张德咏 作品数:140 被引量:652 H指数:13 供职机构: 湖南省农业科学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 公益性行业(农业)科研专项 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 环境科学与工程 生物学 化学工程 更多>>
湖南柑橘根结线虫种类鉴定及特异性PCR检测 被引量:3 2020年 根结线虫病是严重危害湖南柑橘生产的主要病害,快速准确地进行病原线虫鉴定,从而制定针对性的防治措施,对柑橘产业的稳定发展至关重要。运用形态学和分子生物学技术对湖南永州地区柑橘根结线虫进行病原种类鉴定,确定其为番禺根结线虫Meloidogyne panyuensis。通过引物设计与筛选,建立了番禺根结线虫特异性PCR检测技术。结果表明,该检测方法特异性好,灵敏度高,操作简单,能有效地从多种根结线虫中特异性检测出番禺根结线虫,为柑橘病原线虫的快速检测鉴定提供技术支撑。 何清聪 王东伟 张德咏 张德咏 王剑 刘勇甲氰菊酯对蔬菜土中微生物数量的影响 被引量:4 2010年 在模拟的土壤生态系统中研究了甲氰菊酯对蔬菜土中微生物数量的影响。结果表明:低浓度甲氰菊酯对蔬菜土中微生物数量影响不大,高浓度甲氰菊酯短期内,对土壤微生物具有抑制作用,17天后恢复至对照水平。土壤微生物30天对土壤中120mg/kg的甲氰菊酯的降解率为37.71%。 张战泓 张松柏 刘勇 张德咏 罗香文 成飞雪 罗源华关键词:甲氰菊酯 微生物 降解 湖南省安仁白背飞虱种群对5种农药敏感度测定 2014年 为明确湖南省安仁地区白背飞虱种群对不同防治农药的敏感度,指导该地区白背飞虱田间药剂防治,测定了湖南省安仁县白背飞虱种群3龄若虫对5种农药的敏感度。测定结果表明,湖南省安仁县白背飞虱种群对噻虫嗪、噻嗪酮、吡虫啉、烯啶虫胺、异丙威的敏感度(LC50),分别为0.0299、0.1214、0.1322、0.3296、26.7068 mg/L。5种药剂中,异丙威的敏感度最低,生产上应控制施用。 罗香文 刘建宇 张胜平 张德咏 刘勇 蔡立湘关键词:白背飞虱 敏感度 农药 番茄斑萎病毒核衣壳蛋白基因的克隆与分析 被引量:8 2010年 从云南表现褪绿黄化症状的番茄上分离到番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus)YN-1株系,利用RT-PCR方法克隆了该株系的核衣壳蛋白基因,并测定了该基因的序列,全长为777 bp,编码258个氨基酸。对该基因的氨基酸序列分析结果表明,YN-1 N基因与韩国3个株系的氨基酸序列相似性均高达97%。 唐前君 孙书娥 刘勇 谭新球 肖启明 谢丙炎 张德咏关键词:番茄斑萎病毒 核衣壳蛋白 克隆 番茄病毒病为害症状及防治方法 被引量:4 2010年 番茄是我国最主要的蔬菜之一,随着种植面积增加,栽培品种增多,种植方式多样化,病害发生种类和面积也明显增加,病毒病已成为仅次于真菌病害的第二大病害,为害日趋严重。尤其是2009年番茄黄化曲叶卷叶病毒病大面积暴发,致使很多田块绝收,给生产者造成很大的经济损失。为有效控制番茄病毒病,减少番茄病毒病造成的损失,保障番茄优质高产,笔者对番茄病毒病的种类、为害症状及其防治方法进行了详细的阐述。 孙书娥 朱春晖 张德咏关键词:番茄病毒病 为害症状 真菌病害 栽培品种 湖南省永州地区柑橘慢衰病与黄龙病病原鉴定及分布调查 被引量:5 2016年 为明确湖南省柑橘黄化症状与柑橘慢衰病和柑橘黄龙病的相关性,应用形态学和分子生物学方法对湖南省永州地区表现黄化症状的柑橘进行了两种病原的鉴定及分布调查。结果表明,造成该地区柑橘黄化现象的主要原因为柑橘半穿刺线虫和黄龙病菌对柑橘的侵染。所检样本中,柑橘慢衰病平均发生率为82.1%,土壤中的半穿刺线虫群体密度最高达到3 077条/100mL。永州地区柑橘黄龙病病菌属于韧皮部杆菌属类细菌亚洲种,平均检出率为64.3%。柑橘半穿刺线虫和黄龙病菌在柑橘园存在混合侵染现象,混合侵染率为53.6%。柑橘半穿刺线虫在永州地区柑橘产区分布广泛,是造成柑橘黄化症状的重要病因,重视并有效防控柑橘半穿刺线虫已迫在眉睫。 宋志强 成飞雪 程菊娥 张德咏 何代进 刘勇关键词:柑橘黄龙病 病原鉴定 呋虫胺及其代谢物在甘蓝和土壤中的消解规律 被引量:11 2018年 [目的]建立了甘蓝和土壤中呋虫胺及其代谢物的残留检测方法。[方法]样品用10%乙酸乙腈提取,PSA净化,UPLC-MS/MS测定。[结果]呋虫胺及其代谢物DN、UF在甘蓝和土壤中的平均回收率为72.3%~107.8%,相对标准偏差为0.5%~5.1%,最低检出量(LOD)均为0.015 ng,最低检测质量分数(LOQ)均为0.05 mg/kg。[结论]该方法简单、便捷,可满足甘蓝和土壤中呋虫胺及其代谢物的同时测定。