滕蔓
- 作品数:110 被引量:164H指数:8
- 供职机构:河南省农业科学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 马立克氏病病毒河南分离株Meq基因的克隆与序列分析被引量:2
- 2014年
- 【目的】了解马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)河南分离株Meq基因的分子特性,为中原地区MDV流行情况提供较详细的信息,为更好地防控MD奠定基础。【方法】应用PCR方法分别扩增了17株MDV河南省野毒分离株的Meq基因片段,克隆测序后,将各毒株Meq基因序列与vv+MDV 648A株、vvMDV RBIB株、vMDV GA株、mMDV疫苗株CVI988株和814株的Meq基因序列进行比对分析。【结果】17株分离株中除HNGS201和HNLC503的Meq基因扩增产物较预期稍大外,其余15个的片段长度为1 020bp,与预期长度相符;MDV河南分离株之间及其与参考毒株Meq基因的核苷酸同源性为99.0%~100%,部分毒株Meq基因的氨基酸序列有10个位点的氨基酸存在规律性突变;MDV河南分离株和参考株共组成3个进化分支,其中强毒株GA、RB1B和648A位于一个分支,分离株HNGS201、HNLH304、HNLC503与mMDV毒株CVI988和814位于同一分支,其余14株分离株位于另一个较大的分支。【结论】河南省可能流行着不同毒力的MDV,一些mMDV毒株的Meq蛋白存在59个或60个氨基酸的插入。
- 余祖华滕蔓丁轲闵亚杰禹乐乐宿靖伟程相朝罗俊
- 关键词:马立克氏病病毒MEQ基因克隆
- 一条与猪瘟E0蛋白相结合的多肽序列及其应用
- 本发明主要涉及猪瘟病毒E0结合多肽及其应用,该多肽序列为WRYDQ,是一种线性结合多肽,以多肽序列为核心,可以对此多肽序列的延长和修饰,修饰材料包括但不局限于纳米材料、荧光材料、酶类、生物素及特定蛋白质。本发明借助噬菌体...
- 张改平王方雨赵东郝慧芳滕蔓邓瑞广
- 文献传递
- 一种马立克病病毒gB蛋白的单克隆抗体及制备方法和应用
- 本发明公开一种抗马立克病病毒gB蛋白的单克隆抗体及制备方法和应用。所述的抗MDV gB蛋白的单克隆抗体5E8由小鼠杂交瘤细胞株gB‑5E8产生,该细胞株保藏编号为CGMCC No:23024,该单克隆抗体重链及轻链可变区...
- 滕蔓罗俊白依霖张改平刘金玲郑鹿平柴书军程娜邢广旭赵东
- 马立克氏病病毒和J亚群禽白血病病毒快速联检试纸条
- 本发明公开一种一步法快速检测马立克氏病病毒MDV和J亚群禽白血病病毒ALV-J的试纸条,包括不吸水的支撑层、附着在支撑层上的吸附层,吸附层由样品吸附纤维层、金标抗体纤维层、纤维素膜层及吸水层依次拼接而成;纤维素膜层上标记...
- 张改平罗俊滕蔓崔治中江国托郭军庆杨继飞赵鹏杨艳艳杨苏珍胡骁飞赵东王丽史西保孙亚宁
- 文献传递
- MDV Meq-clustered miRNAs基因缺失BAC克隆株的构建及其体外增殖特性被引量:4
- 2015年
- 为构建缺失马立克氏病病毒(Mareks disease virus,MDV)Meq基因簇microRNAs(Meq-clustered miRNAs的突变株,本研究在vv MDV GX0101细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)克隆的基础上,采用Red/ET同源重组技术将Meq-clustered miRNAs的编码基因进行缺失突变,经PCR鉴定及序列分析证明Meq-cluster miRNAs序列成功缺失后,提取Δmeq-miRNAs BAC DNA,转染鸡胚成纤维细胞(CEF)进行病毒拯救,用SYBR GreenⅠqRT-PCR检测病毒体外增殖特性。结果表明成功拯救出缺失MDV Meq-clustered miRNAs基因的感染性BAC克隆株GX0101Δmeq-miRNAs,且该缺失株与亲本株GX0101BAC具有相似的增殖曲线,Meq-clustered miRNAs是MDV体外复制的非必需基因。MDV Meq-clustered miRNAs基因缺失感染性BAC克隆株的成功构建为进一步研究MDV Meq-clustered miRNAs在MDV致病和致肿瘤方面的作用奠定了基础。
