廖华
- 作品数：108 被引量：449H指数：9
- 供职机构：南方医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 神经生长因子诱导后的神经元样PC12细胞与成肌干细胞共培养的实验研究
- 2012年
- 目的探讨神经元样PC12细胞对C3H小鼠成肌干细胞C2C12增殖与分化的影响。方法利用Transwell建立PC12细胞和C2C12细胞共培养体系，实验分为3组：空白对照组：C2C12细胞单独培养；实验组：C2C12细胞与已分化的PC12细胞共培养；阴性对照组：C2C12细胞与未分化的PC12细胞共培养。免疫荧光染色鉴定神经生长因子（NGF）对PC12细胞的促分化效应；流式细胞仪检测共培养条件下C2C12细胞的增殖情况；逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）和实时荧光定量核酸扩增（qPCR）检测与PC12细胞共培养3、7d后C2C12细胞生肌素、结蛋白基因的表达。结果体外条件下，NGF诱导PC12细胞呈现神经元样特征：具有细长的细胞突起，并阳性表达微管相关蛋白-2。流式细胞检测证实：已经分化的PC12细胞抑制C2C12细胞的增殖。实验组DNA合成前期的C2C12细胞所占百分比（77．2％±0．4％）较空白对照组（71．0％±0．6％）和阴性对照组（70。8％±0．8％）高，反应增殖活力的增殖指数（22．8％±0．4％）较空白对照组（29．0％±0．6％）和阴性对照组（29．2％±0．8％）低，差异均有统计学意义（P〈0．05）。实验组C2C12细胞生肌素、结蛋白基因的表达高于同一培养时间其他组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论神经化的PC12细胞抑制C2C12细胞的增殖，但促进其分化。
- 刘幸卉黄维一陈荣冯利强廖华余磊曾慧君
- 关键词：成肌细胞PC12细胞细胞增殖细胞分化
- 不同基质材料修饰的Sylgard184与C2C12细胞的相容性被引量：3
- 2009年
- 目的筛选能提高硅酮橡胶弹性体（Sylgard184）与C2C12相容性的理想基质材料。方法Sylgard184双组分以10∶1的比例均匀混合,倒入6孔板的其中4孔,室温下静置固化,其余2孔做为空白对照培养组（A组）;固化后的Sylgard184表面依次经过以下处理：I型胶原包被（B组）、层黏连蛋白包被（C组）、多聚赖氨酸包被（D组）;未经包被（E组）,每组共6个样本。在不同基质材料修饰的Sylgard184表面培养C2C12细胞,利用倒置显微镜观察5组C2C12细胞的增殖、分化状态,流式细胞术（FCM）检测增殖培养48h后C2C12细胞的分裂增殖情况,RT-PCR检测增殖和分化培养48h后C2C12细胞内MyoD、myogenin mRNA的表达。结果Sylgard184材料存在细胞毒性,E组接种的C2C12细胞在24h内全部漂浮死亡;D组的大多数细胞出现死亡,仅少数贴壁存活;而B、C两组材料包被后明显减少Sylagard184的毒性,增强其表面与C2C12细胞的相容性,且C组细胞处于合成期的百分比以及增殖期的MyoD和分化期Myogenin基因mRNA的表达水平均显著高于A、B两组（P〈0.05）。结论经层黏连蛋白包被后的Sylgard184表面更有利于C2C12细胞的增殖及分化活性的表达。
- 王齐廖华秦建强余磊邱小忠于巧莲艾鹤英
- 关键词：细胞基质相容性C2C12细胞
- 体外炎性环境下小鼠成肌细胞/分化肌管的免疫特性研究被引量：2
- 2016年
- 目的对体外炎性环境下小鼠成肌细胞/分化肌管的免疫学特性进行检测,分析其是否具备抗原呈递功能。方法用IFN-γ刺激小鼠成肌细胞(C_2C_(12))及马血清诱导分化后的肌管,通过免疫荧光染色、q-PCR、Western blot、流式细胞术检测细胞表面H-2k^b、MHC-II、TLR3及相关细胞因子水平的改变。结果 IFN-γ刺激后,免疫荧光染色、q-PCR、Western blot均检测到成肌细胞/分化肌管表面MHC分子表达上调,Western blot检测到TLR3表达上调,q-PCR检测到细胞因子IL-1β、IL-6、IL-10、IL-18、MCP-1及TGF-β表达上调。结论在炎性条件下,成肌细胞/分化肌管具备炎性细胞表征,具备抗原呈递功能。
