张道敬
- 作品数：36 被引量：185H指数：9
- 供职机构：华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程农业科学更多>>
- 多粘类芽孢杆菌HY96-2的化学成分被引量：7
- 2008年
- 从采自江西南昌郊区土壤的生防菌株多粘类芽孢杆菌HY96—2代谢产物中分离得到8个化合物，其结构分别鉴定为尿嘧啶（I）、胸腺嘧啶（Ⅱ）、金雀异黄素（Ⅲ）、5，4’-二羟基-7-甲氧基黄酮（Ⅳ）、2，4-二叔丁基苯酚（Ⅴ）、对羟基苯甲醛（Ⅵ）、棕榈酸（Ⅶ）、内消旋-2，3-丁二醇（Ⅷ）。化舍物的结构通过IR、NMR、MS等波谱数据分析得到确定，其中化合物Ⅰ～Ⅶ均为首次从该菌中分离得到。
- 张道敬龚春燕魏鸿刚李淑兰李元广沈国敏
- 关键词：多粘类芽孢杆菌化学成分代谢产物
- 棘突蛋白氨基端嵌入标签(记)蛋白的重组猪流行性腹泻病毒的拯救和鉴定
- 2024年
- 【背景】猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是严重影响养猪业健康发展的动物传染病,其致病原为猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)。PEDV结构蛋白之一——棘突蛋白(spike protein,S protein)负责病毒的侵染、入胞等过程,该蛋白结构和功能研究是PEDV分子生物学研究的热点。S蛋白分为两个功能域,N端的S1亚单位和C端的S2亚单位,以往研究表明PEDV DR13att毒株S1N(19-233 aa)结构域缺失,不影响DR13att毒株的存活和增殖。【目的】基于靶向RNA重组技术,在PEDV(DR13att)S1N结构域分别引入HA标签基因、抗坏血酸过氧化物酶(APEX2)基因,构建重组PEDV,考察S1N结构域能否被标签(记)蛋白或多肽替换。【方法】利用靶向RNA重组技术的PEDV反向遗传学操作平台,将转移载体p-PEDV-DR13att的S1N结构域(1-234 aa)分别替换成HA基因、APEX2基因,进行重组转移载体的构建,再分别将线性化的载体体外转录的RNA转染至m PEDV感染的LR7细胞,然后在Vero细胞上拯救重组PEDV。通过观察细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)、RT-PCR检测、测序、间接免疫荧光分析(immunofluorescence assay,IFA)、Western blotting检测对重组病毒进行验证,最后测定重组病毒滴度并绘制重组病毒生长曲线,探究重组病毒与亲本病毒的生长特性。【结果】构建的重组病毒经过拯救和传代,发现引入HA标签蛋白的重组猪流行性腹泻病毒r PEDV-DR13-S1N-HA(r PEDV-DSH)在P1代出现细胞病变,引入APEX2蛋白的重组猪流行性腹泻病毒r PEDV-DR13-S1N-APEX2(rPEDV-DSA)盲传至P4代,未出现细胞病变。对P4代的rPEDV-DSH、rPEDV-DSA进行RT-PCR检测、测序、间接免疫荧光分析、蛋白质印迹法验证,证实引入HA标签的重组病毒r PEDV-DSH拯救成功,而携带APEX2的重组病毒未能拯救成功。重组病毒rPEDV-DSH生长曲线表明rPEDV-DSH与亲本毒株DR13att有相似的生长趋势,但病毒增殖水平显著低于亲本毒株。
- 孙如晶董世娟于瑞嵩于瑞嵩李春华李震谢春芳李春华张道敬
- 关键词：猪流行性腹泻病毒
- 半红树药用植物杨叶肖槿树皮的化学成分被引量：7
- 2007年
