罗龙飞
- 作品数：9 被引量：9H指数：2
- 供职机构：武汉大学人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 人真皮网状层成纤维细胞在瘢痕疙瘩皮损组织中的表达与分布
- 2021年
- 目的探讨人真皮乳头层成纤维细胞(Fp)、网状层成纤维细胞(Fr)和肌成纤维细胞(MFB)在瘢痕疙瘩皮损组织中的表达与分布。方法2019年5-12月在武汉大学人民医院皮肤科门诊确诊的15例瘢痕疙瘩患者,男8例,女7例,年龄20~50岁,取皮损组织,以15例年龄匹配的女性乳房整形术正常皮肤组织为对照。采用双重免疫荧光染色法检测成纤维细胞活化蛋白(FAP)、CD90和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中的分布。从3例正常皮肤和3例瘢痕疙瘩组织中分离成纤维细胞原代培养,采用10 ng/ml转化生长因子β1(TGF-β1)体外处理两组细胞0~48 h,观察细胞表型的变化,荧光定量RT-PCR和Western印迹检测FAP、CD90和α-SMA mRNA和蛋白表达。两组间差异比较采用t检验。结果免疫荧光结果显示,正常皮肤组织中,FAP+/CD90-细胞主要分布在真皮浅层,FAP-/CD90+细胞集中在真皮深层,CD90+细胞几乎不表达α-SMA;瘢痕疙瘩组织深层可见大量FAP+和CD90+细胞,大量CD90+细胞同时表达α-SMA。双重免疫荧光染色显示,正常皮肤成纤维细胞几乎不表达α-SMA,瘢痕疙瘩成纤维细胞表达α-SMA;TGF-β1处理24 h时,正常成纤维细胞和瘢痕疙瘩成纤维细胞α-SMA+细胞荧光强度(21.058±0.709、27.112±0.097)均高于未处理组(11.312±0.636、21.306±0.464),t值为22.430、13.370,P<0.05。RT-PCR和Western印迹显示,TGF-β1处理48 h时,瘢痕疙瘩成纤维细胞FAP、CD90、α-SMA mRNA相对表达水平(92.610±3.667、1.366±0.105、3.240±0.141)与蛋白表达水平(0.652±0.073、1.046±0.119、0.946±0.117)均高于处理前(均P<0.05)。结论瘢痕疙瘩组织真皮深层的CD90+(Fr)细胞异常增生,提示针对真皮深层异常增殖活跃的FAP-/CD90+(Fr)细胞群进行定向干预可能提高瘢痕疙瘩治疗疗效。
- 韩冰玉雷铁池江珊罗龙飞胡双海廖志锴邱勰
- 关键词：瘢痕疙瘩成纤维细胞肌成纤维细胞CD90Α平滑肌肌动蛋白
- 白细胞介素-8对体外培养人皮肤移植物中黑素细胞增殖的影响
- 2022年
- 目的:探究白细胞介素(IL)-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α和IL-17A促炎因子对体外培养的皮肤移植物中黑素细胞(MC)增殖的影响。方法:建立气-液界面培养人皮肤移植物模型,采用常规苏木精-伊红(HE)染色观察培养后不同时间(第0、2、3、5天)人皮肤移植物组织结构的完整性和细胞存活状态。将皮肤组织分为对照组、IL-8组、TNF-α+IL-17A组和TNF-α+IL-17A+IL-8组,培养48 h后,采用HE染色观察表皮的增殖与分化;采用抗HMB45抗体免疫荧光染色观察MC数目;采用CCK8细胞增殖检测试剂盒测定MC的增殖率。