张巧娟
- 作品数：7 被引量：4H指数：1
- 供职机构：三峡大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省卫生厅青年科技人才基金湖北省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 构建表达分泌型和无分泌型大鼠gremlin1的真核表达载体
- 目的：分别构建能表达分泌型和非分泌型gremlinI蛋白的真核表达系统。方法：采用普通PCR技术从本实验组构建的peDNA3．1(+)-gremlinl重组质粒中分别获得全长的大鼠gremlinl基因(gremlinl)...
- 万林燕张巧娟彭虎石慧柳长柏吴江锋
- 关键词：动物模型纤维化疾病真核表达载体
- 胰腺组织制片方法的改进被引量：2
- 2012年
- 胰腺表面被覆包膜，伸入胰腺腺泡中将实质分隔为许多小叶，形成疏松结缔组织，其间有血管、淋巴管、神经组织。胰液为碱性液体，故在苏木素．伊红（HE）切片上，腺泡胞质呈嗜碱性。胰尾部的胰岛较多，在胰岛中有小血管。实体细胞与疏松结缔组织同时存在，增加了组织处理的难度，组织处理不当，石蜡切片很容易碎，展片也很困难。胰腺与肝、脾、肾等实质器官不同。其组织结构松散，摊片时很容易散。按照普通石蜡切片的制作流程，胰腺组织与其他组织同步处理时要么组织处理过度，要么脱水不足，不能切出完整蜡带。做出的胰腺组织切片，细胞问的空隙很大。而其他组织却切片质量良好，所以，胰腺组织切片一直困扰制片人员。根据以上情况，笔者采取以下步骤处理得到了满意的结果。
- 陶彩云蒋雪梅骆社丹吴江峰鲁华张巧娟
- 关键词：胰腺组织制片方法疏松结缔组织胰腺腺泡神经组织
- 微囊化异种嗅球组织细胞悬液移植脊髓损伤大鼠核因子κB表达的变化
- 2011年
- 背景:研究发现,微胶囊包裹异种嗅球组织细胞可以减少免疫排斥反应,促进损伤脊髓的功能修复,但其作用途径尚不清楚。目的:观察微囊化异种嗅球组织细胞移植于脊髓损伤大鼠后核因子κB的表达及活性变化。方法:家兔用于制备异种嗅球组织细胞悬液。SD大鼠分为4组,即假手术组、微囊组、细胞组及单纯损伤组,后3组在建立大鼠脊髓半横断损伤模型后分别于损伤处植入明胶海绵吸附的10μL微囊化异种嗅球组织细胞、10μL异种嗅球组织细胞以及10μL生理盐水。采用苏木精-伊红染色观察脊髓组织的病理学改变,免疫组织化学染色观察核因子κB的表达变化。结果与结论:脊髓损伤后大鼠神经元细胞浆及细胞核内核因子κB表达增加,24h达高峰水平,3d后开始逐渐降低,7d基本降至正常。微囊组脊髓核因子κB阳性细胞数少于单纯损伤组及细胞组(P<0.05)。提示微囊化异种嗅球组织细胞移植对脊髓损伤后核因子κB的活性表达起抑制作用,有益于减轻核因子κB介导的炎性反应。
- 吴江锋冯罡石慧张巧娟王小莲
- 关键词：微囊嗅鞘细胞脊髓损伤异种移植
- 类转录激活样因子效应物核酸酶技术的原理及应用被引量：1
- 2014年
- 类转录激活因子效应物核酸酶(transcription activator-like effector nucleases,TALENs)是近年兴起的一种基因定点编辑技术,由特异性DNA结合结构域TALE和DNA切割结构域Fok I核酸内切酶组成。由于TALEN能对基因组中特异性基因进行识别和定点剪切,导致基因DNA双链断裂,进一步诱导DNA损伤后修复,可对基因组中的特定位点进行高效遗传操作,如基因的敲入、敲除和修复等。TALEN技术以其设计简单、特异性高、毒性低及靶点选择灵活等特点成为目前应用最为广泛的基因定点编辑技术。本文将就TALEN的原理、研究进展以及临床应用展望作一综述。
- 张巧娟张艳琼柳长柏
