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王奕然
作品数:
4
被引量:1
H指数:1
供职机构:
复旦大学
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相关领域:
生物学
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合作作者
黄伟达
复旦大学生命科学学院生物化学与...
钱志康
复旦大学
王维荣
复旦大学
邬敏辰
复旦大学
洪洁
复旦大学生命科学学院生物化学与...
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王奕然
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丁建东
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洪洁
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复旦学报(自...
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2004
3篇
2003
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LPA法克隆嗜盐菌Halobacterium species xz515古紫质基因(英文)
被引量:1
2003年
Halobacteriumspeciesxz515是从中国西藏分离到的嗜盐菌,所含古紫质(古细菌视紫红质的简称命名为AR4)具有与其他已知菌视紫红质相反的质子释放和吸收的顺序而引起重视.连接反应介导的PCR扩增法(LPA)是一种克隆部分序列已知的基因的新型克隆方法.LPA法利用"酶切-连接-PCR"之组合,首先选定一组限制性内切酶,各自单独地酶切细菌总DNA样品,然后酶切产物分别与相应的寡聚核苷酸片段接头连接.连接液混合起来,作为扩增未知序列DNA的模板.通过这种方法,克隆到了包括完整AR4基因开放阅读框和0.4kb上游调控区域的总长度1.3kb的DNA片段.实验结果表明LPA法可以代替传统的构建基因组DNA文库的方法,可以快速有效地获得目标基因相关的序列.
王奕然
洪洁
明明
丁建东
李庆国
黄伟达
关键词:
克隆
接头
利用PCR确定已知DNA序列的两侧未知序列的方法
本发明是一种利用PCR确定已知DNA序列的两侧未知序列的方法。它是通过对已知序列的限制性内切酶位点进行酶切,设计合适的PCR引物,进行PCR扩增,最后对所得片断进行克隆和序列测定。本发明技术设计简单易行,操作限制少,应用...
黄伟达
王奕然
钱志康
邬敏辰
王维荣
文献传递
Halobacterium sp.xz515来源细菌视紫质基因的克隆及其表达
该研究利用新颖的'酶切—连接—PCR'的组合(LPA法),克隆了包括完整AR4基因开放阅读框和0.4kb上游调控区域的总长度1.3kb的DNA片断.该DNA片段克隆到表达载体pNov-R-mini上后转化到细菌视紫质bR...
王奕然
关键词:
克隆
细菌视紫质
质子泵
文献传递
利用PCR确定已知DNA序列的两侧未知序列的方法
本发明是一种利用PCR确定已知DNA序列的两侧未知序列的方法。它是通过对已知序列的限制性内切酶位点进行酶切,设计合适的PCR引物,进行PCR扩增,最后对所得片断进行克隆和序列测定。本发明技术设计简单易行,操作限制少,应用...
黄伟达
王奕然
钱志康
邬敏辰
王维荣
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