呋虫胺在甘蓝和土壤中的降解半衰期分别为19.8~26.7、7.5~27.7 d。 彭敏 陈武瑛 陈武荣 罗香文 张德咏 周小毛 刘勇关键词:呋虫胺 代谢物 甘蓝 消解 4种小作物中嘧菌酯残留量的检测及膳食风险评估 被引量:4 2020年 目的建立超高效液相色谱-串联质谱联用法检测4种小作物(茄子、苦瓜、葱和蕹菜)中嘧菌酯残留的分析方法,探明嘧菌酯在4种小作物中的残留特性和使用安全性。方法样品经乙腈提取,QuEChERS方法净化,在电喷雾正离子(electrospray positive ion,ESI+)模式下,用UPLC-MS/MS采用多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式检测。结果嘧菌酯在0.001~2 mg/L浓度范围内溶剂标准曲线和空白基质匹配标准曲线均有良好线性,相关系数在0.9989~1之间。在0.01~20 mg/kg添加水平内平均回收率为73.5%~109.7%,相对标准差(relative standard deviation,RSD)为1.5%~8.9%,方法的检出限(limits of detection,LOD)为0.001 mg/L,最低检测浓度(limits of quantification,LOQ)为0.01 mg/kg。25%嘧菌酯水分散粒剂在4种小作物中的半衰期分别为3.9、2.7、4.6和2.5 d;连续多次施药10 d后在茄子和苦瓜中残留量最大值分别为0.015 mg/kg和0.018 mg/kg;连续多次施药14 d后在葱和蕹菜中残留量最大值分别为1.43 mg/kg和0.450 mg/kg;膳食风险商值(risk quotient,RQ)为0.0002~0.0959,均低于1。结论该方法简便、快速、灵敏度高,能有效克服杂质干扰,膳食风险结果表明使用25%嘧菌酯水分散粒剂防治蔬菜病害风险较小,相对安全。 陈武瑛 张德咏 陈昂 熊浩 罗香文 宋增收 刘勇关键词:嘧菌酯 超高效液相色谱-串联质谱法 风险评估 辣椒胶孢炭疽菌CFEM效应因子鉴定及转录组分析 被引量:2 2021年 [目的]本文旨在研究辣椒胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)常见真菌细胞外膜蛋白(common in several fungal extracellular membrane proteins,CFEM)的组成和结构。[方法]以辣椒胶孢炭疽菌CSLL^(-1)1的基因组为研究对象,通过生物信息学分析其CFEM效应因子的信号肽、跨膜结构域和亚细胞定位信号等结构特征;利用转录组学途径分析其在病菌与寄主互作过程中的表达特征,并对部分CFEM效应因子进行亚细胞定位分析。[结果]CSLL^(-1)1共编码30个CFEM效应因子,其中26个具有信号肽并可分泌至胞外;17个含有数目不等的跨膜结构域。CFEM效应因子Cghn02929、Cghn09727、Cghn12645和Cghn14146在侵染辣椒果实各阶段均具有较高表达水平,推测其可能参与病菌整个侵染过程。Cghn14146、Cghn09727和Cghn13279定位于细胞膜和细胞质,而Cghn02929、Cghn13471定位于细胞核、细胞膜和细胞质。[结论]明确了辣椒胶孢炭疽菌CFEM效应因子的组成和结构特征,探明了CFEM效应因子间的表达水平和亚细胞定位差异。 刘思珍 欧阳超 满益龙 盛家伟 陈岳 张鑫 郑立敏 李智强 李大伟 张德咏 刘勇 王运生 谭新球关键词:辣椒 胶孢炭疽菌 生物信息学分析 亚细胞定位 番茄斑萎病毒核衣壳蛋白N及膜多糖蛋白Gn的多克隆抗体制备及应用 被引量:5 2018年 由番茄斑萎病毒Tomato spotted wilt orthotospovirus (TSWV)侵染引起的番茄斑萎病毒病在我国蔬菜、花卉等作物上造成了严重的经济损失。本研究克隆了TSWV核衣蛋白N基因及膜多糖蛋白Gn基因,利用Gateway系统获得N和Gn基因的原核表达载体。将其转化到大肠杆菌表达菌株Rosetta (DE3)细胞内,IPTG诱导表达N蛋白和Gn蛋白,以此为抗原分别免疫新西兰大白兔,制备N蛋白和Gn蛋白的多克隆抗体。Western blot检测结果表明,N蛋白的多克隆抗体能够与N蛋白发生特异性结合反应,间接酶联免疫吸附(indirect enzyme-linked immunosorbent assay,in-ELISA)分析检测表明抗体滴度为1∶12 800,而Gn蛋白的多克隆抗体特异性差,效价未检出。本研究制备的N蛋白多克隆抗体可用于田间病株的病害诊断,同时有助于开展病毒在介体昆虫内定位、病毒和介体昆虫互作及功能分析的研究。 潘慧 赵忠豪 章松柏 张德咏 张德咏 张洁 李俊凯关键词:番茄斑萎病毒 N蛋白 多克隆抗体