- 关键词：基因治疗
- gremlin1基因的诱变及其真核表达载体的构建
- 2013年
- 目的：分别构建全长、无信号肽、无核定位系统和既无信号肽也无核定位系统的大鼠gremlin1基因的真核表达载体.方法：采用PCR技术获得全长大鼠gremlin1基因（gremlin1）和无信号肽的gremlin1基因（gremlin1-DS）,以全长gremlin1为模板运用重叠延伸PCR获得无核定位系统的gremlin1基因（gremlin1-DN）,继而在gremlin1-DN的基础上去掉信号肽获得既无信号肽也无核定位系统的gremlin1基因（gremlin1-DS-DN）.分别将4组重组质粒转染到非洲绿猴肾细胞株cos7中,免疫荧光和蛋白免疫印迹检测gremlin1基因的表达.结果：构建的真核表达载体pEF1/Myc-HisC-gremlin1、pEF1/Myc-His C-gremlin1-DS、pEF1/Myc-His C-gremlin1-DN和pEF1/Myc-His C-gremlin1-DS-DN经PCR与酶切鉴定显示目的片段大小与预期结果一致；经DNA测序显示pEF1/Myc-His C-gremlin1中的gremlin1片段与Gene Bank中的gremlin1序列（NM-019282）完全吻合；pEF1/Myc-His C-gremlin1-DS中的gremlin1基因缺失信号肽序列；pEF1/Myc-His C-gremlin1-DN中的gremlin1片段实现了4个定点突变：433-435位的AAG（赖氨酸）、487-489位的CCA（脯氨酸）、490-492位的CCC（脯氨酸）、496-498位的AAG（赖氨酸）均突变为TTC（苯丙氨酸）；pEF1/Myc-His Cgremlin1-DS-DN中的gremlin1基因既缺失信号肽序列又实现了4个定点突变.将它们分别转染到cos7细胞后,免疫荧光和蛋白免疫印迹检测显示,4者均能在细胞内成功表达.结论：成功构建了pEF1/Myc-HisC-gremlin1、pEF1/Myc-HisC-gremlin1-DS、pEF1/Myc-His C-gremlin1-DN、pEF1/Myc-His C-gremlin1-DS-DN的真核表达载体.
- 万林燕张巧娟彭虎夏鑫柳长柏吴江锋张艳琼
- 关键词：诱变真核表达
- 钙网蛋白与肿瘤免疫关系的研究进展被引量：1
- 2015年
- 钙网蛋白(CRT)是一种高度保守的内质网Ca2+结合伴侣蛋白,除了维持细胞内Ca2+平衡及负责糖蛋白的折叠外,还参与线粒体代谢、基因表达和细胞凋亡等过程。蒽环类化疗药物处理时,肿瘤细胞引起的内质网应激能导致肿瘤细胞内CRT的外翻,外翻的CRT可有效增强抗原提呈细胞对肿瘤细胞的识别与吞噬,由此引发抗同种肿瘤细胞的免疫杀伤效应,诱导肿瘤免疫原性细胞进入凋亡程序。由此说明,CRT是引起肿瘤细胞免疫原性凋亡的关键因子,其在肿瘤免疫治疗过程中具有潜在的应用价值。现就CRT在肿瘤免疫中的作用进行综述。
- 高志朋张巧娟柳长柏邹黎黎
- 关键词：钙网蛋白内质网应激肿瘤免疫
- 胰腺组织制片方法的探讨
- 2013年
- 目的解决胰腺组织与其他组织同步处理,组织易脆或脱水不彻底,难以切出完整的组织切片。方法根据胰腺组织学特性,选用偏碱性的固定液固定、正丁醇透明组织,对常规组织制片中的关键步骤进行了改进。结果制片效果非常好,胰腺组织脆性明显改善,组织切片完整易切,组织细胞着色鲜艳。结论改进胰腺组织制片方法优于常规组织制片方法,克服了切屑胰腺组织较碎的弊病和摊片时组织裂开的现象。
- 陶彩云蒋雪梅骆社丹吴江峰鲁华张巧娟
- 关键词：胰腺组织固定液正丁醇二甲苯
