潘琢 作品数:17 被引量:76 H指数:6 供职机构: 石家庄市疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 石家庄市科学技术研究与发展计划 河北省医学科学研究重点课题 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 轻工技术与工程 更多>>
基于全自动毛细管电泳技术建立的单核细胞增生李斯特氏菌MLVA分型方法 被引量:1 2015年 目的建立针对食品来源的单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,Lm)分离株的多位点串联重复序列分型(Multiple-Locus Variable number tandem repeat Analysis,MLVA)方法,为暴发确认和溯源检测提供实验室支持。方法对2005—2014年间分离自食品的91株Lm进行14个可变数目串联重复序列(Variable Number of Tandem Repeats,VNTR)位点的检测,评估最优检测位点组合并分析检测结果。结果通过采用软件分析,由LMV1、LMV2、LMV7、Lm10、Lm11、Lm23、LM-TR6、TR3和Lm15等9个VNTR位点组成的位点组合为最优MLVA检测位点,可以将91株Lm分离株分为70个型别,分型能力达到0.987 1。结论本研究建立的基于全自动毛细管电泳的由9个检测位点组成的Lm的MLVA分型方法,具有操作简便、快速、结果客观、操作标准化、易于在不同实验室间比较的优势,可作为一线检测方法用于李斯特菌病的暴发确认和溯源检测。 李秀娟 崔玲玲 赵冬 潘琢 高伟利关键词:单核细胞增生李斯特氏菌 毛细管电泳 食品中多重耐药大肠埃希菌携带产超广谱β内酰胺酶可转移质粒的特征研究 被引量:4 2017年 目的 研究食品中分离的多重耐药大肠埃希菌携带ESBLs可转移质粒分子特征.方法 465株大肠埃希菌株来自2013—2014年全国污染物监测网食源性致病菌(凉拌菜,n=159;生肉,n=102;预制肉制品,n=95;蛋糕米面,n=46;热菜,n=63).采用Mueller-Hinton琼脂平板进行ESBLs筛选后,使用琼脂稀释法对菌株进行耐药性检测;采用PCR和序列分析对ESBLs菌株进行基因、质粒分型研究;采用S1-PFGE法分析菌株携带质粒的特征;运用肉汤接合实验确定编码ESBLs基因质粒的可移动性.结果 465株大肠埃希菌株中有12株对头孢噻肟耐药,并且均为产ESBLs菌株.12株头孢噻肟耐药菌株均携带CTX-M型耐药基因,其中7株还同时携带TEM型.通过S1-PFGE的分析,12株头孢噻肟耐药菌株中,每株菌至少携带了1个质粒,最多携带有4个质粒,质粒大小范围为47-220 kb.共有7株菌可以将携带CTX-M质粒转移到受体菌株j53,且每个成功发生转移的供体菌仅转移1个质粒.结论 食品中多重耐药菌株及ESBLs基因型别均具有多样性;ESBLs耐药基因质粒的可转移性威胁我国食品安全. 白莉 潘琢 徐进 李凤琴关键词:埃希氏菌属 质粒 营养面条生产过程中克罗诺杆菌污染状况与溯源研究 被引量:3 2018年 目的调查营养面条生产加工环节中肠杆菌科和克罗诺杆菌的污染状况,对克罗诺杆菌进行溯源研究。方法采集某营养面条生产企业的生产原料、中间产品、环境、设备、人员和终产品等共101份样品,进行肠杆菌科和克罗诺杆菌检测。利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术对克罗诺杆菌进行分子分型和溯源研究。结果在整个生产过程的样品中,肠杆菌科检出率为53.5%(54/101),其中环境样品的肠杆菌科检出率最高(72.7%,16/22);克罗诺杆菌检出率为29.7%(30/101),其中终产品的克罗诺杆菌检出率最高(50.0%,5/10)。