方瑶
- 作品数：29 被引量：90H指数：6
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 类鼻疽伯克霍尔德菌胞内运动相关蛋白BimA的生物学特性研究进展被引量：3
- 2016年
- 类鼻疽伯克霍尔德菌是一种热带医学病原体,现被美国CDC提升为I类致病菌严加防范。类鼻疽伯克霍尔德菌所导致的疾病称为类鼻疽,致死率和复发率都很高,广泛流行于东南亚及我国南海周边地区,已成为严峻的公共卫生问题。作为一种兼性胞内菌,类鼻疽伯克霍尔德菌的胞内运动能力为其逃逸机体免疫和细胞间的扩散提供了重要基础。胞内动力相关蛋白A(BimA)是一种类鼻疽菌自分泌的、与其胞内运动相关的关键分子,它通过操控肌动蛋白实现干预细菌的胞内运动,在类鼻疽菌的感染和致病中发挥着重要作用。全面、深入地了解BimA在类鼻疽菌感染中的作用机制对寻找有效预防和控制该病原的传播等方面具有重要意义。本文即综述了BimA蛋白的生物学特性分析,结合研究报道探讨其主导细菌胞内运动、干扰宿主胞内免疫、实现细菌胞间传播的机制及意义。
- 胡艺方瑶毛旭虎
- 关键词：肌动蛋白
- 类鼻疽的研究进展及诊疗现状被引量：20
- 2013年
- 类鼻疽是一种热带人畜共患病,以黏膜接触、吸入、摄入类鼻疽伯克霍尔德菌的方式感染,临床表现为多发性脓肿、难治性肺炎及致死性败血症,病死率在40%左右。主要流行区域在澳大利亚北部、东南亚,北美等地区也有散发病例报道。该病临床表现多样,转归迥异。极易误诊,抗生素耐药严重,治疗周期迁延及复发率高都是类鼻疽诊疗中的难题。随着疫区输入性病例的增加和全球化的趋势,类鼻疽的防治形势将变得更加严峻。鉴于临床医师尤其是非疫区医务人员对类鼻疽疾病还很陌生,医护人员对病原感染的防护不足,本文结合最新文献报道,将类鼻疽的诊疗及预防作简要综述,旨在加强医护人员对类鼻疽疾病的认识,做好类鼻疽的诊疗和预防以及个人防护。
- 方静方瑶
- 关键词：类鼻疽类鼻疽伯克霍尔德菌诊疗
- 类鼻疽病动物模型的研究进展被引量：3
- 2016年
- 类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei,类鼻疽菌)是一种革兰阴性短杆菌,现被美国疾病预防控制中心提升为I类致病菌严加防范。类鼻疽菌直接从环境感染人类和多种动物,且抗生素耐药严重,一旦引起败血症会有很高的死亡率。为了更好地指导类鼻疽病的临床治疗和研究类鼻疽菌的致病机制,建立类鼻疽病动物模型是必不可少的环节。笔者对现有的类鼻疽病动物模型从易感动物、感染途径、动物品系和模型评价几个方面进行总结阐述。
- 马腾飞方瑶毛旭虎
- 关键词：类鼻疽伯克霍尔德菌类鼻疽病动物模型
- 类鼻疽伯克霍尔德杆菌重组BLF1蛋白的制备方法及其产品和应用
- 本发明公开了类鼻疽伯克霍尔德杆菌重组BLF1蛋白的制备方法及其产品和应用，其制备方法为先设计扩增类鼻疽伯克霍尔德杆菌BLF1基因的引物，扩增获得编码区序列如SEQ？ID？NO.3所示的序列，然后将获得的序列连入表达载体构...
- 任春艳毛旭虎方瑶李倩胡艺马腾飞胡志强
- 文献传递
- 抗类鼻疽伯克霍尔德菌多抗血清的制备及评价被引量：6
- 2012年
- 目的制备抗类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudoamllei,其抗原简写为BP)多抗血清,评价不同处理方式对抗原免疫原性的影响。方法采用超声破碎、甲醛灭活、热灭活3种方式处理细菌抗原接种新西兰兔和BALB/C小鼠,检测不同抗原免疫动物抗血清的ELISA效价及凝集试验效价。结果 (1)ELISA方案最佳条件:二抗稀释度为1/8000,抗原包被浓度为4μg/mL或8μg/mL;凝集反应最佳条件:细菌浓度为6×109CFU/mL、凝集温度为37℃、观察时刻为4h。(2)超声破碎抗原(U-BP)免疫新西兰兔和小鼠的抗血清ELISA效价高达1/64000,最高血清凝集效价分别为1/32和1/64,甲醛灭活抗原(F-BP)抗血清ELISA效价高达1/16000,凝集效价为1/128和1/64;热灭活抗原(H-BP)抗血清ELISA效价达1/8000,凝集效价为1/16和1/64。(3)F-BP和H-BP具有较强的免疫原性,U-BP在小鼠中的免疫原性较弱(P<0.05)。结论建立了抗类鼻疽伯克霍尔德杆菌多克隆抗体的检测方法,制备了高效价的抗类鼻疽伯克霍尔德杆菌多抗血清;甲醛灭活和热灭活细菌具有较好的免疫原性,为下一步类鼻疽伯克霍尔德杆菌的致病机制研究和疫苗研发打下了基础。
