青龙辛海波李晓昕钟雄辉尹义蕾义鸣放
- 关键词：唐菖蒲MJ过表达