- 术蓉曹永英史丹丹谷瑞彩肖将尉丁茂超黄涛郭梦霞廖华
- 关键词：肌管IFN-Γ抗原呈递
- 松果体的细胞培养研究被引量：1
- 2002年
- 本文就松果体细胞体外培养的研究进展、培养细胞的形态学特征。
- 廖华徐达传
- 关键词：松果体细胞培养体外培养形态学
- 肌纤维转化生长因子-β信号激活与急性肌损伤炎症反应的相关性研究被引量：2
- 2021年
- 目的探讨肢体创伤后急性肌损伤炎症反应过程中肌纤维自身转化生长因子-β(TGF-β)信号对肌内炎症的影响。方法取野生C57BL/6小鼠(野生小鼠组)、肌纤维条件性TGF-β受体Ⅱ敲除小鼠(敲除小鼠组)各16只。肌毒素腓肠肌内注射诱导小鼠急性肌损伤。比较两组小鼠在注射后0、4、7、10 d肌内单核-巨噬细胞、巨噬细胞、M1型巨噬细胞、CD4+T细胞、辅助性T细胞(Th)1、2、17等的渗出差异。取新生野生小鼠和敲除小鼠各2只,体外培养原代成肌细胞,分别分为两组:干扰素组(γ-干扰素处理)和对照组(仅加入等量溶剂)。比较两组肌细胞的白细胞介素(IL)-6、IL-10、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、巨噬细胞炎症蛋白-1α(MIP-1α)、H-2Kb蛋白、H2-Ea蛋白、Toll样受体(TLR)3蛋白、TLR7蛋白表达差异,以及野生小鼠和敲除小鼠干扰素组之间的差异。结果肌毒素注射后4、7 d,敲除小鼠组肌组织内单核-巨噬细胞比例(75.73%±3.62%、45.27%±2.32%)、巨噬细胞比例(38.67%±2.76%、24.87%±2.19%)、M1型巨噬细胞比例(43.21%±0.11%、30.43%±2.19%)、CD4+T细胞比例(20.13%±1.62%、5.67%±0.32%)显著高于野生小鼠组(58.52%±2.43%、29.21%±2.45%,20.63%±2.32%、16.23%±1.25%,24.98%±0.35%、14.23%±1.69%,10.70%±0.43%、2.50%±0.45%),且以Th1和Th17为主,差异均有统计学意义(P<0.05)。体外实验结果显示:与对照组比较,干扰素组IL-6、MCP-1、MIP-1α、H-2Kb蛋白、H2-Ea蛋白、TLR3蛋白显著上调,且敲除小鼠干扰素组上调较野生小鼠干扰素组更显著,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论内源TGF-β信号缺失影响肌纤维免疫行为的调节,使肌内炎症加剧,肌细胞修复延迟。
- 吴泽锴黄涛廖钊宏肖将尉蓝海强黄静雯胡稷杰廖华
- 关键词：肌损伤转化生长因子-Β炎症肌纤维免疫反应
- 许旺细胞源神经营养因子对大鼠肌卫星细胞体外活性的影响被引量：5
- 2012年
- 目的应用细胞体外培养研究体系，探讨许旺细胞源神经营养因子与成肌干细胞一卫星细胞的作用关系。方法建立大鼠肌卫星细胞体外培养体系，制备含不同浓度的许旺细胞源神经营养因子培养基．动态观测在这些条件培养基作用下，肌卫星细胞的形态、MTT生长曲线和肌管形成率等指标的变化。结果肌卫星细胞生长能力反应在细胞增殖和分化两方面，浓度为200ng／mlSDNF可以促进卫星细胞增殖；浓度分别为50、100、200、400ng／mlSDNF时肌管形成较为突出，相对增殖作用来说，可能促分化功能更为典型。结论SDNF对肌卫星细胞增殖和分化有一定的调控作用，相对而言促分化作用更加明显。推测其在延缓失神经肌萎缩方面有一定的作用。
- 邬江朱敏朱崇涛陈斌徐昕明徐永清欧阳钧廖华邱小忠朱家恺庞水发
- 关键词：卫星细胞许旺细胞源神经营养因子增殖分化
- 骨骼肌成肌干细胞体外三维与平面培养的比较研究被引量：1
- 2010年
