田生礼
- 作品数：36 被引量：110H指数：6
- 供职机构：深圳大学更多>>
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- 相关领域：生物学文化科学一般工业技术理学更多>>
- 分子生物学实验教学模式的多样性探索被引量：11
- 2011年
- 为了适应本科教学的大众化教育和培养高水平人才的需要,提高学生实验动手操作能力、综合分析能力和创新能力是分子生物学实验教学中的关键。本文介绍了我们对分子生物学实验教学实施的教学改革,建立了分子生物学基础实验、分子生物学综合实验和分子生物学创新(研究探索)实验教学模式的多样性教学。这不仅对于保障大多数学生能够接受良好的分子生物学实验教学训练外,而且对于少数学生培养他们的强烈科研探索意识和提高自身科研素质具有重要意义。
- 田生礼宋国丽李辉张建华
- 关键词：分子生物学实验教学改革教学模式多样性
- β-葡聚糖内切酶PEGase-2基因及其表达产物和应用
- 本发明公开一种从多头绒泡菌分离的β-葡聚糖内切酶PEGase-2基因，该基因编码的蛋白由305氨基酸组成，其氨基酸序列与嗜热拟青霉有44％的同源性，模拟的三级结构呈β-三明治折叠卷状，属于糖苷水解酶的GH16家族成员。将...
- 邢苗刘士德张建华李小青田生礼欧阳秋玲
- β-葡聚糖内切酶PEGase-1基因及其表达产物和应用
- 本发明公开一种从多头绒泡菌分离的β-葡聚糖内切酶PEGase-1基因，该基因编码的蛋白由309氨基酸组成，其氨基酸序列与嗜热拟青霉有44％的同源性，模拟的三级结构呈β-三明治折叠卷状，属于糖苷水解酶的GH16家族成员。将...
- 邢苗刘士德张建华李小青田生礼欧阳秋玲
- 文献传递
- 钌(Ⅱ)多吡啶配合物与DNA相互作用的光切割与荧光性质研究被引量：1
- 2010年
- 利用琼脂糖凝胶电泳法研究了钌(Ⅱ)多吡啶配位物[Ru(bpy)2(ODCIP)]2+(bpy:2,2'-联吡啶,ODCIP:含多个配位中心的多吡啶配体,3,4-二氯基-咪唑并[4,5-f][1,10]邻菲咯啉)对pBR322质粒DNA的光切割作用及其可能机理,并运用紫外可见吸收光谱、荧光光谱和琼脂糖凝胶电泳法研究了[Ru(bpy)2(ODCIP)]2+与Zn2+配位后与DNA的光谱性质和光切割作用.结果表明[Ru(bpy)2(ODCIP)]2+对DNA有较好的光切割作用,其机理可能是产生了超氧阴离子自由基和单线态氧.[Ru(bpy)2(ODCIP)]2+与Zn2+配位可能形成的双核配位物[Ru(bpy)2(ODCIP)Zn]4+与DNA也能进行插入结合,对DNA的光切割效果并没有明显增强。
- 王海滔刘剑洪张黔玲胡婷婷田生礼
- 关键词：双核DNA荧光
- 丝状真菌中的RNA干扰及其应用技术被引量：6
- 2011年
- RNA干扰是真核生物中相对保守的一种基因转录后表达调控机制,它通过双链RNA介导细胞内mRNA发生特异性降解或翻译抑制,从而调控靶基因的表达。对丝状真菌中RNA压制和减数分裂沉默等现象的研究表明,与动、植物一样,丝状真菌中也存在RNA干扰现象。通过对RNA压制缺失突变株和减数分裂沉默缺失突变株的一系列分子生物学研究,获得了与之密切相关的一系列蛋白,而这些蛋白在结构和功能上与动、植物RNA干扰途径的蛋白高度相似,这些结果证明了丝状真菌中的RNA存在干扰现象。RNA干扰技术作为丝状真菌分子生物学研究或遗传改造的工具具有特殊的意义,因为丝状真菌具有多核和发生非同源重组频率高的特点,难以用基因敲除手段进行改造。系统地介绍丝状真菌中的RNA干扰途径以及使用RNA干扰对真菌进行遗传改造的方法。
- 王绍文刘刚邢苗田生礼
- 关键词：RNA干扰SIRNA丝状真菌
- 一种定向克隆方法及载体的改造方法及T载体
- 本发明公开了一种定向克隆方法及载体的改造方法及T载体，所述定向克隆的方法包括：设计并合成酶切盒、构建T载体、形成两端带有突出的dT的线性化的T载体、生成目标基因PCR片段、构建含有目标基因的重组载体。本发明定向TA克隆技...
