李春华
- 作品数：10 被引量：68H指数：6
- 供职机构：湖北大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：武汉市社会科学研究基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学经济管理农业科学更多>>
- 一株产耐热碱性脂肪酶芽孢杆菌的筛选及其所产酶性质的研究被引量：14
- 1999年
- 从武汉市白沙洲沙鸥食用油总厂分离筛选到一株耐热碱性脂肪酶的产生菌 ,经鉴定为产芽孢的短杆菌 ,革兰氏阳性 .该菌株的最适生长温度为 4 5℃ ,所产酶的最适作用温度为 60℃ ,最适pH为 1 0 .0 ,且pH在 8.0～ 1 1 .
- 李春华
- 关键词：芽孢杆菌酶学性质
- 酸性木聚糖酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的分泌表达被引量：10
- 2005年
- 运用“鸟枪法”克隆构建了环境微生物的基因组文库,并从中筛选得到一个酸性木聚糖酶基因,命名为xyl3,其在GenBank中的登录号为gb:AY300805。BLAST分析表明,该基因的序列同源性很低,其中仅存在很短的木聚糖酶基因的同源片段,其编码的木聚糖酶属于G lycosyl hydrolases fam ily 10,与来源于Geobacillus stearotherm ophilus的intra-cellu larxylanase在氨基酸水平具77%同源性。该基因经T4 DNA polym erase处理后,克隆至经限制性内切酶CpoⅠ和NotⅠ双酶切后的毕赤酵母表达载体pHBM905,获得重组质粒pHBM706。此重组质粒转化毕赤酵母GS115,经含有交联木聚糖的选择性培养平板和PCR扩增鉴定筛选得到重组毕赤酵母GS115(pHBM706)。以0.5%甲醇于28℃诱导产酶,测得重组毕赤酵母GS115(pHBM706)在诱导的第36h产酶达最高值,所产粗酶液酶活为0.177 IU/mL。该酶的最适反应pH为5.5,最适反应温度为50℃。
- 李春华李翔马立新
- 关键词：基因组文库木聚糖酶毕赤酵母
- 武汉市耕地变化的实证分析被引量：11
- 2003年
- 利用1978～1999年武汉市的统计数据,分析探讨了武汉市近22年来耕地的数量变化及区域差异,在此基础上进一步讨论了影响耕地数量变化的驱动力.结果表明,22年来,武汉市耕地总体趋势逐年下降,耕地变化区域差异显著;经济发展、人口增长是引起耕地数量变化的内在驱动力,而经济利益的驱动和有关土地的政策是引起耕地变化的外在驱动力.
- 李春华
- 关键词：耕地变化经济发展人口增长经济利益
- β-1,4-内切葡聚糖酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：6
- 2005年
- 运用选择性培养基LBCMC从环境土样中分离得到一株能利用羧甲基纤维素的芽孢杆菌Bacillus sp.NW-2004 a,并运用“鸟枪”克隆法构建了其基因组文库,且从此基因组文库中筛选得到两个阳性克隆.对其中一阳性克隆中插入的DNA片段(命名为GLUD)进行序列测定,发现了一长度为2 502 bp的开放阅读框(ORF),可编码834个氨基酸.BLAST分析结果表明,该基因与Bacillus sp.KSM-S237来源的纤维素酶基因AB018420具86%相似性,所编码的多肽与Bacillus sp.KSM-64来源的β-1,4-内切葡聚糖酶具89%的相似性,故该基因是一新发现的β-1,4-内切葡聚糖酶基因.该序列已收录于Genebank,登录号AY663839.另外,以CpoI andNotI限制性内切酶双酶切衍生于质粒pGEX的大肠杆菌表达载体pHBM625,然后将经T4 DNA polym erase处理后的β-1,4-内切葡聚糖酶基因克隆至载体pHBM625中得到重组质粒pH-BM625G lu,最后通过平板检测及SDS-PAGE凝胶电泳,均检测到该基因在大肠杆菌XL10-G lod中的表达.
