曹英豪
- 作品数：10 被引量：47H指数：6
- 供职机构：河北农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 水稻PP2Ac类磷酸酶蛋白质在盐胁迫下的表达被引量：7
- 2012年
- 【目的】了解重要蛋白质的表达模式进而探讨水稻耐盐的分子机理。【方法】采用基于抗体的蛋白质组学策略,用免疫印迹(western blotting)调查了5个PP2Ac类磷酸酶蛋白质在苗期盐胁迫条件下的表达。【结果】发现在耐盐水稻品种兰胜中,OsPP2Ac-4的表达上调,在盐敏感的水稻品种9311中,OsPP2Ac-2、OsPP2Ac-3和OsPP2Ac-5的表达也发生了上调,但OsPP2Ac-4的表达下调。比较2个品种间PP2Ac蛋白质的表达,发现在正常生长条件下,PP2Ac蛋白质的表达没有显著区别且基本保持恒定,其表达变化仅发生在盐胁迫条件下。分析水稻MPSS数据库提供的苗期盐胁迫的转录数据,发现OsPP2Ac-2、OsPP2Ac-3和OsPP2Ac-5在盐胁迫条件下转录水平下调。【结论】发现了4个盐胁迫条件下表达发生变化的PP2Ac蛋白质。
- 刘钊贾霖贾盟关明俐曹英豪刘丽娟曹振伟李莉云刘国振
- 关键词：水稻盐胁迫免疫印迹
- 水稻骨干亲本不同发育时期蛋白质表达的多态性被引量：3
- 2011年
- 【目的】通过对水稻骨干亲本在不同发育时期的蛋白质表达特征研究,了解其形成机理并促进其应用。【方法】采用Western blotting调查了6个水稻骨干亲本(9311、培矮64s、特青、珍汕97B、广陆矮4号和矮脚南特)在不同生长发育时期/部位(苗期地上部与地下部、开花期剑叶和穗子、成熟期剑叶和穗子)与光合作用、活性氧清除及胁迫防御相关的9个蛋白质的表达。【结果】9个蛋白质的表达在不同骨干亲本间有多态性,尤其在地下部和穗子等部位的表达差异较大,而在叶片中的表达比较接近;此外,蛋白质表达在不同生长发育时期/部位间也有多态性,反映了蛋白质表达的时空特异性。【结论】初步建立一条利用蛋白质特异抗体了解水稻蛋白质表达的研究途径。
- 王宪云刘钊曹英豪白辉刘丽娟李莉云刘国振
- 关键词：水稻骨干亲本蛋白质多态性
- 五个水稻类受体激酶的抗体制备及检测
- 2010年
- 类受体激酶在植物发育、自交不亲和、雄性不育、抗逆和抗病等生命过程中起着重要的调控作用。为了对水稻类受体激酶的功能及生物学特性进行深入研究,本实验克隆表达了水稻中5个类受体激酶抗原表位片段,以纯化的蛋白质为抗原免疫新西兰兔,获得了特异性较高的多克隆抗体。Western blotting检测结果表明,5个类受体激酶均在叶片中表达。
- 王博李莉云曹英豪刘子光刘国振
- 关键词：水稻类受体激酶蛋白质纯化多克隆抗体
- 水稻类钙调磷酸酶亚基B蛋白质在叶片生长和白叶枯病抗性反应中的表达被引量：7
- 2012年
- 钙信号介导植物对多种外部刺激的反应并参与调控广泛的生理学过程。钙离子结合蛋白质,如类钙调磷酸酶亚基B蛋白质(calcineurin B-like protein,CBL),对感受和传递钙信号具有重要作用。根据基因组测序及注释分析,水稻(Oryzasativa)基因组中有10个CBL家族成员。采用基于抗体的蛋白质组学策略,利用免疫印迹方法研究了水稻CBL蛋白质在叶片生长不同时期的表达,揭示了其在正常发育过程中的表达模式。然后对Xa21介导的水稻白叶枯病抗性反应不同时间点的蛋白质表达进行检测,发现OsCBL-1、OsCBL-3、OsCBL-5、OsCBL-9和OsCBL-10这5个蛋白质的表达发生了变化;进一步比较它们在抗病、感病和对照处理中的表达情况,发现其在不同反应间的表达也有区别,提示了CBL蛋白质在水稻-白叶枯病菌互作过程中的功能。该研究为深入了解水稻CBL蛋白质的功能提供了有价值的线索。
- 刘雨萌兰金苹曹英豪刘钊刘丽娟李莉云曹振伟刘国振
- 水稻类Tubby蛋白质在叶片生长和白叶枯病抗性反应中的表达被引量：6
- 2011年
