荣俊
- 作品数：82 被引量：132H指数：6
- 供职机构：长江大学更多>>
- 发文基金：湖北省教育厅资助项目湖北省科技攻关计划湖北省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- IBDV VP2基因重组质粒pBV220表达条件的优化被引量：3
- 2007年
- 采用三角瓶小量法振荡培养，对含传染性法氏囊病病毒VP2基因的重组质粒pBV220在大肠埃希菌BL21内表达条件进行优化。在37。C时诱导，对起始OD600值（0．40±0．025～0．65±0．025）进行筛选；在42℃时诱导，对起始OD600值（O．40±0．025～0．65±0．025）进行筛选；在37℃和42℃时诱导，分别对诱导时间（5、6、7、8h）及待选培养基（R1、R2、R3）进行筛选。以菌体湿重和菌体VP2蛋白表达水平两个指标进行统计分析及综合评价。结果表明，37℃时诱导，最适宜起始OD600为0．45±0．025，最佳诱导时间为7h，最佳培养基是R1；42℃时诱导，最适宜起始OD600为0．40±0．025，最佳诱导时间为5h，最佳培养基是R2。42℃时的每一诱导时间组菌体湿重和VP2表达水平都显著低于37℃时。因此，以重组质粒pBV220的大肠埃希菌BL21表达IBDVVP2基因，在37℃时诱导表达要比42℃时好。
- 程太平荣俊刘晓娜邹浩勇齐晓亮樊友净
- 关键词：传染性法氏囊病病毒PBV220
- 副猪嗜血杆菌sodA基因的表达及其理化性质
- 2021年
- 为探究副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)sodA基因编码的超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)的活性及理化性质,设计特异性引物从HPS中扩增得到目的基因sodA,利用原核表达系统对HPS SOD蛋白进行表达,通过硫酸铵分级沉淀、Sephacryl S-300凝胶过滤层析以及DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析等方法对表达蛋白进行了分离纯化,利用邻苯三酚自氧化法对纯化产物进行SOD酶活性检测,通过HPSEC法、火焰原子吸收分光光度法对其理化性质进行了初步探究。结果表明,表达的重组HPS SOD蛋白质为可溶性蛋白质,单亚基分子质量为26 ku,纯化后目的蛋白质纯度为95%,纯化后的重组HPS SOD蛋白质比活性为215.9 U/mg,经HPSEC法检测分析,重组HPS SOD呈多聚体,通过火焰原子吸收分光光度法检测纯化的重组HPS SOD中锰元素含量为0.71 mg/L。
- 胡基雄王席李国攀荣俊
- 关键词：超氧化物歧化酶邻苯三酚自氧化法
- 新城疫和传染性法氏囊病二联疫苗的免疫效力研究
- 2008年
- 以LaSota系新城疫(ND)病毒制成ND弱毒疫苗,以含传染性法氏囊病(IBD)病毒VP2基因重组质粒pET28a/VP2的大肠杆菌BL21制成IBD重组活载体疫苗,将ND弱毒疫苗和IBD重组活载体疫苗组建ND-IBD二联疫苗。将试验鸡分成8个组,分别肌肉注射接种ND弱毒疫苗I、BD重组活载体疫苗和ND-IBD二联疫苗。最后一次接种后第10天,对所有试验鸡进行采血,分离血清,以病毒血凝抑制试验(HI)及琼脂免疫扩散试验检测NDV抗体和IBDV抗体。对NDV HI抗体阳性率进行2χ检验及对NDVHI效价进行方差分析,结果对照组与其他4组之间差异均显著(P<0.05),而试验组(B、C、D、E)4组之间差异均不显著(P>0.05)。对IBDV抗体阳性率进行2χ检验及对IBDV沉淀抗体滴度进行方差分析,结果在A、B、F 3组之间差异不显著(P>0.05),在C、D、G、H 4组之间差异不显著(P>0.05);而A、B、F 3组与C、D、G、H 4组之间差异显著(P<0.05)。试验表明,在诱导雏鸡体液免疫应答方面,ND-IBD二联疫苗与ND弱毒疫苗和IBD重组活载体疫苗具有同样的效力。
- 程太平荣俊
- 关键词：新城疫传染性法氏囊病联苗免疫效力
- 黑曲霉尿酸氧化酶基因克隆及在大肠杆菌中的表达
- 2016年
- 目的：为大量生产医用尿酸氧化酶，对一个黑曲霉菌株的尿酸氧化酶基因进行了克隆和在大肠杆菌中的异源表达。方法：基因测序结果显示，克隆的黑曲霉尿酸氧化酶基因全长为909bp，编码302个氨基酸残基。SDS-PAGE和非变性电泳分析结果显示，单体酶分子量在35～37kDa之间；表达过程中酶蛋白分子自我组装成4聚体蛋白，聚合体蛋白的表观分子量为140～150kDa。结果：酶蛋白在大肠杆菌细胞液中表达，产物几乎完全以水溶状态存在，最佳溶解pH为8．0。最佳酶促反应温度为35℃。经过诱导表达后的菌体，按照1：20（质量／体积）比例重悬于最优缓冲液中，进行超声波破碎后，粗酶液活力为67．69IU／mL，比活性为47．00IU／mg。结论：提供了一个微生物来源尿酸氧化酶新的获取方法。
- 卢苇荣俊匡红艳余知和
