詹林盛
- 作品数：113 被引量：355H指数：9
- 供职机构：军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学一般工业技术自动化与计算机技术更多>>
- 杀伤细胞受体KIR3DS1胞外区的表达及纯化
- 2010年
- 目的表达并纯化杀伤细胞受体KIR3DSl胞外区。方法采用定向克隆的方法将KIR3DS1胞外区基因连接到pET28a-DsbA载体上,成功构建pET28a-DsbA/KIR3DS1重组质粒。将重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导DsbA-KIR3DS1融合蛋白表达,溶解于8M尿素中的包涵体经Ni-NTA琼脂糖亲和层析纯化,成功进行复性,再经Su-perdex75凝胶层析柱进一步纯化,SDS-PAGE和Western blot鉴定目的蛋白的表达及纯化。结果表达产物呈部分可溶性表达,包涵体纯化后证实获得纯度>95%的DsbA-KIR3DS1融合蛋白。结论 KIR3DS1胞外区的成功表达及纯化,为进一步研究KIR3DS1与相应配体之间相互作用奠定了基础。
- 李晖付秋霞周勇詹林盛王全立钟森
- 关键词：杀伤细胞受体原核表达蛋白纯化
- 输血及细胞治疗的可视化评价技术研究被引量：3
- 2017年
- 输血医学已正式成为我国临床医学二级学科,对输血医学科研能力和水平提出了更高的要求,输血医学科研工作已成为输血医学学科发展的内在动力。近年来我国输血科研工作取得了显著的成绩,但与其他学科相比,还有一定的差距。如何培育输血医学新的增长点是广大输血医学科研工作者需要思考的问题。当今生命科学研究从以免疫学、分子生物学为主导的经典科学向前沿学科、高新技术相交叉融合的方向拓展,可视医学、大数据、
- 詹林盛
- 关键词：输血细胞治疗
- 利用萤光素酶标记的肿瘤细胞建立肝癌原位移植模型及其活体成像被引量：9
- 2008年
- 目的:利用生物发光成像技术非侵入性地监测活体裸鼠原位肝癌发展过程。方法:将包含有萤火虫萤光素酶基因的pCI-neo-Luc载体转染人肝癌HepG2细胞系,筛选获得具有高萤光素酶活性的细胞克隆;利用流式细胞仪对萤光素酶表达的稳定性进行初步研究,并分析细胞的生物发光情况;持续表达萤光素酶的肿瘤细胞培养扩增后被植入裸鼠皮下,2周后以形成的异体瘤作为供体瘤,进行肝脏原位移植手术;对建立的肝癌原位移植模型,用影像学资料显示肿瘤部位,用IVIS成像系统动态监测肿瘤生长情况。结果:体外影像的结果显示,表达萤光素酶细胞的数量与发光强度呈正相关;活体成像的结果显示,成功地建立了萤光素酶标记的原位肝癌动物模型。结论:生物发光成像可以监测活体内肝癌演进过程,为抗肿瘤药物的筛选和评价提供了新的手段和工具。
- 孙萍王怡孙志东彭剑淳周勇詹林盛
- 关键词：生物发光成像萤光素酶原位肝癌
- 丙型肝炎病毒核心蛋白寡核苷酸适配子的筛选与鉴定被引量：14
- 2002年
- 目的 筛选、鉴定抗HCV核心蛋白 (C蛋白 )的寡核苷酸适配子 (aptamers)。方法 利用systematicevolutionofligandsbyexponentialenrichment (SELEX)技术 ,以HCVC蛋白为靶分子 ,从体外合成的 81bp随机单链DNA文库中筛选与HCVC蛋白特异结合的寡核苷酸适配子 ,并进行了解离常数 (Kd)测定和适配子序列测定。再分别利用ClustalW软件包和DNAFoldingSever分析适配子的一级结构和二级结构。结果 经过 9轮循环筛选 ,随机ssDNA库与HCVC蛋白的结合率从 0 .5 %上升到32 .5 %。所有的一级结构没有共同的同源序列 ,但可分 5个家族 ,每个家族具有共同的保守序列。二级结构分析表明 ,适配子形成的茎环、凸环结构可能是与HCVC蛋白结合的结构基础。其中寡核苷酸适配子C4与HCVC蛋白特异结合的亲和力最高 ,Kd值为 6 8nmol L。
- 詹林盛孙红琰彭剑淳邵宁生王全立
- 关键词：丙型肝炎丙型肝炎病毒核心蛋白SELEX技术
- 活体荧光成像监测caspase-3蛋白酶的活性
- 2013年
- 目的利用生物发光技术,在细胞体系中实时监测caspase-3蛋白酶的活性,为细胞凋亡研究以及进行抗凋亡药物的筛查、评价提供技术支持。方法利用萤火虫荧光素酶作为细胞内凋亡发生的报告基因,构建载体,转染细胞,药物诱导细胞凋亡,利用活体荧光成像和Western印迹检测caspase-3蛋白酶的活性。结果成功建立了一种实时、动态、方便简单的检测caspase-3蛋白酶活性的细胞模型。结论该细胞模型为细胞水平上进行细胞凋亡的研究以及抗凋亡药物的筛查提供了技术平台。
- 段相国付秋霞阎少多王礼翠张玉华周勇詹林盛丁剑冰
- 关键词：半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3细胞凋亡
- 体内监测HBV特异性CTLs功能的报告基因标记的小鼠模型及其构建方法与应用
- 本发明公开了一种体内监测HBV特异性CTLs功能的报告基因标记的小鼠模型及其构建方法与应用。其构建方法包括以下步骤：1)载体构建：构建包括HBV启动子、报告基因和HBV全基因组的重组表达载体；2)将步骤1)构建的重组表达...