- 类Tubby蛋白质(Tubby-like protein,TLP)在动植物中广泛存在,暗示其在生命过程中发挥重要的作用。水稻(Oryza sativa)基因组中有14个TLP家族成员,首先制备了这些蛋白质的抗体,用免疫印迹方法检测了它们在水稻叶片不同生长时期的表达情况,揭示其表达模式;然后对Xa21介导的水稻白叶枯病抗性反应不同时间点进行检测,发现OsTLP2、OsTLP7、OsTLP8和OsTLP9等4个蛋白质的表达发生了变化;进一步比较它们在抗病、感病反应和对照处理中的表达情况,发现不同反应间的表达也有区别。该研究结果为阐释水稻TLP在叶片生长过程中的功能,尤其是在水稻-白叶枯病菌互作过程中的作用提供了重要线索。
- 魏健李莉云曹英豪刘雨萌巩校东刘丽娟张园园刘国振
- 关键词：白叶枯病菌水稻XA21
- 水稻U-box基因家族的特征及转录表达模式分析
- 真核生物基因组中尤其是植物中广泛存在着U-Box结构。U-Box结构高度保守,其构象与RING-finger极其相似,这两者都能发挥泛素连接酶E3的作用,促进底物蛋白质泛素化降解,对细胞内异常蛋白质的降解及质量控制方面发...
- 曹英豪
- 关键词：水稻U-BOX蛋白质表达
- 文献传递
- 水稻叶绿体蛋白质在生长发育过程中的表达研究被引量：13
- 2010年
- 在植物中,叶绿体是负责光合作用的细胞器,对叶绿体内的各种生物过程人们已经积累了很多知识,但对叶绿体蛋白质的表达还所知甚少.为了解水稻叶绿体蛋白质在正常生长发育过程中的表达情况,尝试基于抗体的水稻蛋白质组学策略.选取了10个水稻叶绿体基因,利用表达的蛋白质或合成的抗原决定簇片段制备了抗体,用Westernblotting检测了相应蛋白质在5个发育时期的根、茎、叶及穗组织中的表达.发现10个蛋白质均在叶片中表达,在根中不表达.与原初反应相关的叶绿素A/B结合蛋白1和2(CAB1和CAB2)、与电子传递相关的放氧增强蛋白1(OEE1)及与活性氧清除相关的过氧还蛋白过氧化物酶(2-CysP)和硫氧还蛋白(Trx)在茎中表达.而在卡尔文循环中发挥作用的Rubisco活化酶(RCA)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、果糖二磷酸醛缩酶(FBPA)和景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶(SBPase)蛋白质在茎中不表达.在穗中,这些蛋白质的表达时序不同,CAB2和2-CysP在穗发育的全程表达,CAB1和OEE1在中后期表达,而卡尔文循环中的蛋白质只在中期表达.有意思的是,卡尔文循环中的蛋白质表达模式相似,这一结果从蛋白质表达水平支持它们之间的相互衔接关系.此外,实验还揭示了可能的蛋白质修饰、二聚体及不同的转录本现象.将目标基因的表达谱与转录谱进行比较,发现二者间有一定的平行性,但也有明显的区别.以水稻叶绿体蛋白质为对象,直观并相对定量地揭示了它们的表达模式,为阐释其功能提供了信息,也为基于抗体的水稻蛋白质组学策略提供了一个初步数据.
- 白辉王宪云曹英豪李晓明李莉云陈浩刘丽娟朱健辉刘国振
- 关键词：水稻叶绿体光合作用蛋白质表达谱
- 叶绿体基因编码蛋白质在水稻叶片生长过程中的表达研究被引量：13
- 2011年
- 叶绿体是绿色植物把光能转化为化学能的重要细胞器.目前,多种植物的叶绿体基因组序列已经获得,对叶绿体内发生的各种生物学过程人们也已经有相当深入的了解,但对叶绿体基因编码蛋白质的表达还所知甚少.用蛋白质印迹实验系统地检测了15个叶绿体基因编码蛋白质在水稻叶片不同生长时期的表达.其中7个与光合作用相关蛋白质的表达具有相似的模式,其表达量随叶片生长而增加,一般在孕穗期、开花期达到最高峰,在成熟期叶片下降,这种模式与水稻生长对光合作用的需求有明显相关性.4个与DNA复制相关的RNA聚合酶在苗期叶片中表达量达到最高,说明这些聚合酶在较早时期发挥作用.4个NADH脱氢酶蛋白质的表达呈2种不同的模式,其中亚基2和4在种子萌发后的早期叶片中就达到最高峰,亚基5和7的最高峰出现在中后期,反映了它们之间功能上的不同.实验结果直观且相对定量地揭示了叶绿体编码蛋白质的表达与叶片生长之间的关联关系,为深入了解其功能提供了重要的线索.
