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爪蟾卵母细胞中PPARγ-PPRE调控系统的建立和应用被引量：2: 2005年; 目的在爪蟾卵母细胞中建立人类PPARγ-PPRE调控系统,为PPARγ配体类药物筛选提供一个可靠的实验平台方法将调节蛋白PPAR基因构建在爪蟾卵母细胞启动子XOE下游,构成pXOE-PPARγ重组质粒;将PPRE反应元件构建在增强型绿色荧光蛋白d2EGFP报告基因的上游,得到pPPRE-d2EGFP重组质粒。将pXOE-PPARγ质粒和pPPRE-d2EGFP质粒共注射入爪蟾Ⅴ,Ⅵ期卵母细胞中,建立PPRE调控通路的表达系统,分别在含前列腺素E1(PGE1)、吡咯列酮的培养液中培养3d,对照组共注射pXOE-PPARγ质粒和pTAL-d2EGFP质粒,用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达情况。结果在含PGE1,吡咯列酮的卵母细胞中观测到绿色荧光蛋白;对照组未见到荧光。结论PGE1,吡咯列酮可以通过影响PPRE反应元件上调其下游基因的表达;通过核内共注射的方法在爪蟾卵母细胞中建立的PPARγ-PPRE调控系统。; 严瑾沃兴德范春雷高丽萍钱颖宋家梁; 关键词：PPARΓ 爪蟾卵母细胞绿色荧光蛋白基因表达

爪蟾卵母细胞SRad-SRap调控报告系统的建立与应用: 目的在爪蟾卵母细胞中建立SRad-SRap元件调控的绿色荧光蛋白GFP表达报告系统,探讨ox-LDL对清道夫受体SR-AI调控表达的影响以及在动脉粥样硬化(As)发生过程中的作用,同时对丹参酮、川芎嗪等中药在其中的干预作...; 范春雷高丽萍沃兴德钱颖宋家梁; 关键词：爪蟾卵母细胞清道夫受体调控元件氧化低密度脂蛋白丹参酮

川芎嗪对爪蟾卵母细胞外源清道夫受体基因表达的影响被引量：15: 2005年; 目的研究川芎嗪对SRAI基因表达的影响,从基因调控水平探讨其抗动脉粥样硬化作用的机制。方法将人SRAI基因构建在γ干扰素活性位点(GAS)调控元件的下游,并导入爪蟾卵母细胞,建立人类清道夫受体SRAI基因表达调控系统。分别用经oxLDL刺激培养牛主动脉平滑肌细胞后制备的平滑肌细胞条件培养液(SCM)以及含有川芎嗪的SCM培养卵母细胞。3d后,对卵母细胞膜上的SRA1表达量检测。结果结果显示川芎嗪可抑制SCM诱导的SRAI表达,且有量效关系。结论说明川芎嗪和γ干扰素有类似的作用,可以通过干预GAS调控途经,阻止oxLDL诱导引起的SRA1过量表达。; 范春雷高丽萍沃兴德严瑾宋家梁; 关键词：爪蟾卵母细胞清道夫受体氧化低密度脂蛋白川芎嗪

山楂叶总黄酮对PPARγ-PPRE信号调控系统的影响被引量：30: 2005年; 目的应用爪蟾卵母细胞中建立的人类PPARγ-PPRE调控信号系统,研究山楂叶总黄酮通过该系统对LPL表达的影响。方法将重组质粒pXOE-PPARγ和pPPRE-d2EGFP共注射入爪蟾Ⅴ和Ⅵ期卵母细胞中,分别用含前列腺素El(PGEl),山楂叶总黄酮等中药的培养液培养3 d,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达并做荧光扫描。将pXOE-PPARγ质粒注射入爪蟾Ⅴ和Ⅵ期卵母细胞核中,分别用PGEl,山楂叶总黄酮培养液培养3 d,用ELISA双抗体夹心法测定卵母细胞表达的脂蛋白脂酶含量。结果含PGEl阳性对照组的卵母细胞中观测到绿色荧光蛋白;山楂叶总黄酮的高、中、低3个浓度均使卵母细胞中荧光蛋白表达量增加,并有显著的量效关系。PGEl和山楂叶总黄酮所表达的LPL含量比对照组高,且2.5-10μg·mL-1的山楂叶总黄酮与LPL表达量也呈明显的量效关系。结论中药提取物山楂叶总黄酮可能含有PPARγ配体样成分,通过与PPARγ结合,诱导PPRE下游目的基因的表达。; 严瑾沃兴德范春雷高丽萍钱颖宋家梁; 关键词：山楂叶总黄酮 PPARY 脂蛋白脂酶基因表达爪蟾卵母细胞

丹参酮对爪蟾卵母细胞外源清道夫受体-AⅠ基因表达的影响被引量：8: 2006年; 目的从基因调控水平探讨丹参酮对清道夫受体AⅠ(SR-AⅠ)基因表达的影响以及抗动脉粥样硬化的作用机制。方法将人SR-AⅠ基因构建在其调控元件SRad-SRap的下游,并经显微核注射导入爪蟾卵母细胞,建立SRad-SRap元件调控的SR- AⅠ表达系统；氧化低密度脂蛋白(OXLDL)刺激培养牛主动脉平滑肌细胞,制备平滑肌细胞条件培养液(SCM)；分别用SCM和含有丹参酮的SCM培养注射后的卵母细胞,用荧光标记配体法和ABC-Elisa法定性、定量检测卵母细胞膜上SR-AⅠ的表达。结果丹参酮可以抑制卵母细胞膜SR-AⅠ表达,且有量效关系。结论OXLDL可通过诱导平滑肌细胞产生相关因子,经SRad-SRap调控途径的作用上调SR-AⅠ的表达；丹参酮可以阻止SR-AⅠ的过量表达,可能是治疗As的作用机制之一。; 高丽萍沃兴德范春雷宋家梁严瑾李东成; 关键词：爪蟾卵母细胞调控元件氧化低密度脂蛋白丹参酮

丹参酮对爪蟾卵母细胞外源SR-AI基因表达的影响: 目的以两栖类动物非洲爪蟾的卵母细胞为载体,建立了人类SR-AI基因表达调控系统,用中药有效成分丹参酮对此表达系统进行干预,从基因调控水平探讨丹参酮抗动脉粥样硬化作用的机理。从而考察SR-AI和oxLDL在As过程中发挥的...; 高丽萍范春雷沃兴德卢德赵宋家梁; 关键词：爪蟾卵母细胞清道夫受体调控元件基因表达丹参酮

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宋家梁