- 目的研究杨叶肖槿的化学成分。方法采用硅胶柱色谱法分离纯化,薄层色谱及波谱法进行结构鉴定。结果从其树皮95%乙醇提取物中分得7个化合物,其结构分别鉴定为β-谷甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷-6'-硬脂酸酯(Ⅰ)、β-谷甾醇(Ⅱ)、胡萝卜苷(Ⅲ)、山柰素(Ⅳ)、正三十一烷醇(Ⅴ)、硬脂酸(Ⅵ)、白桦脂醇(Ⅶ)。结论化合物Ⅰ～Ⅵ均为首次从该植物中分得。
- 张道敬张偲吴军
- 关键词：化学成分
- 三株海洋木霉的应用潜力被引量：5
- 2017年
- 【目的】探索3株海洋生境木霉的应用潜力。【方法】经过筛选和诱变,获得高抑菌活性及产孢量的木霉突变株;通过优化培养基、温度、初始p H考察其产孢量及最适培养条件;综合抑菌谱、重寄生及抑菌相关基因考察其抑菌活性;采用特殊培养基法考察其产纤维素酶、植酸酶、铁载体以及降解磷钾的能力,高效液相色谱法测定其产吲哚乙酸能力。【结果】3株木霉菌的产孢量分别为3.45×108、3.10×108和2.55×108 CFU/cm2,与野生型相比分别提高了88.52%、63.16%和180.22%;且均可产生厚垣孢子,其中XG20-1厚垣孢子产量最高,达到3.56×108 CFU/m L。3株木霉菌具有较广抑菌谱及对番茄早疫病菌的重寄生作用,同时扩增得到Tex1、Nag1、Eg1基因,生物学测试显示其均具有产纤维素酶、几丁质酶以及铁载体的能力,证明其抑菌活性是多种机制共同作用的结果;菌株可以降解磷钾,且吲哚乙酸产量分别为2.61、1.57和1.92 mg/L,具有促进植物生长的潜力。【结论】本文中3株木霉菌在开发为生防菌与生物肥料方面展现出良好的应用潜力。
- 李闯张道敬罗远婵张久明田黎
- 多粘类芽孢杆菌HY96-2胞外多糖的分离纯化被引量：4
- 2020年
- 多粘类芽孢杆菌HY96-2发酵液经乙醇沉淀,Sevag法去蛋白,透析和DEAE-52离子交换柱等手段纯化,获得HY96-2胞外多糖组分B和寡糖组分D,其中多糖组分B纯度为91.39%。进而采用凝胶渗透色谱法(GPC)、气相色谱法(GC)测定了多糖组分B的分子量,得组分B的分子量为1.22×10^6 Da。实验对组分B的单糖组成进行了分析,确定其含有5种单糖:鼠李糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖,它们的摩尔比为:2.52∶0.25∶1∶1.61∶2.24,为一种新结构多糖。
- 贾杰郑瑞峰李淑兰张道敬
- 关键词：多粘类芽孢杆菌胞外多糖分离纯化
- 小球藻热水提取物功能成分的活性跟踪分离被引量：4
- 2017年
- 本研究旨在以自由基清除作用和促巨噬细胞增殖作用为导向,对小球藻热水提取物(CPE)的分离纯化产物进行活性跟踪,以确定CPE的主要功能成分。采用高压热水提取、Sevag除蛋白、乙醇沉淀和超滤的方法得到CPE粗多糖,然后通过DEAE52离子交换层析柱和Sephadex G-100对CPE粗多糖组分进一步分离纯化。研究结果表明,通过上述方法对CPE进行分离纯化,得到3种高活性成分PS-1-4-2、PS-1-3-2和PS-2-3-3,经凝胶渗透色谱GPC分析得知其分子质量分别为3.97×10~4 Da、2.28×10~4 Da和4.1×10~3 Da。活性跟踪结果表明,CPE能够清除自由基并促进巨噬细胞Ana-1细胞生长,主要是由于其多种活性组分共同发挥作用,清除自由基作用的功能成分主要集中于PS-1-3、PS-1-4、PS-2-3和PS-2-4,促Ana-1细胞增殖作用的功能成分主要集中于PS-1-3、PS-1-4和PS-2-3。本研究确立了CPE主要功能成分的活性筛选手段,并获得3种新型功能成分,可用于指导小球藻高附加值产品的开发,从而进一步推动微藻能源的产业化进程,实现"高附加值微藻产品、微藻能源与微藻固碳"一体化的示范作用。
