宫伟强
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
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- 人胆囊癌CD133^+细胞亚群致瘤性的实验研究被引量：5
- 2010年
- 目的:研究CD133在人胆囊癌细胞中的表达,初步探讨胆囊癌CD133+亚群的致瘤能力。方法:将人原代胆囊癌组织植入裸鼠皮下形成移植瘤,并同人原代胆囊癌组织分别制成单细胞悬液;FCM法检测CD133的表达情况,并分选出CD133+和CD133-亚群;对不同亚群细胞进行体外克隆形成实验和裸鼠体内移植瘤形成实验,免疫组织化学法验证移植瘤的组织表型。结果:FCM法检测显示,胆囊癌细胞中1.95%~3.24%的细胞CD133呈阳性表达;体外培养显示CD133+亚群比CD133-亚群具有更强的克隆球形成能力,在裸鼠体内也具有更强的肿瘤形成能力(P<0.05);免疫组织化学检测结果提示,胆囊癌CD133+细胞形成的移植瘤同人原代胆囊癌具有相同的组织表型,均表达CA19-9和CD44 s。结论:人胆囊癌CD133+细胞亚群具有高致瘤性,其中可能富含有肿瘤干细胞。
- 石程剑秦仁义石秀春田锐王敏宫伟强
- 关键词：胆囊癌组织亚群单细胞悬液
- miR-590-3p在胰腺癌干细胞中的表达
- 目的：应用无血清培养基分离胰腺癌干细胞，检测其miR-590-3p的表达。
方法：运用无血清培养基克隆培养ASPC-1，PANC-1细胞，检测其单克隆形成、自我更新及分化、细胞周期、耐药和表面标记物CD24/C...
- 宫伟强秦仁义王敏田锐朱峰石程剑张志发李旭洪晓泉
- 关键词：胰腺肿瘤细胞培养基因表达病理细胞学
- 文献传递
- 胰腺癌细胞球的培养及其生物学特性的研究
- 目的：肿瘤干细胞理论的提出为认识肿瘤提供了新的思路，越来越多的肿瘤干细胞已经得到分离和鉴定;本文旨在应用无血清培养基分离胰腺癌细胞球，并检测其miR-590-3p的表达。
方法：运用无血清培养基克隆培养ASPC-1...
- 宫伟强
- 关键词：肿瘤干细胞胰腺癌细胞球无血清培养基
- CXCR2在胰腺导管细胞癌中的表达及意义被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨CXC趋化因子受体2(CXCR2)在胰腺导管细胞癌中的表达以及与其发生、发展的关系。方法:采用RT-PCR法、Western blot免疫印迹法检测50例胰腺导管细胞癌组织及癌旁组织和30例正常胰腺组织中CXCR2的表达水平,分析其与胰腺导管细胞癌生物学特性的关系。结果:胰腺导管细胞癌组织、癌旁组织和正常胰腺组织中CXCR2 mRNA和蛋白的表达分别为1.13±0.25、0.79±0.18、0.78±0.14和1.75±0.21、1.01±0.15、0.96±0.20,同癌旁组织和正常胰腺组织比较,胰腺导管细胞腺癌组织中CXCR2 mRNA和蛋白的表达明显升高(P<0.05)。同正常胰腺组织相比,癌旁组织中CXCR2mRNA和蛋白表达无明显升高(P>0.05)。CXCR2 mRNA和蛋白表达与肿瘤分化程度、淋巴转移和TMN分期密切相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CXCR2在胰腺导管细胞癌中高表达,与胰腺导管细胞癌发生、迁移、侵袭和转移等恶性生物学行为相关。
- 宫伟强杜福田林洪峰丁维宝董承伟
- 关键词：趋化因子CXCR2
- 微RNA-575在胰腺癌干细胞中的表达
- 2013年
- 目的应用无血清培养基培养胰腺癌干细胞，检测其微RNA-575（miR-575）的表达。方法应用无血清培养基培养ASPC—l和PANC-1细胞系，分离成球样悬浮生长的细胞球群作为胰腺癌干细胞，并通过检测侵袭、成瘤能力和表面标记物CD24／CD44表达等验证其，肿瘤干细胞特性。荧光定量逆转录PCR技术检测miR-575在胰腺癌干细胞中的表达。结果ASPC-1和PANC-1细胞系中分别有一小部分细胞能在无血清培养基中存活增殖，形成悬浮的肿瘤细胞球。ASPC-1和PANC-1细胞球的平均穿膜细胞数分别为（147．3±18．6）个和（113．2±12．9）个，较细胞系具有较强的侵袭能力。ASPC-1和PANC1细胞球移植形成肿瘤所需最少细胞数为5×10-5个，其成瘤能力是普通细胞系的100倍。ASPC-1、PANC1细胞球CD24＋CD44＋比例分别为0．38％～0．43％、4．91％～5．21％，高于细胞系中的表达（P〈O．05）。ASPC-1和PANC-1细胞球miR575表达量分别是胰腺癌细胞系的3．71、3．83倍，表达上调（P〈O．05）。结论应用无血清培养基可以从ASPC-1和PANC-1细胞系中分离出少量具有干细胞特性的胰腺癌细胞球。其miR-575表达上调，可能是胰腺癌干细胞特性维持关键基因。
- 宫伟强杜福田丁维宝林洪峰董承伟
- 关键词：胰腺肿瘤肿瘤干细胞微RNAS
- MiR-590-3p在胰腺癌干细胞中的表达被引量：1
- 2011年
- 目的应用无血清培养基分离胰腺癌干细胞，检测其miR-590—3p的表达。方法运用无血清培养基克隆培养ASPC-1、PANCl细胞，检测其单克隆形成、分化及细胞周期、半数抑制浓度（Ic。）和表面标记物CD24^＋、CD44^＋表达。实时定量PCR法检测细胞miR-590-3p的表达。结果经无血清培养基培养，（0．94±0．53）％的ASPC-1细胞和（0．57±0．12）％的PANCl细胞能存活，呈克隆球样悬浮生长，并可以在体外连续传代。加入血清后细胞球又重新贴壁生长。ASPC-1细胞球G0／G1期比例和CD24^＋、CD44^＋、CD2424^＋CD44^＋的细胞比例及IC50分别为（75．3±5．4）％、0．96％-2．01％、27．52％-34．47％、0．35％-0．44％和（224．37±5．71）μg／ml，均显著高于亲本细胞的（43．7±3．8）％、0．38％～0．42％、17．65％～18．25％、0．05％～0．08％、（11．43±2．10）仙g,／ml（P值均〈0．05）。PANCl细胞球G0／Gl期比例和CD24^＋、CD44^＋、CD24^＋CD44^＋的细胞比例及IC50分别为（80．1±4．7）％、5．31％-9．84％、72．05％～93．06％、4．91％-5．21％、（296．58±4．27）μg／ml，均显著高于亲本细胞的（46．1±5．3）％、4．09％～4．97％、47．71％-55．66％、1．48％～2．63％、（26．17±3．81）μg／ml（P值均〈0．05）。ASPC-1、PANCl细胞球miR-590-3p表达分别是亲本细胞的4．67和4．52倍。结论应用无血清培养基可以从ASPC-1、PANCl细胞系中分离出具有干细胞特性的胰腺癌细胞球，其miR-590-3p表达上调，该基因可能是胰腺癌干细胞特性维持的关键基因。
- 宫伟强秦仁义王敏田锐朱峰石程剑张志发李旭洪晓泉
- 关键词：胰腺肿瘤肿瘤干细胞微RNAS细胞球无血清培养基
