王攀
- 作品数：9 被引量：34H指数：3
- 供职机构：上海市血液中心更多>>
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- 中国人Rh血型不完全D表型筛查
- 2010年
- 叶璐夷王攀张嘉敏王晨李勤韩莎莎郭忠慧杨颖朱自严
- 关键词：血清学方法抗球蛋白法聚凝胺异型输血基因分型方法
- 红细胞稀有血型筛选、建库与应用
- 目的通过在献血者中筛选稀有血型,获得针对高频血型抗原组表达阴性的稀有表型,解决临床稀有血型血液供应困难的难题。方法在国家"十一.五"和"十二.五"计划项目中,通过国內13个省级血液中心的联合,利用血型血清学方法和分子生物...
- 朱自严王晨叶璐夷郭忠慧李勤王攀贺云蕾
- 关键词：红细胞稀有血型
- 文献传递
- 定点诱变技术制备血型等位基因检测对照品
- 目的使用基于聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的基因定点诱变技术(site-directed mutagenesis,SDM)制备血型等位基因检测对照品,将此标准品用于稀有血型的...
- 王攀叶璐夷郭忠慧朱自严
- 血型基因检测对照品的制备及其在三种稀有血型筛选中的应用被引量：4
- 2010年
- 目的 应用基于聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）的基因定点诱变技术（sitedirected mutagenesis,SDM）制备s、Oka血型等位基因检测对照品.用多重聚合酶链反应（multiplex PCR）技术建立3种血型Fy2、s和Ok2的基因分型方法,以了解这3种血型在中国随机献血者中的多态性分布状况.方法 采用基于PCR的基因定点诱变技术对s和Oka血型等位基因的单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）位点构建了含有突变SNP位点（GYPB基因cDNA 153位C/T突变和BSG基因cDNA 274位G/A突变）的标准质粒,作为s和Oka血型等位基因检测的对照品.同时针对血型抗原Fya、s和Oka等位基因的SNP位点设计序列特异性（sequence specific primer,SSP）引物,构建多重PCR体系,对438份随机献血者样本进行Fya、s和Oka血型抗原的基因筛选.结果 成功应用定点诱变技术完成了s和Oka基因检测中等位基因对照品的制备,并建立了可同时检测Fya、s和Oka血型的多重PCR体系,438份随机献血者样本中共检出2例Fy（a-）样本,未检出s-和Ok（a-）样本.结论 基于PCR的基因定点诱变技术能够得到难以获得的血型基因检测等位基因对照品,用于验证基因分型方法.本实验建立的多重PCR体系是一种有效的进行Fya、s和Oka血型基因检测的方法.
- 王攀叶璐夷郭忠慧朱自严
- 关键词：多重聚合酶链反应定点诱变等位基因单核苷酸多态性
- 人类红细胞血型抗原基因分型多重PCR体系的构建及应用被引量：5
- 2012年
- 目的建立可同时检测血型抗原Dib、k、Jsbl910、Jsb2019的一套稳定的基因分型方法，通过筛选获得所检测人群的稀有血型数据，可扩大中国稀有血型资料库。方法应用基于PCR的基因定点诱变技术制备Dib、k、Jsbl910、Jsb2019血型等位基因检测对照品。分别针对血型抗原Dib、k、Jsbl910、Jsb2019等位基因的单核苷酸多态性位点设计序列特异性引物，通过优化PCR条件建立多重PCR体系，并对4190份随机献血者样本进行Dib、k、Jsbl910、Jsb2019血型抗原基因分型。结果成功制备出Dib、k、Jsbl910、Jsb2019基因检测对照品，并成功构建检测血型抗原Dib、k、Jsbl910、Jsb2019的多重PCR体系，所建立的多重PCR体系具有良好的重复性和稳定性，4190份随机献血者样本中共检出2例Di（b-）样本，未检出k-和Js（b-）样本。结论多重PCR具有快捷、高通量且成本低的优点，可用于筛选稀有血型。获得的稀有血型可存入稀有血型数据库，为稀有血型患者及长期输血患者提供相配合的血液，减少输血不良反应的发生。
- 高欢欢贺云蕾叶璐夷王攀郭忠慧朱自严朱永明
- 关键词：血型抗原基因分型定点诱变多重聚合酶链反应
- 定点诱变技术制备血型等位基因检测对照品
- 2010年
- 王攀叶璐夷郭忠慧朱自严
- 关键词：对照品扩增产物聚合酶链式反应血液样本质粒载体
- 中国人Rh血型不完全D表型筛查
- 目的通过筛选上海地区献血者的不完全D表型,对中国人中该表型的分布和血清学特征有更全面的了解。方法样本来源为2006年—2009年,上海市血液中心献血者标本。通过标准血清学方法,采用IgM型抗-D试剂对标本进行初筛。通过3...