- 田生礼梁志成梁秀怡刘士德
- 一种DNA片段的回收方法
- 本发明公开一种DNA片段的回收方法，是一种新的DNA和琼脂糖同步回收方法，利用弱碱性的异硫氰酸胍溶液溶解含有目DNA的琼脂糖凝胶条，再加入预冷的异丙醇，琼脂糖析出形成沉淀析出，而大部分的DNA则存在于上清液中，通过离心即...
- 田生礼梁秀怡梁志成
- 文献传递
- β-葡聚糖内切酶PEGase-1基因及其表达产物和应用
- 本发明公开一种从多头绒泡菌分离的β-葡聚糖内切酶PEGase-1基因，该基因编码的蛋白由309氨基酸组成，其氨基酸序列与嗜热拟青霉有44％的同源性，模拟的三级结构呈β-三明治折叠卷状，属于糖苷水解酶的GH16家族成员。将...
- 邢苗刘士德张建华李小青田生礼欧阳秋玲
- 乳酸克鲁维酵母表达型T载体的研发及应用
- 2014年
- [目的]构建以乳酸克鲁维酵母表达载体p KLAC2为基础的表达型T载体。[方法]利用定点突变技术突变载体p KLAC2上的XcmⅠ位点,获得表达载体p KL-MUT;PCR扩增含黄色荧光蛋白基因的XcmⅠ酶切盒,通过EcoRⅠ和XhoⅠ位点连接至表达载体p KL-MUT,构建成重组载体p KL-YFP,限制性内切酶XcmⅠ酶切后即产生T载体p KL-T。连接融合基因14-3-3-Zs G转化至乳酸克鲁维酵母GG799。[结果]利用该T载体可成功克隆外源基因14-3-3-Zs G并在乳酸克鲁维酵母中表达14-3-3-Zs G蛋白,荧光和Western blotting验证正确。[结论]乳酸克鲁维酵母表达型T载体已成功构建,具有快速克隆高效分泌表达外源基因的特点,对于促进乳酸克鲁维酵母表达系统表达相关蛋白的产业化具有实际意义。
- 梁秀怡梁志成刘雯莉何洁凝张智田生礼
- 关键词：乳酸克鲁维酵母真核表达
- 碱性纤维素酶基因在巴氏毕赤酵母中的表达及重组酵母菌发酵工艺的优化被引量：15
- 2009年
- 目的克隆碱性纤维素酶基因,构建酵母整合型表达质粒,在巴氏毕赤酵母中表达,并对重组菌的发酵工艺进行优化。方法应用PCR技术从嗜碱性芽孢杆菌ATCC21833中扩增碱性纤维素酶基因,克隆至酵母整合型表达载体pGAPZαA中,构建重组表达质粒pGAPZαA-ATCC21833,并转化至巴氏毕赤酵母GS115。通过单因素实验及正交实验,确定重组酵母的最佳发酵培养基。在20L发酵罐中进行高密度发酵,观察碳源对批式发酵的影响,并检测在4种流加方式(连续恒速流加、间歇匀速流加、间歇递减流加、维持底物浓度流加)下的菌体干重及发酵液中的酶活性。结果重组表达质粒pGAPZαA-ATCC21833经酶切及DNA测序证明构建正确,其基因序列与嗜碱性芽孢杆菌KSM-635的碱性纤维素酶基因序列一致。最佳发酵培养基组成为6%葡萄糖、2%硫酸铵、12g/L磷酸二氢钾。碳源浓度对于重组酵母菌体生长及产酶至关重要。SDS-PAGE表明表达产物的相对分子质量约为103000。维持底物浓度的流加方式可获得最高的菌体干重(29.8g/L)及酶活力(24U/ml)。结论已成功构建了表达碱性纤维素酶的巴氏毕赤酵母工程菌,并确定了维持底物浓度的流加方式为最佳发酵方式。
- 田生礼邵睿刘刚孔舒
- 关键词：碱性纤维素酶巴氏毕赤酵母发酵
