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巢式PCR扩增诊断播散性毛孢子菌病: 目的探讨了应用PCR技术诊断播散性毛孢子菌病的可行性。方法建立动物模型后,于接种3、7、14 天分别采集小鼠眶静脉血和肝脏组织标本,进行真菌培养和巢式PCR扩增。结果小鼠静脉接种3、7、14 天后血清培养的阳性率分别为0...; 杨蓉娅赵逊王文岭敖俊红郝震锋张洁王聪敏; 文献传递

大鼠系统性毛孢子菌病模型3种体液标本(1,3)-β-D-葡聚糖检测被引量：7: 2007年; 目的观察(1,3)-β-D-葡聚糖检测,在大鼠系统性毛孢子菌病模型不同体液标本中的意义。方法建立大鼠系统性毛孢子菌病模型,收集不同时间的支气管肺泡灌洗液、血浆和尿液标本,采用G试验测定(1,3)-β-D-葡聚糖,同时进行巢式PCR(nPCR)检测和真菌学培养。结果感染早期(10 d)血浆、支气管肺泡灌洗液、尿液标本G试验敏感性分别为80.00%、86.67%、6.67%,前两者与对照组比较差异有统计学意义;30只实验大鼠血浆标本G试验平均敏感性为76.76%,nPCR法为68.85%、血真菌培养为3.33%,G试验结果与血真菌培养相比差异有统计学意义(P<0.05);血浆(1,3)-β-D-葡聚糖浓度值(pg/ml)与感染的脏器数目呈正相关(┃r┃>0.7,P<0.05)。结论对血浆、支气管肺泡灌洗液等标本进行(1,3)-β-D-葡聚糖检测,有助于系统性毛孢子菌病的临床早期诊断、判断感染范围和疾病转归的评价。; 祝贺杨蓉娅王文岭樊昕赵逊王聪敏

巢式PCR检测阿萨希丝孢酵母DNA被引量：5: 2006年; 阿萨希丝孢酵母（Trichosporon asabii,T.asahii）是引起毛孢子菌病的主要病原菌。我们在2000年报道了国内首例播散性毛孢子菌病,其后在另一家医院也发现肺部T.asahii感染。该病不仅可有广泛的皮肤损害，还可引起肝、脾、肾、肺等内脏损害，死亡率高达80％以上。由于该病少见，临床医生很少将皮损活检标本及肝穿组织直接送做真菌培养，而多首选普通病理检查。在患者需要补充检查和回顾性诊断时，蜡块组织往往是惟一可以得到的标本。因此，如能通过蜡块组织扩增T.asahii DNA特异性片段来诊断T.asahii感染具有重要的临床意义。; 赵逊杨蓉娅王文岭敖俊红郝震锋张洁王聪敏; 关键词：阿萨希丝孢酵母巢式PCR检测 DNA 播散性毛孢子菌病蜡块组织主要病原菌

巢式PCR扩增石蜡切片中阿萨希丝孢酵母DNA: 目的探索利用PCR技术检测石蜡切片中阿萨希丝孢酵母(Trichosporon asahii,T．asahii)DNA的可行性。方法每个蜡块组织各切片10张,5张用于PAS染色,另5张脱蜡后提取DNA,巢式PCR扩增,琼脂...; 杨蓉娅赵逊王文岭敖俊红郝震锋张洁王聪敏; 文献传递

DC-SIGN基因在阿萨希毛孢子菌小鼠皮肤感染时的表达与调控被引量：2: 2008年; 目的了解树突细胞C型凝集素(DC-SIGN)是否参与了皮肤毛孢子菌感染过程中的免疫应答。方法25只BALB/C小鼠备皮后皮下接种3.2×107cfu/ml的阿萨希毛孢子菌悬液,分别于接种后1、3、7、14d处死小鼠,切取皮损,RT-PCR检测皮肤毛孢子菌感染过程中DC-SIGN mRNA的表达,基因芯片技术观察免疫相关基因的改变。结果皮下接种后3、7、14d接种侧皮肤组织标本可扩增出DC-SIGN目的片段,而未接种侧皮肤组织标本均未扩增出DC-SIGN目的片段。补体C2、前列腺素EP4受体、肿瘤坏死因子诱导蛋白cg12-1(CG12-1)、干扰素诱导蛋白(Ifit3)、淋巴细胞抗原6复合物、CD53抗原、CD22抗原等下调。结论DC-SIGN参与了皮肤毛孢子菌的感染过程,它不仅抑制Th1型细胞免疫,而且可抑制前列腺素EP4受体及部分补体因子等,从而导致皮肤毛孢子菌感染的慢性化。; 王文岭杨蓉娅郝震锋敖俊红赵逊张洁王聪敏; 关键词：毛孢子菌属反转录聚合酶链反应

阿萨希丝孢酵母cph1基因DNA序列分析被引量：2: 2007年; 目的明确阿萨希丝孢酵母菌(TAS)是否存在与菌丝形成调控相关的cph1基因,分析其核苷酸序列,为进一步对其功能研究奠定基础。方法用简易微量DNA提取方法从TAS中提取细胞总DNA,根据GenBank中白色假丝酵母菌(CAL)cph1基因设计多对引物,PCR方法扩增,纯化后用ABI377核苷酸测序仪对扩增产物进行克隆测序,并对测序结果进行分析。结果在29对引物中只有1对引物从TAS中扩增出长度为827 bp的基因片段,BLAST分析表明与CAL cph1基因的同源性为97.3%。结论本实验首次明确TAS cph1基因中的827个碱基序列,为进一步对该基因全序列的分析及功能研究奠定了基础。; 夏志宽杨蓉娅王文岭樊昕王聪敏赵逊

巢式PCR扩增诊断播散性毛孢子菌病的动物实验研究: 2006年; 目的探讨应用PCR技术诊断播散性毛孢子菌病的可行性。方法建立动物模型后,于接种3、7、14 d分别采集小鼠眶静脉血和肝脏组织标本,进行真菌培养和巢式PCR扩增。结果小鼠静脉接种3、7、14 d后血清培养的阳性率分别为0、20%、0,而巢式PCR的阳性率分别为80%、90%、88.9%;在上述时相点,肝脏组织真菌培养阳性率分别为50%、40%、22.2%,而巢式PCR的阳性率分别为90%、90%、88.9%。血清和肝脏组织真菌培养阳性率与巢式PCR阳性率差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论巢式PCR扩增T.asahii特异性DNA片段,可作为播散性毛孢子菌病的一种特异、灵敏、快捷的早期诊断手段。; 杨蓉娅赵逊郝飞; 关键词：播散性毛孢子菌病

rRNA基因序列分析在阿萨希毛孢子菌鉴定中的应用被引量：4: 2008年; 作者对近年有关毛孢子菌属rRNA分析的研究进行了综述,目前的研究结果表明rRNA的26S亚基的D1/D2区、ITS和IGS区的序列分析对毛孢子菌属的鉴定均有一定价值,其中ITS转录间区与18S、5.8S以及26S相比具有较高的特异性;IGS区序列分析优于ITS区序列分析;IGS1区优于IGS2区。; 夏志宽赵逊王文岭杨蓉娅; 关键词：毛孢子菌属阿萨希毛孢子菌 RRNA

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赵逊