结果:皮肤移植物在气-液界面培养第5天,表皮与真皮界面仍保持其完整性,且未见表、真皮分离。与对照组相比,TNF-α+IL-17A组皮肤移植物的角质层明显增厚(P<0.05),且可明显观察到角化不全,与银屑病皮损组织病理改变相似。IL-8组和TNF-α+IL-17A+IL-8组中HMB45阳性细胞数目均较对照组明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。采用体外培养的PIG1细胞验证IL-8对MC的促增殖作用,结果示与对照组比较,IL-8组中MC细胞增殖率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:银屑病相关促炎因子TNF-α及IL-17A对IL-8促MC增殖存在协同刺激作用。
- 姚云竹江珊罗龙飞雷铁池
- 关键词：白细胞介素-8黑素细胞增殖
- 二苯乙烯苷对重构小鼠毛囊氧化应激的保护效果研究被引量：2
- 2017年
- 目的:观察外源性氧化应激对重构小鼠毛囊新生能力的影响及二苯乙烯苷(TSG,一种中药何首乌活性成分)对新生毛囊的抗氧化保护。方法:用硅胶小室法重构毛囊;用不同辐照剂量(3 J/cm^2及20 J/cm^2)长波紫外线(UVA)和不同浓度(100μmol/L及500μmol/L)过氧化氢(H_2O_2)处理新鲜制备的表皮及真皮细胞,比较观察处理细胞的毛囊新生能力改变,同时用10μμmol/L TSG联合500μmol/L H_2O_2处理细胞观察其抗氧化能力;毛囊重构部位皮肤活检采用苏木精-伊红(HE)染色进行毛囊计数,免疫组化法测定皮肤标本过氧化氢酶(CAT)表达;电子自旋共振(ESR)测试TSG羟自由基清除活性。结果:3 J/cm^2UVA照射组重建毛囊密度为(304±11.79)个,20 J/cm^2 UVA为(135±11.24)个,与对照组(202±11.79)个比较,差异有统计学意义(P<0.05);500μmol/L H_2O_2组毛囊密度为(109±20.50)个,500μmol/L H_2O_2联合10μmol/L TSG处理组为(207±15.01)个。联合处理组与对照组(216±10.26)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组化结果显示500μmol/L H_2O_2处理组CAT染色强度18.67±2.17较对照组26.07±3.74明显减低,而500μmol/L H_2O_2联合10μmol/L TSG处理组50.02±3.82较对照组增强(P<0.05);ESR结果示TSG自身缺乏羟自由基清除活性。结论:不同水平的氧化应激对重构小鼠毛囊新生能力影响不同,低水平刺激而高水平则抑制毛囊生长。TSG对小鼠重构毛囊的抗氧化保护可能是通过上调皮肤细胞(主要是真皮细胞)CAT的表达。
- 海粟雷铁池刘小明罗龙飞史赢徐世正
- 关键词：氧化应激二苯乙烯苷过氧化氢酶
- 真皮成纤维细胞MC1R分子低表达可能关系到瘢痕疙瘩皮损的形成
- 背景上皮与间质细胞的相互作用(epithelial-mesenchymal interaction)调控着皮肤组织结构的稳态。新近研究表明当皮肤损伤(组织稳态破坏)时,表皮角质形成细胞分泌大量的a-MSH分子与真皮成纤维...