31株克罗诺杆菌分离株共获得20个PFGE带型,多样性较高,经聚类分析可划分为6个簇型。结论营养面条生产加工环节中存在克罗诺杆菌的污染状况,该致病菌污染可能与原料污染有关。克罗诺杆菌的污染问题需要引起食品安全管理部门重视,加强生产加工过程监测,制定有效措施予以控制。 潘琢 郭玉梅 徐保红 秦丽云关键词:营养面条 生产过程 脉冲场凝胶电泳 食源性致病菌 污染 食品安全 29种毒力基因在91株食源性单核细胞增生李斯特氏菌中的分布 被引量:6 2017年 目的了解河北省食源性单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)毒力基因分布特征。方法采用普通PCR方法对Lm的29个毒力基因(包括毒力岛Ⅰ在内的6个位点:prfA、plcA、plcB、hlyA、mpl和actA;内化素家族的10个位点:inlA、inlB、inlC、inlD、inlE、inlF、inlG、inlH/C2、inlI和inlJ;其他13个毒力相关位点:bsh、srtA、iap、sigB、virR、mprF、dltA、dltB、dltC、dltD、srtB、fbpA和hpt)进行检测。结果在91株Lm中,有23个毒力基因的检出率为100%。26株Lm的29种毒力基因全部检出,65株Lm存在inlD、inlF、inlG、inlH/C2、inlJ和mpl等6个毒力基因的不同缺失。缺失最严重的为inlG和inlF,缺失率分别为60.44%和54.95%;其次为mpl基因,缺失率为19.78%。根据毒力基因缺失情况,91株菌可分为10个基因型,优势毒力基因型为具有全部23种毒力基因的Ⅰ型。石家庄地区的毒力菌株缺失率(41/52)高于河北北部地区(11/22)。结论河北省食源性Lm的毒力基因携带率高,毒力基因缺失具有多样性且存在地域差异。 李秀娟 赵冬 潘琢 高伟利 徐保红 秦丽云关键词:单核细胞增生李斯特菌 毒力基因 安徽省部分地区2015年产小麦真菌污染调查 被引量:5 2016年 目的调查安徽省部分地区2015年产小麦真菌污染情况,为评估粮食中真菌侵染及真菌毒素污染状况、进一步开展预测微生物学研究提供依据。方法采集安徽省五地市2015年产未经储存的小麦籽粒,进行感官检查和千粒重计数。采用点种法将麦粒样品接种于含0.1 g/L氯霉素的马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)平板,于(28±1)℃培养5 d后,进行菌落计数和菌种鉴定。结果感官检查显示,每份小麦样品均检出数量不等的赤霉病粒,范围在8.0%~20.0%之间,千粒重平均值范围在39.8~48.5 g之间,且赤霉病粒率与千粒重水平呈负相关(r=-0.98)。安徽省五地市小麦样品的真菌污染率为100.0%,且均以交链孢霉为主要污染菌。结论安徽省五地市2015年产小麦赤霉病粒率较高,真菌污染状况较严重,有必要对小麦中的真菌毒素进行检测,并结合我国人群小麦及其制品的消费情况,评估居民通过食用小麦及其制品暴露真菌毒素的风险。 徐文静 韩小敏 张靖 潘琢 李凤琴 张立实关键词:真菌 污染 中国蜡样芽胞杆菌脉冲场凝胶电泳标准化技术的建立与应用 被引量:8 2015年 目的本研究旨在选择不同的内切酶和电泳条件对蜡样芽胞杆菌(蜡样杆菌)脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法进行评价,建立中国蜡样杆菌标准PFGE方法。方法蜡样ATCC国际标准菌株及分离自我国不同地区和来源的蜡样杆菌,制备胶块用溶菌酶和蛋白酶K分别裂解后,选用不同的内切酶对胶块内DNA进行酶切,比较PFGE电泳结果的分离度,评价获得最佳操作方案,选取51株蜡样杆菌菌株进行PFGE实验,对此实验方法进行评价分析。