- 叶璐夷王攀张嘉敏王晨李勤韩莎莎郭忠慧杨颖朱白严
- 红细胞稀有血型筛选、建库与应用被引量：28
- 2012年
- 目的通过在献血者中筛选稀有血型,获得针对高频血型抗原组表达阴性的稀有表型,解决临床稀有血型血液供应困难的难题。方法在国家"十一.五"和"十二.五"计划项目中,通过国內13个省级血液中心的联合,利用血型血清学方法和分子生物学方法,我们开展了针对Duffy,Kell,Kidd,MNS,Gerbich,Diego,Yt,Lutheran,Col-ton,Ok以及ABO,Rh血型系统中高频抗原的筛选。在血清学筛选试验中,釆用了适应于高通量的微量板法和改良的抗球蛋白法。这些方法在简化经典的间接抗蛋白试验的同时,又适用于血型自动化检测的需术。在这些血型系统稀有血型筛选中,有10多种稀有血型是通过筛选稀有等位基因的方法来完成的。通过组建多个多重PCR体系,我们成功地完成了针对k,s,Fy(a-),Co(a-),Yt(a-),Di(b-),Kp(c-),Kp(b-),Js(b-),Ok(a-)稀有等位基因的检测。由于单个实验室通常无法同时获各类稀有表型DNA作为分子诊断的实验对照,我们采用了定点诱变技术(SDM),通过环状诱变PCR方法,制备了各种稀有表型等位基因突变点片段,以用于分子生物学方法筛选稀有血型的对照。结果在2008～2010年期间,参于项目的各单位共筛选献血者稀有血型135多万人次。其中北京、上海、广州、天津、武汉、浙江、江苏、成都血液中心筛选汉族献血者130万人次,新彊、内蒙、广西、昆明血液中心筛选少数民族献血者5万多人次。共获得各类稀有血型1 000多例。其中包括极为罕见的Ko、Rhnull、Wr(b-)等稀有表型。众多新的血型等位基因和存于中国人群中的特殊遗传模式被发现。同时,也首次在中国人群中发现Yt(a-),Co(a-),Lu(a-b-)等稀有表型。2011年1月,中国稀有血型专业网站开通,通过信息发布、在线查询和BBS论坛讨论,进一步有益于稀有血型的信息交流与技术的推广。在最近2年的临床稀有血型输血应用中,共有>4 000 ml的稀有血液被用于临
- 朱自严王晨叶璐夷郭忠慧李勤王攀贺云蕾
- 关键词：红细胞稀有血型
- 红细胞稀有血型筛选、建库与应用
- 目的：通过在献血者中筛选稀有血型,获得针对高频血型抗原组表达阴性的稀有表型,解决临床稀有血型血液供应困难的难题.方法：在国家“十一·五”和“十二·五”计划项目中,通过国内13个省级血液中心的联合,利用...
- 来自严王晨叶璐夷郭忠慧李勤王攀贺云蕾
- 关键词：血液管理