- 罗龙飞雷铁池
- 游泳池肉芽肿一例及文献复习被引量：6
- 2018年
- 报道一例游泳池肉芽肿并相关文献复习。患者,女,40岁。右手中指溃烂、手背多发性结节伴疼痛3个月,皮损及周围皮肤皮温不高,常规抗感染治疗无效,有右手中指鱼刺划伤史。结核菌纯蛋白衍生物(PPD)试验(-),皮损真菌镜检(-),真菌培养及抗酸染色(-),组织病理示非特异性炎症。抗真菌治疗无效,给予抗分枝杆菌感染治疗3个月后痊愈。
- 邢飞王玉罗龙飞江珊何晓蕾雷铁池
- 关键词：游泳池肉芽肿
- 接种人类乳头瘤病毒(HPV)疫苗后诱发自身免疫病二例报道
- 罗龙飞雷铁池
- 机械牵拉刺激对真皮成纤维细胞胶原合成影响的初步研究被引量：1
- 2016年
- 目的:探讨机械牵拉刺激对真皮成纤维细胞胶原合成的直接影响。方法 :自人包皮组织建立原代真皮成纤维细胞培养;将培养的成纤维细胞接种至Falcon细胞培养小室(美国BD公司,货号353092),培养小室底部聚乙烯对苯二甲酸酯(polyethylene terephthalate,PET)膜含有直径3μm的小孔,待成纤维细胞生长至融合,通过重力加压致使PET膜变形,借以机械牵拉PET膜表面附着生长的成纤维细胞。用倒置显微镜观察机械牵拉后成纤维细胞形态学改变;用实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白印迹技术检测机械牵拉对成纤维细胞的Ⅰ型胶原蛋白(COL1A),基质金属蛋白酶-1(MMP1),组织基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP1),α2整合素(ITGA2)和α平滑肌肌动蛋白(ACTA2)5种基因m RNA及其蛋白表达的影响。结果:机械牵拉组细胞被拉长呈细长梭形,细胞长轴沿应力方向排列,而未牵拉对照组细胞呈梭形,排列无序散乱;qPCR结果显示机械牵拉组细胞COL1A,TIMP1,ITGA2和ACTA2基因mRNA表达增加,分别为未牵拉对照组的1.43、1.83、1.62、2.18倍(P<0.05),而MMP1基因表达无明显变化(P>0.05);蛋白印迹结果显示5种蛋白表达改变与其基因m RNA表达一致。结论 :机械牵拉刺激能改变真皮胶原蛋白合成-降解平衡,增加Ⅰ型胶原蛋白的从头合成。
- 李晓荟雷铁池罗龙飞史赢徐世正
- 关键词：成纤维细胞机械牵拉胶原合成
- 氧化应激增强体外培养人黑素细胞异位表达免疫活性分子
- 2012年
- 目的:比较观察氧化应激状态下正常人表皮黑素细胞(MCs)与白癜风非皮损区MCs细胞膜表达CD40,CD80,HLA-DR和ICAM免疫分子水平的变化。方法:自5例健康成年包皮和5例稳定期白癜风下腹部非皮损区分别建立正常人表皮MCs和白癜风MCs的原代培养;将培养第2-3代细胞分别用100 mmol/L过氧化氢(H2O2)作用1 h或1.5 J/cm2长波紫外线(UVA)照射进行氧化应激处理;用二氯荧光素标记法测定两种MCs在H2O2处理和UVA照射前后胞内活性氧基(ROS)水平变化;用流式细胞仪分析CD40,CD80,HLA-DR和ICAM 4种免疫分子表达水平变化;用分光光度计法测定两种MCs过氧化氢酶活性。结果:过氧化氢酶活性测定结果显示白癜风MCs过氧化氢酶活性较正常人表皮MC明显减低(P<0.01)。细胞内ROS水平测定发现H2O2处理和UVA照射均导致白癜风非皮损区MCs细胞内ROS水平急剧增高,与正常人MCs比较ROS的荧光强度有显著统计学差异(P<0.01)。流式细胞仪检测结果表明除HLA-DR外,UVA照射可诱导白癜风非皮损区MCs高表达CD40,CD80和ICAM1,与未照射组白癜风MCs和UVA照射组正常人MCs比较均有显著统计学差异(P<0.01)。结论:白癜风非皮损区MCs的抗氧化能力明显减低。UVA照射能上调白癜风MCs胞膜异位表达CD40,CD80和ICAM1免疫分子,提示在氧化应激状态下白癜风MCs可兼有增强的抗原呈递细胞样功能。
- 罗龙飞刘小明雷铁池
- 关键词：黑素细胞氧化应激白癜风
- 白癜风脱色素皮损存在角质层板层脂膜结构紊乱
- 目的 黑素除了具有光保护作用以外,还发现具有清除氧自由基,捕捉蓄积药物分子和表皮微环境酸化等生物活性.深肤色较浅肤色皮肤的表皮渗透性屏障(epidermal permeability barrier)功能明显要强,且有报...
- 刘之重史赢罗龙飞雷铁池