- 李春华廖贵芹张桂敏马立新
- 关键词：基因组文库大肠杆菌表达
- 一种简便快速筛选重组子的方法被引量：7
- 2005年
- 将转化后的单菌落置于快检缓冲液中,振荡后,直接通过琼脂糖凝胶电泳比较质粒大小,2 h内可筛选出重组子.详细介绍了快检缓冲液配方、快检效果、注意事项以及与其它方法的优势比较.
- 张桂敏刘振李春华马立新
- 关键词：重组子
- 湖北省城市化过程中耕地资源转用效率分析被引量：2
- 2005年
- 为了全面理解城市化过程中耕地资源的配置效率及其动态过程,文章在揭示了城市化过程中耕地转用的过程之后,应用边际分析的原理和方法,对湖北省城市化过程中的耕地转用效率进行了评价.结果表明其耕地转用效率出现波动性变化,并随考察的角度不同而变化,在此基础上提出了提高城市化过程中耕地资源配置效率的建议.
- 李春华
- 关键词：城市化耕地资源
- 利用抑制差减杂交技术分离受水稻抗性调控的褐飞虱基因被引量：4
- 2009年
- 为分离受水稻抗性调控的褐飞虱Nilaparvata lugens基因,以取食感虫水稻台中1号和高抗水稻B5的2叶1芯秧苗24h的褐飞虱4龄若虫为起始材料,采用抑制差减杂交技术构建了两个群体间的正反向差减cDNA文库。通过斑点杂交从差减文库中筛选代表受水稻抗性调控的基因的cDNA克隆,进行测序和功能分析,挑选具功能的基因进行Northern杂交验证。结果表明,通过斑点杂交筛选到的98个阳性克隆代表92个互不重复的单基因,其中25个与动物的已知蛋白基因存在较高的同源性。Northern杂交表明,这25个基因有11个表达上调,8个表达下调,提示它们可能在褐飞虱适应抗性水稻过程中发挥了重要作用。本研究结果为克隆上述新基因的全长cDNA序列及进一步研究其在褐飞虱与水稻互作中的功能奠定了基础。
- 杨之帆陈永勤李春华蒋思婧
- 关键词：褐飞虱斑点杂交差异表达基因
- 可诱导的哺乳动物串联亲和纯化(TAP)系统——IBTSAP
- 蛋白质-蛋白质相互作用研究已成为蛋白质功能解析的一个重要方面。由于蛋白质间的相互作用会因蛋白质翻译后修饰作用和亚细胞定位的改变而显著地改变,因此于活体内在特定的生理状态下分离形成的蛋白质复合物已成为研究蛋白质间相互作用的...
- 李春华徐丽马立新
- 文献传递
- 湖北省20世纪90年代以来耕地资源变化及驱动力分析被引量：15
- 2004年
- 耕地资源是社会经济实现可持续发展的重要物质基础,但由于经济的发展和城镇的扩展等原因,导致湖北省20世纪90年代以来耕地资源不断减少,而且这种趋势还在持续进行.深入探讨耕地资源减少的原因成为现实经济社会发展迫切需要解决的课题之一.根据湖北省20世纪90年代以来的统计资料,分析了耕地资源总量变化的特点,揭示了湖北省17个地市州耕地变化的地域差异,在此基础上,剖析耕地资源减少的原因,提出相应的对策建议.
- 李春华
- 关键词：耕地资源农业结构调整
- 酵母表面展示载体系统构建及表达研究
- 酵母表面展示技术(yeast surface-display technology)通过将外源蛋白与酵母细胞壁糖蛋白融合而使其展示在细胞表面,在蛋白质分子间的相互作用研究、基因定向进化研究以及开发新的抗体、药物、诊断工具...
- 曾毓芳李春华马立新
- 文献传递