- 詹林盛杜娟梁声强
- 活体荧光成像在体实时监测病毒与宿主免疫系统的相互作用
- 目的:建立基于小动物光学分子影像的肝炎病毒与宿主免疫系统相互作用的实时动态监测平台,在活体水平挖掘出病毒与宿主在同一时间和空间相互作用的动态信息。方法:充分发挥小动物活体生物荧光和化学发光成像技术的优势,通过对分子成像报...
- 詹林盛
- 关键词：分子成像肝炎病毒
- 文献传递
- siRNA抑制丙型肝炎病毒IRES介导的基因表达被引量：16
- 2004年
- 以HCVIRES为靶位 ,应用T7RNA多聚酶体外转录合成了 5条小干扰RNA(siRNA) .脂质体转染法将其导入HCVIRES介导萤光素酶表达的转基因细胞 (HepG2 .970 6 )中 ,通过测定萤光素酶的量 ,评价T7siRNA对HCV介导基因表达的抑制作用 .结果表明 ,所合成的 5条T7siRNAs ,均能特异性地抑制萤光素酶基因的表达 ,抑制率分别为 94 31%、80 0 1%、78 0 1%、80 33%、85 6 4% ,其中以靶向HCVIRES第二茎环结构的T7siRNA1抑制率最高 ,且对HCV基因的抑制作用有剂量依赖性 ,随T7siRNA1量的增加 ,抑制率逐渐增强 .siRNA抑制HCV基因的作用具有良好的特异性 ,改变其中 1个核苷酸即无显著抑制作用 .
- 饶林詹林盛彭剑淳王全立
- 关键词：RNA干涉T7萤光素酶内部核糖体进入位点丙型肝炎病毒
- SEN病毒中国分离株基因克隆及序列分析
- 2003年
- 目的 :测定SENV_D亚型中国分离株的基因组序列 ,并对其进行初步分析。方法 :根据国外已发表的SEN病毒基因序列设计特异性引物 ,应用套式PCR方法从一份非甲_非戊型 (non_A_E)肝炎患者血清中 ,分段扩增了包括SENV_D型所有编码区 (ORFs)长 3175bp的DNA片段 ,将其克隆到T载体后测序。结果 :测序结果经BLAST软件分析 ,与国外发表的 3株D型SEN病毒SENV_D(AX0 2 5 730 ) ,SENV_D(AB0 5 935 2 ) ,TTV(AB0 2 86 6 8)的核苷酸序列同源性分别为 90 % ,88%和 91% ;与 2株D型SEN病毒SENV_D(AX0 2 5 730 ) ,TTV(AB0 2 86 6 8)ORF1所编码蛋白的氨基酸同源性分别为 93%和 92 %。ORF1蛋白中含有Rep蛋白 (在病毒复制中起作用的一种蛋白 )的两个保守基序 ,此外还有一个保守的ATP GTP结合基序 (P_loop)以及若干个高度保守的蛋白激酶磷酸化位点。结论 :测定得到了SENV_D亚型中国分离株的基因组序列 ,有助于其检测方法及致病性的研究 ,并为研究SEN病毒的进化地位提供方便。
- 杜娟王海平孟庆华李娅詹林盛王全立
- 关键词：基因组病毒SEN病毒聚合酶链反应
- 血液安全与保障——军事医学科学院输血研究进展被引量：6
- 2011年
- "血液安全及保障"是个永恒的主题,军事医学科学院从建院之初到现在的60年间,开展了包括血液采集、检验,血液筛查、制备、储存、运输、输注及新型血源开辟等多个方面的研究.从20世纪50年代初的血浆代用品开始,先后在输血传播(病毒)传染病的检测、相关灭活方法与装置、临床输血安全、血液制品与代用品及其新型血液成分等方面均取得了良好的进展,形成了一系列理论、技术、产品、装置与标准,力求为形成整体、灵活、精确、高效、优质的安全血液供应链提供科技支撑.
- 周虹王全立詹林盛许金波章金刚王字玲宫锋岳文
- 关键词：血液质量血液制品血液代用品输血治疗