- 兰金苹李莉云贾霖曹英豪白辉陈浩刘胜南吴琳刘国振
- 关键词：水稻叶绿体蛋白质表达谱
- 水稻U-Box蛋白质在不同发育时期的表达分析被引量：11
- 2009年
- 真核生物基因组中广泛存在U-Box基因,其编码蛋白大部分是泛素系统中决定底物特异性识别的E3蛋白,其构象与RING-finger极其相似.U-Box蛋白质能促进底物蛋白泛素化降解,对细胞内异常蛋白的降解及质量控制方面发挥着重要的作用.水稻基因组中有77个U-Box蛋白质,系统了解它们的表达可为功能研究提供数据.制备针对水稻U-Box蛋白质的抗体,了解水稻中U-Box蛋白质在不同发育时期的表达信息,为功能研究积累数据.选取了4个水稻U-Box蛋白质,其共同结构特点为U-Box结构在N端,C端有ARM结构.用计算机软件预测抗原决定簇,细菌体系体外表达、纯化U-Box蛋白质的片段,免疫动物制备多克隆抗体,用Westernblotting检测U-Box蛋白质在水稻品种93-11苗期地上部和地下部、分蘖期根和茎、孕穗期剑叶和幼穗、开花期剑叶和穗子、成熟期剑叶和种子中的表达,并与EST数据库中公布的U-Box蛋白质EST数据进行了比较分析.体外克隆表达后,获得了纯化的蛋白质,制备的抗体特异性强,蛋白质印迹(Westernblotting)检测可见一条明显的主带,其中Os06g01304和Os12g38210两个蛋白质的表观分子质量与预测分子质量相符,Os01g66130和Os08g01900两个蛋白质的表观分子质量低于预测分子质量.4个U-Box蛋白质在水稻生长发育的不同时期或部位基本上是组成型表达,且表达量接近.对NCBI上公布的来自274个文库100万条以上的EST进行分析,可以看出4个U-Box蛋白质EST的数量分布大致均匀,与Westernblotting结果揭示的组成型表达平行,与ATPase、HSP81-3、EGF-1alpha和RuBisCo等对照基因相比,U-Box基因的EST数目相对很少,说明它们属于低丰度转录的基因.选取了4个水稻U-Box蛋白质,通过抗原决定簇预测,表达片段蛋白,制备了特异性抗体,证明了这一技术路线的可行性.利用抗体对水稻不同发育时期材料进行蛋白质表达谱研究,发现这些U-Box蛋白质呈组成
- 陈浩李莉云白辉曹英豪王宪云刘国振
- 关键词：水稻蛋白质表达蛋白质印迹
- 基于抗体的水稻蛋白质组学理论与实践
- 2022年
- 水稻是最重要的粮食作物之一,不仅是世界上一半以上的人口以水稻作为主粮,也是基础研究的模式植物。项目团队在前人研究的基础上,结合蛋白质研究的需求和发展趋势,凝练提出了“基于抗体的水稻蛋白质组学”概念,十多年来,不断优化技术路线,积极拓展和丰富相关理论并开展实践。1主要创新点1.1首次提出了“基于抗体的水稻蛋白质组学”概念。
- 刘国振李莉云窦世娟杨明李晓明张剑硕侯明明曹英豪刘丽娟魏健郭亚璐史佳楠陈悦王田幸子范伟张柳马金姣张彤刘玉晴燕高伟徐珊杨烁周艳杜铁民牛东东荣瑞娟黄腾柴帅杰郭美岑缪刘杨李雪姣徐文静关明俐贾霖贾盟曾祥然高庆华刘钊王宪云刘雨萌兰金苹白辉刘斯奇尹长城吴琳韦汉福韩宇宁赵丽英杨春霞武鹏程马晓飞赵志静潘秦郝育杰陈浩赵磊康昊翔耿广荟孔令男史晓儒奚文辉
- 关键词：蛋白质组学结合蛋白质项目团队抗体