- 余祖华丁轲滕蔓迟佳琦宿靖伟程相朝
- 关键词:马立克氏病病毒细菌人工染色体克隆
- 马立克病病毒分子生物学检测技术研究进展被引量:3
- 2022年
- 马立克病(MD)是由马立克病病毒(MDV)早期感染雏鸡引起的一种重要的家禽免疫抑制病与肿瘤病。MDV以水平传播为主,具有高度接触性和传染性、高致病率以及高致死率等特征,给全球养禽业造成巨大经济损失。该病主要依赖MD疫苗免疫预防,近50年来在MD疫苗广泛使用和持续免疫压力下,MDV毒力不断增强,部分毒株已突破现有商品疫苗的免疫保护。尽早对MD疑似病例进行快速准确的鉴别诊断,可为生产企业和养殖户及时采取措施、减少和挽回部分经济损失提供重要依据。经典的诊断方法已难以满足当下对MD病例快速诊断的需要。本文重点对近十年中新建立的分子生物学技术,如聚合酶链式反应(PCR)、实时荧光定量PCR(qPCR)、环介导等温扩增(LAMP)、重组酶聚合酶扩增(RPA)、多重PCR及液相芯片等在MDV检测和MD诊断中的研究及应用进行了综述,以期为今后研究建立用于MD流行病学调查、临床病例早期诊断和流行毒株分型鉴定的鉴别诊断技术提供参考。
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- 关键词:马立克病MDV分子生物学技术PCR
- 马立克氏病病毒和禽网状内皮组织增生病病毒快速联检试纸条
- 发明公开一种一步法快速检测马立克氏病病毒MDV和禽网状内皮组织增生病病毒REV的试纸条,包括不吸水的支撑层、附着在支撑层上的吸附层,吸附层由样品吸附纤维层、金标抗体纤维层、纤维素膜层及吸水层依次拼接而成;纤维素膜层上标记...
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- 文献传递
- 调控马立克氏病病毒原癌蛋白MEQ的病毒miRNA的筛选及鉴定
- 马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)是引起家禽免疫抑制和肿瘤病最重要的病原之一,其早期感染宿主后可最终诱导感染鸡产生T 细胞淋巴瘤。至今,在MDV 编码的众多蛋白中,仅MEQ 蛋白被认为是...
- 赵朴滕蔓迟佳琦余祖华宿靖伟禹乐乐张改平罗俊
- 关键词:马立克氏病病毒微RNAMEQ肿瘤形成
- 狂犬病病毒糖蛋白胞外区基因的原核表达、纯化及鉴定被引量:2
- 2010年
- 利用RT-PCR技术,将狂犬病病毒株ERA株糖蛋白胞外区基因分两段进行扩增,经克隆与序列分析,两片段大小分别为523,381 bp,各编码174,127个氨基酸,分子量分别为19.7,14.5 kDa。在原核表达载体pET-43a中分别克隆了这两段糖蛋白基因,将重组质粒转化到表达菌BL21(DE3)中,经SDS-PAGE电泳分析,在分子量约为94,89kDa处分别出现新蛋白带,和预期的目的蛋白的分子量相符。两重组蛋白主要以可溶形式表达,利用Ni2+亲和层析柱纯化了蛋白,纯度大于95%。Western-Blot分析结果显示,两种重组融合蛋白均可与兔抗RBV多抗血清反应,具有良好的反应原性。
- 杨艳艳王丽杨继飞郅玉宝滕蔓邓瑞广肖治军张改平
- 关键词:狂犬病病毒糖蛋白胞外区纯化
- 家禽疱疹病毒CRISPR/Cas9基因编辑最新研究进展被引量:2
- 2022年
- 基于CRISPR/Cas9系统的基因编辑是最新一代的基因组编辑技术,在向导RNA(gRNA)的介导下几乎可以靶向编辑任何一种基因,实现基因组的定点突变、敲除或插入。近年来将CRISPR/Cas9基因编辑技术应用于大基因组DNA病毒的研究,尤其是用于疱疹病毒的基因编辑已成为病毒学研究领域的最新国际热点。自2016年首次报道利用CRISPR/Cas9系统改造家禽疱疹病毒如马立克病病毒(MDV)基因组以来,短短5年时间已全面应用于家禽疱疹病毒的蛋白编码基因和非编码RNA基因的编辑、基因缺失疫苗和重组疫苗研发、抗病毒治疗以及抗病育种等领域。本文详细综述了当前CRISPR/Cas9基因编辑技术在家禽疱疹病毒中的应用进展和最新成果,并对其面临的问题和前景进行了展望,以期为后续研究提供重要参考。
- 罗俊罗俊郑鹿平罗琴滕蔓