结果确立的蜡样杆菌PFGE分型方法的标准操作程序,可以较好地对蜡样杆菌进行分子分型研究,初步描述了51株蜡样杆菌菌株PFGE型别特征。结论实验确定的蜡样杆菌PFGE方法,可以为蜡样杆菌引起的食源性疾病及医院感染的溯源控制提供技术手段。 张慧娟 潘琢 魏建春 张恩民 梁旭东 杜小莉 崔志刚 李伟关键词:蜡样芽胞杆菌 脉冲场凝胶电泳 食物中毒 食源性蜡样芽胞杆菌的快速检测及其毒素的研究 秦丽云 吕国平 潘琢 张鑫 郭玉梅 王苋 剧慧栋 齐丽荣 该项目针对蜡样芽胞杆菌的快速检测、监测研究、毒力研究、分子分型等方面为切入点,研究方法创新性强。对食品中蜡样芽胞杆菌快速检测方法进行了研究,使用传统分离、API50CH系统生化、实时荧光PCR特异性检测相结合的方法,优化...关键词:关键词:食源性疾病 5株阪崎克罗诺杆菌体外侵染人肠上皮细胞能力分析 2018年 目的分析5株阪崎克罗诺杆菌(Cronobacter sakazakii,C sakazakii)是否能够侵染人肠上皮细胞及其侵染能力。方法将阪崎克罗诺杆菌与Caco-2细胞以100∶1的接种率接种后共培养4 h,裂解细胞将进入细胞的菌落释放出来稀释涂布于LB琼脂平板,计数,计算侵染率。结果从食源性疾病儿童病例中分离出的两种菌株C sakazakii13SJFB217、C sakazakii 14SJFB412对Caco-2细胞的侵染率分别达到0.0 219%和0.0 165%,从婴幼儿奶粉中分离的两株阪崎克罗诺杆菌C sakazakii 14SJ430、C sakazakii 14SJ431侵染率分别为0.0 071%和0.0 083%;来源于人的阪崎克罗诺菌株比来源于食品菌株对肠上皮细胞有更高的侵染能力。结论石家庄市腹泻儿童粪便中分离到的2株阪崎克罗诺杆菌属于高侵染能力的菌株。 蒋瑞萍 王晓丽 潘琢 高伟利 徐保红关键词:侵染 奇异变形杆菌毒力基因检测和药物敏感性分析 被引量:8 2016年 目的了解不同来源奇异变形杆菌毒力基因分布特点及对抗生素的敏感性特点。方法收集分离自2011年-2014年食品和食物中毒样品的44株奇异变形杆菌,采用PCR方法检测常见的毒力基因hpm A、hpm B、hly A、rpo A、mrp A、fli L和zap A;利用BD Phoenix全自动药敏系统测定菌株对20种抗生素的敏感性。结果除hly A基因未检出外,其余6种毒力基因在所有菌株中均有检出,这些毒力基因在不同来源菌株中的分布无特异性;食品分离株对19种抗生素的敏感性明显低于食物中毒分离株;食源性奇异变形杆菌对四环素和多粘菌素的敏感率最低(4.5%)。结论奇异变形杆菌常见的毒力基因不能区分致腹泻株和非致腹泻株;食品分离株对抗生素处于较高的耐药水平。 郭玉梅 潘琢 秦丽云 剧慧栋关键词:奇异变形杆菌 食物中毒 毒力基因 药物敏感性 PFGE分型方法在食源性单核细胞增生李斯特氏菌分型中的应用 2016年 目的了解河北省食源性单核细胞增生李斯特氏菌(Lm)脉冲场凝胶电泳(Pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)基因分型分布特征,建立分子分型数据库,为Lm分子流行病学研究提供资料。方法分别以Apa I和Asc I两种内切酶对食品中分离的57株Lm进行PFGE基因分型检测,并以Bio Numerics Version 6.6软件绘制进化树。结果 57株食源性Lm经Apa I和Asc I双酶切后,可产生32个基因型别(PFGE types,PT),分辨率为0.9 516。优势型别为PT11、PT12、PT5和PT10型。结论河北省食品中污染的Lm菌型分散,来源于不同的克隆株。 李秀娟 高伟利 史艳 崔玲玲 潘琢 吴梅玲关键词:单核细胞增生李斯特氏菌 脉冲场凝胶电泳 基因分型