- 方瑶顾江王海光于波毛旭虎
- 关键词：类鼻疽伯克霍尔德菌类鼻疽
- 肠出血性大肠杆菌O157:H7外膜蛋白A敲除菌株的构建及其黏附作用研究被引量：3
- 2012年
- 目的利用Red同源重组技术构建肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7外膜蛋白A(ompA)基因敲除菌株,研究敲除菌株的黏附能力变化,阐明OmpA在细菌黏附以及致病中的作用。方法利用Red同源重组技术对EHEC O157∶H7 ompA基因进行敲除,同时构建EHEC O157:H7 ompA回复突变菌株,最后通过细胞试验对EHEC O157∶H7野生型菌株、敲除菌株及回复突变菌株的黏附能力进行比较。结果成功构建了EHEC O157:H7 ompA基因敲除菌株及其回复突变菌株。细胞试验结果表明,与野生型菌株相比,敲除菌株的黏附能力明显下降,而将ompA基因进行回复突变后其黏附能力又得到回复。结论 OmpA在EHEC O157∶H7黏附HeLa细胞过程中发挥重要作用,ompA基因敲除菌株的获得为进一步研究其功能提供了帮助。
- 王海光顾江方瑶于波李倩张卫军毛旭虎
- 关键词：外膜蛋白A基因敲除细胞黏附
- 类鼻疽杆菌Ⅲ型分泌系统BPSS1395蛋白表达及其抗体制备与鉴定被引量：4
- 2017年
- 目的重组表达类鼻疽杆菌Ⅲ型分泌系统蛋白BPSS1395,利用其抗体检测该蛋白在细菌中的分布。方法以pET-22b为表达系统,采用DNA重组技术在大肠杆菌中表达BPSS1395蛋白;用纯化重组蛋白免疫新西兰大白兔,Western blot及ELISA法鉴定其免疫学性质;以制备的抗血清Western blot分析该蛋白的亚细胞定位。结果从类鼻疽杆菌BPC006株基因组DNA中PCR得到了BPSS1395目的基因,并成功构建pET-22b-BPSS1395重组质粒,转化到E.coli宿主菌BL21(DE3)经IPTG诱导表达、纯化得到了相对分子质量为32×10~3的高纯度BPSS1395蛋白,制备的兔抗血清ELISA效价均高达1∶1 280 000,并能与目的蛋白发生特异性抗原抗体反应。亚细胞分离后BPSS1395在类鼻疽杆菌中主要定位于细胞质。结论重组表达了具有生物活性的BPSS1395蛋白,制备了其特异性多克隆抗体,证明了该蛋白定位于细胞质。
- 胡艺胡志强马腾飞韩丹李倩方瑶毛旭虎
- 一种用于鉴定类鼻疽伯克霍尔德菌的PCR试剂盒
- 本发明提供一种用于鉴定类鼻疽伯克霍尔德菌的PCR试剂盒，其包含SEQ ID NO：1-2所示的核苷酸和PCR反应试剂。所述PCR试剂盒的PCR反应条件为：94℃预变性4分钟，94℃变性40秒，54.5℃退火20秒，72℃...
- 顾江方瑶王海光于波蒋明明程琰唐斌李娜毛旭虎
- 类鼻疽杆菌慢性感染BALB/c小鼠模型的建立被引量：1
- 2017年
- 目的建立类鼻疽杆菌(Burkholderia pseudomallei)慢性感染BALB/c小鼠模型并评价其稳定性。方法采用0.01 m L洗涤后的高、中、低剂量的类鼻疽杆菌液(菌量分别为3.3×104、3.3×103、3.3×102CFU)滴鼻感染BALB/c小鼠,密切监测42 d,记录小鼠的生存率,探索合适的攻毒剂量。在低剂量细菌(3.3×102CFU)感染小鼠后21、28、35、42 d,计数小鼠血液、肝脏、脾脏和肺脏的细菌定植量,ELISA检测血清炎性因子TNF-α、IFN-γ的表达和血清类鼻疽杆菌特异性Ig G抗体滴度,观察肝脏、脾脏和肺脏等主要器官的病理学改变,评价动物模型的稳定性。结果低剂量类鼻疽杆菌滴鼻感染BALB/c小鼠后,小鼠42 d生存率为60%。期间小鼠体质量呈下降趋势,血液、肝脏、脾脏和肺脏均有细菌定植,并出现大量炎性细胞浸润、多灶性坏死和脓肿等病理改变;类鼻疽杆菌血清中特异性Ig G抗体滴度从感染后21 d起持续增高;实验组小鼠血清炎性因子TNF-α和IFN-γ表达明显高于对照组(P<0.05)。结论成功建立了稳定的类鼻疽杆菌慢性感染BALB/c小鼠模型。
- 马腾飞胡艺方瑶朱攀胡治强韩丹康少雄李倩毛旭虎
- 关键词：动物模型
- 常规消毒剂对类鼻疽伯克霍尔德菌的杀灭效果分析
- 目的分析评价临床及科研中常用的四种消毒剂对类鼻疽伯克霍尔德菌的杀灭效果,为临床类鼻疽治疗和科研活动中对该病原体的生物防护和沾染消除提供参考。方法选取临床及科研中常用的四种消毒剂:碘伏,新洁尔灭,75%乙醇,"84"消毒液...
- 黎元莉方瑶陈海
- 关键词：消毒剂灭菌类鼻疽伯克霍尔德菌
- 文献传递