- 贾敬徐殿胜庄秀园张道敬陶黎明李元广
- 关键词：自由基清除作用
- 纤细裸藻培养及其产物功能的研究与展望
- 2024年
- 纤细裸藻(Euglena gracilis)是一类介于动物和植物之间的单细胞真核生物,在自然界中分布广泛。纤细裸藻兼具动植物细胞的特征,可进行光合自养、混养和异养培养,细胞内含有丰富的营养物质。近年来随着对纤细裸藻生物特性和胞内组分的深入研究,发现其在医药、食品以及饲料方面具有重要的应用价值,在提高免疫力、抗炎以及降低尿酸等方面的功效非常值得开发,特别是纤细裸藻特有的裸藻多糖等在生物医药领域具有广阔的应用前景。纤细裸藻作为食品原料、食品添加剂、饲料添加剂以及化妆品原料在国内外已经获得相关机构的认证,国外尤其是日本已经开发出系列产品。然而,国内对纤细裸藻的研究及开发还处于起步阶段,发展空间巨大,且目前关于纤细裸藻培养与功能研究及潜在的应用的综述报道较少。本文系统地介绍了纤细裸藻培养和生产的国内外研究现状,以及纤细裸藻粉与裸藻多糖活性功能的国内外研究结果,并对纤细裸藻应用开发存在的问题以及未来可能的发展方向进行了展望,为进一步建立和优化大规模且高效异养培养工艺、开发具有特定功能的纤细裸藻相关产品等提供科学依据。
- 张凯凯万民熙章真张道敬王伟良樊飞谢静莉周焜鹏李元广
- 两种红树植物化学成分研究
- 张道敬
- 关键词：药用植物红树科化学成分生物活性桐花树
- 海洋芽胞杆菌B-9987产新型抗菌环脂肽Marinhysin A的培养基优化被引量：10
- 2013年
- Marinhysin A(MA)是由海洋芽胞杆菌B-9987产生的具有抗真菌活性的新结构环脂肽类化合物,该化合物不仅抑菌谱广而且盆栽防效良好。采用响应面分析法(Response SurfaceMethnology)对海洋芽胞杆菌B-9987产脂肽MA的培养基进行了优化。Plackett-Burman(PB)实验表明,蔗糖和酵母粉是显著影响MA产量的因素。中心组合实验(Central Composite Design)分析表明,当培养基中蔗糖和酵母粉的含量分别为42.0g/L和42.3g/L时,MA的浓度最大可达68.19mg/L,与实验值75.74mg/L相近。优化后,MA产量(250ml摇瓶发酵)较优化前的54.12mg/L提高了28.5%。用优化后培养基进行5L罐发酵,MA浓度可达182mg/L,较优化前的130mg/L提高了28.4%。
- 陈杰魏鸿刚罗远婵张道敬李淑兰田黎李元广
- 关键词：培养基优化响应面分析法
- 农用抗真菌海洋微生物的筛选及放线菌T19-07活性代谢产物的初步研究被引量：4
- 2011年
- 目的通过筛选获得具有拮抗植物病原真菌活性的海洋微生物菌株,并对其中一株海洋生境的结节链霉菌(Streptomyces nodosus)T19-07的活性代谢产物进行初步研究。方法以植物病原真菌为靶标,采用平板对峙培养法筛选出活性菌株;再以抑菌活性为指标,考察较强活性菌株T19-07在5L发酵罐中的培养过程特征,并通过大孔吸附树脂XAD-16柱层析对活性物质进行分离提取,结合TLC生物自显影和HPLC快速确定代谢产物中的活性组分。结果从31株海洋微生物中筛选出12株对多种植物病原真菌具有拮抗作用的菌株;确定了菌株T19-07的代谢产物中的主要抑菌活性物质,其相对分子质量为214,并且它对茄交链格孢霉的离体抑菌活性和已登记的化学农药异菌脲活性相当,MIC<12.5μg.mL-1。结论海洋微生物是寻找农用抗生素的重要资源,海洋放线菌T19-07产生的拮抗植物病原真菌物质具有较好的离体抑菌活性,具有进一步研究开发的潜力。
- 胡杨张道敬李元广陶黎明田黎李淑兰
- 关键词：海洋放线菌植物病原真菌抗真菌活性