- 目的比较三维与平面培养C2C12细胞形态及功能差异。方法I型胶原和Matrigel Matrix修饰Sylgard 184铸槽和普通培养皿,分别接种C2C12细胞悬液,细胞增殖至80%融合时换含2%马血清的DMEM/F12诱导分化获取成熟的肌管;倒置显微镜观察肌管形态,RT-PCR和免疫荧光检测。结果Sylgard 184铸槽表面的C2C12细胞诱导分化5d出现多核、极性肌管,17d时肌管增粗成熟、极性平行,融合形成肌组织类似物,厚0.15mm,有自主收缩性;扫描电镜见肌管之间排列紧密、重叠,具有三维性;而平面培养肌管小而排列紊乱。RT-PCR表明三维培养的MyoD、Myogenin mRNA表达更为显著;Myogenin、Desmin、F-actin、MHC和nAChR蛋白检测显示,极性肌管内荧光蛋白的表达更密集。结论三维培养更有利于成肌细胞的体外极性分化和肌管间细胞连接的形成,分化肌管的存活时间较长,有利于成肌分化因子和收缩蛋白的表达,是骨骼肌的发生发育、应力加载和骨骼肌肌病良好的体外研究模型。
- 艾鹤英秦建强余磊廖华
- 关键词：C2C12细胞
- L6细胞复合培养中平行结构支架材料的细胞黏附性观察
- 2005年
- 目的:检测在L6细胞培养过程中,具有平行结构支架材料的生物相容性。方法:将医用可吸收缝线平行折叠并制备成类似圆柱体样,与大鼠L6成肌细胞株体外复合培养。利用扫描电镜观察平行结构支架材料吸附的L6细胞的形态学结构,观察L6细胞在材料上的表面相容性。结果1天后,细胞在支架材料表面黏附、伸展,随时间的延长,显示出沿支架材料纵轴排列趋势,第6天的时候,可以见到类似肌小管的结构。结论:所制备的具有平行结构的支架材料具有良好的生物相容性。
- 余磊熊绍虎邱小忠廖华黄美贤欧阳钧
- 内耳道内神经间吻合及位置关系的显微解剖研究被引量：4
- 2008年
- 目的探讨内耳道内神经走行及相互吻合关系。方法在手术显微镜下对30例成人颞骨标本进行显微解剖学研究,观察神经走行、面神经与前庭神经之间的吻合及耳蜗神经与前庭神经之间的吻合。结果(1)30例颞骨标本中,37%(11例)的面神经在内耳道内一直在前上位置;63%(19例)的面神经从内耳道底至内耳道口过程中均有围绕前庭神经纵轴不同程度的向前下旋转,旋转范围大致在30°～90°之间,旋转的方向与耳蜗旋转的方向相同。(2)30例标本中,17%(5例)的标本没有发现前庭神经与面神经吻合支;83%(25例)的面神经与前庭神经之间存在吻合支,并且形态和数目存在差异。67%(16例)的吻合支在接近内耳道口部位;33%(8例)的吻合支在接近内耳道底的外1/3的内耳道内。吻合支直径不等,约在0.5～1mm之间。(3)30例标本中,80%(24例)存在前庭耳蜗神经吻合支。在内耳道外1/3部位,13例标本中可明显看到一些刷状的神经纤维束直接进入球囊,15例在内耳道外1/3段有横行的吻合支,2例标本可以看到有多个吻合支,部分为两种形式共存。仅在内耳道中段有吻合支者1例;20%(6例)的标本未见有明显的前庭耳蜗神经吻合。结论在内耳道内,神经走行关系及神经之间的吻合均存在着个体差异。熟悉这些关系有助于手术中保护神经功能,以及探讨面神经、前庭及耳蜗疾病之间的关系。
- 田广永徐达传黄德亮廖华黄美贤李泽雨石小田钟世镇
- 关键词：显微解剖内耳道前庭神经面神经耳蜗神经
- 大剂量甲基强的松龙对大鼠急性损伤脊髓Nogo-A表达量影响的研究被引量：8
- 2006年
- 目的:研究大剂量甲基强的松龙对急性脊髓损伤大鼠脊髓Nogo-A蛋白表达量的影响。方法:采用allen’s打击方法,将大鼠分为正常组、急性脊髓损伤组(对照组)和急性脊髓损伤+大剂量MP组,损伤大鼠T8-T10节段,分别于术后3、7、14d取受损节段大鼠脊髓,运用Western-blot方法测定各时相点Nogo-A表达量及其变化,并以HE染色和免疫组化染色对受损脊髓进行形态学观察。结果:Nogo-A蛋白在各组大鼠脊髓组织中均呈阳性表达,损伤后对照组与MP组各个时相点Nogo-A表达均显著高于正常组(P<0.05),7d时最高,后逐渐下降,但14d的表达量仍高于正常组。其中大剂量MP组与对照组在各个时间点的表达量具有显著差异(P<0.05),MP组在各个时间点的表达量显著低于对照组。结论:Nogo-A是SCI后脊髓神经纤维再生的主要抑制因子,大剂量MP对Nogo-A的表达具有明显的抑制作用。
- 王宏闫慧博廖华邱小忠鲁凯伍江建明余磊赖桂华王晓佳
- 关键词：脊髓损伤NOGO-ASD大鼠