- 关键词：尿酸氧化酶黑曲霉
- 一株禽腺病毒4型Fiber2蛋白单克隆抗体的制备被引量：2
- 2022年
- 制备禽腺病毒4型(FAdV-4)Fiber2蛋白的特异性单克隆抗体,将重组蛋白FAdV-4 Fiber2纯化后作为免疫原免疫BALB/c小鼠,分离脾脏中的淋巴细胞,与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,筛选得到10株能稳定分泌抗FAdV-4 Fiber2蛋白单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株1B5F1、1B5G11、1B5C1、1B5D2、1B5E3、1B5F3、1B5E4、1B5G4、1B5A8、1B5G8,取分泌抗体水平最高的1B5F1细胞株制备腹水,利用斑点杂交(Dot blot)和间接免疫荧光试验(IFA)进行特异性检测。结果表明,成功制备10株杂交瘤细胞株;制备的腹水能与FAdV-4 Fiber2蛋白及FAdV-4攻毒后的鸡肝组织产生特异性反应,证明成功制备了FAdV-4 Fiber2蛋白特异性单克隆抗体。
- 谢明李国攀胡基雄张志翔艾笑扬陈帝斯李杨尹俊翔荣俊
- 关键词：单克隆抗体
- 传染性法氏囊病沉淀抗体水平与免疫保护关系的研究被引量：2
- 2005年
- 以传染性法氏囊病(IBD)基因工程重组亚单位油乳剂疫苗及其重组活载体疫苗实验室试制品免疫SPF鸡,以法氏囊眼观病变及法氏囊中IBDV抗原检测结果来评定免疫保护效力。结果血清IBDV沉淀抗体水平达到1/8的鸡能抵抗IBDV强毒的攻击,低于1/4的部分鸡不能抵抗IBDV强毒的攻击。经t检验,在以血清IBDV沉淀抗体水平≥1/8所得百分率、血清IBDV沉淀抗体水平≥1/4所得百分率、法氏囊眼观变化正常鸡只百分率及法氏囊中IBDV抗原检测的阴性率之间差异都不显著。表明以血清IBDV沉淀抗体水平≥1/4所得百分率与法氏囊中IBDV抗原检测的阴性率和法氏囊眼观变化正常鸡只百分率一样,适用于评定攻毒免疫保护效力。
- 程太平谢耀庭杨晓林荣俊张地张磊邹浩勇王怀林佘全初王成举
- 关键词：传染性法氏囊病免疫保护
- 一种用大肠杆菌生产鸡传染性法氏囊病基因工程亚单位疫苗的方法
- 本发明涉及一种用于鸡传染性法氏囊病基因工程亚单位疫苗生产的菌种和用该菌种生产鸡传染性法氏囊病基因工程亚单位疫苗的方法，该菌种的特征是：Escherichia coli BL21/pBV220－VP2，CCTCC NO：M...
- 荣俊程太平刘晓娜杨待建
- 文献传递
- 多杀性巴氏杆菌C48-16电转化条件的研究被引量：1
- 2007年
- 将C48-16感受态细胞和带有标记基因的质粒DNA混和后进行电转化,通过改变脉冲电压、脉冲次数和质粒DNA浓度等电转化的重要参数,探讨了巴氏杆菌(Pasteurella multocida)C48-16的电转化条件。结果显示:最佳脉冲电压为2.4～2.5kV,最佳脉冲次数为1～2。质粒DNA浓度为58～1.16×102μg/mL转化子最多。所有转化子经标记基因PCR鉴定为阳性克隆子。此方法与常规化学转化法相比操作简单、快速且转化成功率更高。
- 熊萍萍荣俊
- 关键词：电转化脉冲
- 传染性法氏囊病重组亚单位疫苗免疫持续时间的研究
- 2008年
- 以三批次传染性法氏囊病(IBD)重组亚单位疫苗分别免疫SPF雏鸡和产蛋鸡,以琼脂免疫扩散试验检测鸡血清抗体或卵黄抗体,以其阳性率达到80%为免疫期确定依据。试验结果表明,IBD重组亚单位疫苗对青年鸡及产蛋鸡接种一次的免疫期为15～16周。
- 程太平荣俊刘晓娜孙中杰
- 关键词：传染性法氏囊病重组亚单位疫苗
- 重组猪尿酸氧化酶PEG化修饰的影响因素考察被引量：2
- 2013年
- 目的:考察mPEG-SC与重组猪尿酸氧化酶(recombinant porcine urate oxidase,rPUOX)摩尔比值,碳酸缓冲液pH值和浓度,以及酶浓度对rPUOX PEG化的影响。方法:用mPEG-SC对纯化rPUOX进行PEG化修饰。通过酶残余活力测定和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对修饰效果进行评估。结果:随着mPEG-SC/rPUOX摩尔比值的提高,修饰程度也提高。在pH 10.1及其以下的碳酸缓冲液中rPUOX修饰不充分,pH 10.5修饰效果最好,pH 11.6效果下降。碳酸缓冲液为0.02 mol.L-1时,rPUOX溶解不完全,0.06和0.1mol.L-1的溶解和修饰均比较理想,0.1 mol.L-1溶液中rPUOX残余活力较高。摩尔比值相同的条件下,随着酶浓度的提高修饰效果也提高,5 mg.mL-1的酶浓度更加适合修饰反应。结论:优化的rPUOX PEG化的条件是:mPEG-SC/rPUOX摩尔比值为18.6倍;碳酸缓冲液的pH值为10.5,浓度为0.1 mol.L-1;酶质量浓度为5 mg.mL-1。
- 朱莹莹荣俊匡红艳孙中杰
- 关键词：PEG化PH
